1、ICS 67050X 04 a雪中华人民共和国国家标准GBT 23380-2009水果、蔬菜中多茵灵残留的测定_l- rj同 效液相色谱法Determination of carbendazim residues in fruits and vegetables-HPLC method2009-04-08发布 200905-01实施宰瞀髁紫瓣警矬瞥翼发布中国国家标准化管理委员会仪1”刖 置GBT 23380-2009本标准的附录A为资料性附录。本标准由安徽省质量技术监督局提出。本标准由中国标准化研究院归口。本标准起草单位：国家农副加工食品质量监督检验中心、安徽国家农业标准化与监测中心。本标准主
2、要起草人：聂磊、卢业举、邵栋梁、张波、张先铃、赵维克、姚彦如。水果、蔬菜中多茵灵残留的测定高效液相色谱法GBT 23380-20091范围本标准规定了水果、蔬菜中多菌灵残留量的高效液相色谱测定方法。本标准适用于水果、蔬菜中多菌灵残留量的测定，本标准的方法检出限：002 mgkg。2规范性引用文件下列文件中的条款通过本标准的引用而成为本标准的条款。凡是注日期的引用文件，其随后所有的修改单(不包括勘误的内容)或修订版均不适用于本标准，然而，鼓励根据本标准达成协议的各方研究是否可使用这些文件的最新版本。凡是不注日期的引用文件，其最新版本适用于本标准。GBT 6682分析实验室用水规格和试验方法(GB
3、T 6682-2008，ISO 3696：1987，MOD)GBT 8855新鲜水果和蔬菜取样方法(GBT 8855 2008，ISO 874：1980，IDT)3原理水果、蔬菜样品中多菌灵经加速溶剂萃取仪(ASE)萃取，萃取液经固相萃取(SPE)分离、净化，浓缩、定容后上高效液相色谱仪检测，外标法定量。4试剂和材料除另有说明外，所用试剂均为分析纯，实验用水均为GBT 6682规定的一级水。41甲醇：色谱纯。42 01 molL盐酸。43 2氨水(体积分数)：2 mL氨水(2528)+98 mL水。44 2氨水一甲醇溶液(体积分数)：2 mL氨水(2528)-98 mL甲醇。45 4氨水一甲醇
4、溶液(体积分数)：4mL氨水(2528)+96mL甲醇。46磷酸盐缓冲溶液(o02 molL，pH一68)：138 g磷酸二氢钠和141 g磷酸氢二钠溶于900 mL水中，用磷酸调pH至68，定容至1 000 mL。4。7 固相萃取小桂(Oasis MCX 6 mL，150 mg，或相当者)，使用前需依次用2 mL甲醇、3 mL 2氨水进行活化。48多菌灵标准溶液：100-gmL。低温避光保存。49多菌灵标准工作溶液：取上述标准溶液根据需要用流动相配制成适当浓度的标准系列工作溶液，需现配现用。5仪器和设备51液相色谱仪：配二极管阵列检测器(DAD)或紫外检测器(uV)。52加速溶剂萃取仪(AS
5、E)。萃取参考条件：34mL萃取池，温度100，压强1380MPa(2 000 psi)，加热5 rain，以甲醇为溶剂静态萃取5 rain，60溶剂快速冲洗试样，60 S氮气吹扫。53固相萃取仪(SPE)。1GBT 23380-200954旋转蒸发器。55氮吹装置。56分析天平：感量01 mg。6测定步骤61试样制备、保存按GBT 8855取水果、蔬菜可食用部分，粉碎，装入密闭洁净容器中标记明示。试样应置于4冷藏保存。62提取称取制备样500 g，加入硅藻土适量，上加速溶剂萃取仪，使用34 mL萃取池，温度100，压强1380MPa(2 000 psi)，加热5rain，以甲醇为溶剂静态萃取
6、5min，60溶剂快速冲洗试样，60 s氮气吹扫，循环一次，收集提取液，于45水浴中减压浓缩近干，用10mL 01 molL盐酸溶液将残余物溶解。63净化将上述溶液移入活化后的固相萃取小柱，依次用2 mL 2氨水(43)、2 mL 2氨水一甲醇溶液(44)、2 mL 01 molL盐酸溶液(42)、3 mL甲醇淋洗小柱，弃去淋洗液。最后用3 mL 4氨水一甲醇溶液(45)洗脱柱子，收集洗脱液，置于45水浴中用氮气吹干，用1 mL流动相溶解残渣，过045 ttm滤膜后供液相色谱测定用。64参考色谱条件641 色谱柱：C18柱(46 mm250 mm，5“m)。642流动相：磷酸盐缓冲溶液(46)
7、+乙腈(80+20)，使用前经o45 pm滤膜过滤。643流速：10 mLmin。644检测波长：286 nm。645进样量：20 pL。65测定取净化后样品测试液和标准溶液各20 pL，进行高效液相色谱分析，以保留时间为依据进行定性，以峰面积对标准溶液的浓度制作校正曲线，对样品进行定量。多菌灵标准品色谱图参见附录A。66平行实验按以上步骤对同一试样进行平行试验测定。67空白实验除不称取样品外，均按上述步骤进行。7结果计算试样中多菌灵残留量按式(1)计算：x一每并等 mXl UUU式中：X试样中多菌灵残留量，单位为毫克每千克(mgkg)；c从标准曲线上得到的多菌灵浓度，单位为微克每毫升(pgmL)；y样品定容体积，单位为毫升(mL)；m称取试样的质量，单位为克(g)。8精密度在再现性条件下获得的两次独立的测试结果的绝对差值不大于这两个测定值的算术平均值的15。2附录A(资料性附录)多菌灵标准品色谱图GBT 23380-2009图A1 多菌灵标准品色谱图
