1、园雪中华人民共和国国家标准GBT 23530-20092009-04-27发布酵母抽提物200911一01实施宰瞀鹘紫瓣訾髅瞥霎发布中国国家标准化管理委员会仪1”前 言GBT 23530-2009本标准以行业标准QB 2582-2003酵母抽提物为基础制定。本标准由全国食品工业标准化技术委员会提出。本标准由全国食品工业标准化技术委员会工业发酵分技术委员会归口。本标准起草单位：湖北安琪酵母股份有限公司、广东一品鲜生物科技有限公司、中国食品发酵工业研究院。本标准主要起草人：李沛、彭立云、张蔚、潘丽芳、伍劲松、郭新光、罗必英。酵母抽提物GBT 23530-20091范围本标准规定了酵母抽提物的定义、
2、产品分类、要求、试验方法、检验规则和标志、包装、运输、贮存。本标准适用于酵母抽提物的生产、检验与销售。2规范性引用文件下列文件中的条款通过本标准的引用而成为本标准的条款。凡是注日期的引用文件，其随后所有的修改单(不包括勘误的内容)或修订版均不适用于本标准，然而，鼓励根据本标准达成协议的各方研究是否可使用这些文件的最新版本。凡是不注日期的引用文件，其最新版本适用于本标准。GBT 191包装储运图示标志(GBT 191-2008，ISO 780：1997，MOD)GBT 601化学试剂标准滴定溶液的制备GBT 500991 食品中钾、钠的测定GB 7718预包装食品标签通则3术语和定义、缩略语31
3、术语和定义下列术语和定义适用于本标准。311酵母抽提物yeast extract以食品用酵母为主要原料，在酵母自身的酶或外加食品级酶的作用下，酶解自溶(可再经分离提取)后得到的产品，并富含氨基酸、肽、多肽等酵母细胞中的可溶性成分。根据需要可添加适量辅料进行调配，也可在生产后期增加美拉德反应工艺，属于食品配料。32缩略语下列缩略语适用于本标准。I+G：5 7一肌苷酸二钠和5一鸟苷酸二钠的总和disodium 5-inosinate(IMP)and disodium 51_guanylate(GMP)4产品分类根据生产工艺配方的不同分为：41纯品型：纯酵母抽提物，可添加食盐。42 I+G型：以高核
4、酸酵母为原料，生产的I+G型酵母抽提物，其天然I+G含量高。43风味型：以纯酵母抽提物为基料而制得的产品。5要求51蒜官要求应符合表1的规定。GBT 23530-2009裹1 酵母抽提物感官要求项 目 纯品型 I+G型 风味型液状 黄色至褐色 黄色至褐色色 膏状 黄色至褐色泽粉状 黄色液状 液浆形形态膏状 液浆形或膏状形粉状 粉末形气味 特有的气味，无异味外观 无正常视力可见杂质滋味 具有该产品特有的滋味52理化要求521纯品型应符合表2的规定。表2纯品型理化要求项 目 藏状 膏状 粉状水分 620 40o 6opH 4075总氮(除盐干基计) 90氨基酸态氮(除盐干基计) 30氨基酸态氮转化
5、率 25O550铵盐(以氮计，以除盐干基计) 20灰分(除盐干基计) 150氯化钠 50钾 50不溶物 20谷氨酸 120522 I+G型应符合表3的规定。表3 I+G型理化要求项 目 膏状 粉状水分 40o 6ol+G含量(以钠盐水合物干基计) 2O总氮(除盐干基计) 70谷氨酸 12(IMP+GMP)：(CMPq-13MP) 21：1铵盐(以氨计，以除盐干基计) 202表3(续)GBT 23530-2009项 目 膏状 粉状灰分(除盐干基计) 15o氧化钠 50pH 45658 CMP：5I_胞苷酸二钠；UMP：5 r_尿苷酸二钠。523风味型应符合表4的规定。表4风味型理化要求项 目 液
6、状 膏状 粉状水分 620 400 80总氮(除盐干基计) 50 35灰分(除盐干基计) 150氯化钠“ 50pH 4575铵盐(以氮计，除盐干基计) 1553卫生要求应符合国家有关规定。6试验方法本标准所用的水，在未注明其他要求时，均指蒸馏水或去离子水。本标准所用的试剂，在未注明规格时，均指分析纯(AR)。本标准的溶液，在未注明用何种溶液配制时，均指水溶液。61感官检验取适量样品，放人无色、洁净、干燥的玻璃杯(或50 mL烧杯)中，置于明亮处，在自然光下用肉眼观察其形态、色泽，嗅其气味，检查有无正常视力可见杂质等，并将样品配成2的溶液，品尝其滋味。62水分621原理样品于103土2直接干燥，
7、所失质量的百分数即为样品的水分。622仪器6221电热干燥箱：控温精度1。6222分析天平：感量01 mg。5223称量皿：50 mm30 mm。6224干燥器：用变色硅胶做干燥剂。623分析步骤称取试样2 g(精确至001 g)于烘干至恒重的称量瓶皿中，然后放人103士2电热干燥箱内，烘6 h后，加盖取出移入干燥器内冷却，30 rain后称量。624结果计算水分的含量按式(1)计算，其数值以表示。Xl一ml-m2100 m1一mGBT 23530-2009式中：x，样品的水分含量，；m，烘干前称量皿加样品的质量，单位为克(g)；Tn，烘干后称量皿加样品的质量，单位为克(g)；m称量皿的质量，
8、单位为克(g)。625精密度在重复性条件下获得的两次独立测定结果的绝对差值应不超过算术平均值的5。63氯化钠631原理样品溶液经处理，以铬酸钾作指示剂，用硝酸银标准溶液滴定，测定氯化钠含量。632仪器6321容量瓶：250 mL。6322移液管：25 mL。6323酸式滴定管：25 mL。633试剂和溶液633I硝酸银标准滴定溶液(o1 toolL)：按GBT 601配制和标定。6332铬酸钾溶液(IOO gL)：称取铬酸钾10 g，用水溶解，并定容到100 mL。6333乙酸铅饱和溶液(200 gL)：称取乙酸铅Pb(CHsCOO)z350 g，用水溶解，并定容到250 mL。6334磷酸氢
9、二钠溶液(IOO gL)：称取磷酸氢二钠(NazHP04)50 g，用水溶解，并定容到500 mL。634样品处理蛋白质能吸附银的化合物而影响测定结果。因此，高蛋白质的样品溶液在测氯化钠前应先除去蛋白质。蛋白质的除去：称取样品50 g(精确至00001 g)，溶解后移入250mL容量瓶，加入乙酸铅饱和溶液(6333)15 mL，摇匀静置5 min，加入磷酸氢二钠溶液(6334)20 mL，摇匀，加蒸馏水稀释至刻度。635滴定将处理后的样品过滤，弃去初滤液，取滤液25 mL，加人铬酸钾溶液(6332)05 mL10 mL，用硝酸银标准滴定溶液(6331)滴定至终点。同时做空白试验。636结果计算
10、氯化钠含量按式(2)计算，其数值以表示。 x2一丛罴胖100(2)2一万可可磊r一“ 。 “。 式中：X。样品的氯化钠含量，；c硝酸银标准滴定溶液的摩尔浓度，单位为摩尔每升(toolL)；V样品滴定时消耗硝酸银标准滴定溶液的体积，单位为毫升(mL)；K空白滴定时消耗硝酸银标准滴定溶液的体积，单位为毫升(mL)；0058 45与100 mL浓度为1000 0 molL的硝酸银标准溶液相当的以克表示的氯化钠的质量；m称取样品的质量，单位为克(g)。64总氮641原理酵母抽提物经加硫酸酸化使蛋白质分解，其中氮素与硫酸化合生成硫酸铵，然后加碱蒸馏使氨游离，用硼酸液吸收后，再用盐酸或硫酸标准溶液滴定，根
11、据盐酸或硫酸溶液的消耗量，计算总氮。dGBT 23530-2009642仪器6421凯氏定氮仪：成套仪器或自行组装的仪器。6422分析天平：感量01 mg。6423滴定管：50 mL。643试剂和溶液以下试剂均用不含氨的蒸馏水配制。6431浓硫酸：98。6432氢氧化钠溶液(400 gL)：称取氢氧化钠400 g，溶于1 L水中，静置，吸取上层清液于带橡皮塞的瓶内。6433硼酸溶液(30 gL)：称取硼酸3 g，用水溶解，并定容至100 mL。6434混合催化剂a)将硫酸钾、硫酸铜(CuSq5H：O)按97：3的比例混合，或b)用硒粉、硫酸钾按01：i00的比例混合。6435盐酸标准滴定溶液c
12、(HCI)一o1 motL：按GBT 601配制与标定。6436溴甲酚绿混合指示液：将溴甲酚绿乙醇溶液(1 gL)和甲基红乙醇溶液(1 gL)按10：4混合。644分析步骤成套仪器按使用说明书进行样品测定。自行组装的仪器按下述方法进行操作。6441样品消化称取适量样品(相当于含氮30 mg40 mg)，小心转移到已干燥的凯氏烧瓶中，加入混合催化剂6434a)5 g或6434b)25 g，缓缓加入浓硫酸20 mL，摇匀，小心加热，待内容物全部炭化，泡沫完全停止后，加强火力，并保持瓶内液体微沸，至液体呈蓝绿色澄清透明后，再继续加热30 min。6442蒸馏待消化液冷却后，缓缓加入水250 mL，摇
13、匀，冷却，并加入几块小瓷片。连接凯氏烧瓶与蒸馏装置，馏出管的尖端插入盛有25 mL硼酸溶液(6433)和4滴溴甲酚绿混合指示液(6436)的锥形瓶中，馏出管尖端应在液面之下。通过加液漏斗加入70 mL氢氧化钠溶液(6432)于凯氏烧瓶中，轻轻摇匀，使内容物混匀，然后加热蒸馏。待馏出液达到180 mL时，停止蒸馏。6443滴定用盐酸标准滴定溶液(6435)滴定馏出液，颜色由绿色消失转变为灰红色即为终点。记录消耗盐酸标准滴定溶液的毫升数。按上述操作同时进行空白试验。645结果计算总氮含量按式(3)计算，其数值以表示。x3一盟爿某等盟兴100 (3)63一_1丽=夏=i“。 “。 ”x可万一式中：墨
14、样品的总氮含量，；v2样品滴定时消耗盐酸标准滴定溶液的体积，单位为毫升(mL)；y，空白滴定时消耗盐酸标准滴定溶液的体积，单位为毫升(mL)；c盐酸标准滴定溶液的浓度，单位为摩尔每升(motL)；0014与100 mL盐酸标准溶液c(HCl)一1000 motL相当的以克表示的氮的质量；m样品的质量，单位为克(g)；x：样品的氯化钠含量，；5GBT 23530-2009x，样品的水分含量，。所得结果表示至一位小数。646精密度在重复性条件下获得的两次独立测定结果的绝对差值应不超过算术平均值的2。65氨基酸态氮651原理氨基酸为两性电介质。在接近中性的水溶液中，全部解离为双极离子。当甲醛溶液加入
15、后，与中性的氨基酸中的非解离型氨基反应，生成单羟甲基和二羟甲基诱导体，此反应完全定量进行。此时放出氢离子可用标准碱液滴定，根据碱液的消耗量，计算出氨基态氮的含量。652试剂和溶液6521氢氧化钠标准滴定溶液c(NaOH)一005molL：按GBT 601配制与标定。6522甲醛溶液(36)。653仪器6531酸度计：直接读数，测量范围(o14)pH，精度002pH。6532电磁搅拌器。6533碱式滴定管。654分析步骤称取样品5 g(精确至0000 2 g)，加水溶解并定容至100 mL。吸取样品溶液50mL于100mL烧杯中，加入55mL水，用氢氧化钠标准滴定溶液(6521)滴定至pH一82
16、0，并保持1 min不变，此结果为游离酸度，不予计量体积。慢慢加人甲醛溶液(6522)10 mL，放置1 min后，用氢氧化钠标准滴定溶液(6521)滴定至pH一920，记录消耗氢氧化钠标准滴定溶液的毫升数。同时做空白试验，记录加入甲醛溶液后，空白试验所消耗氢氧化钠标准滴定溶液的毫升数。655结果计算氨基酸态氮的含量按式(4)计算，其数值以表示。xt一巡等积等等半舢4一可而ji了i一x“”一 ”x1丽一式中：x4样品的氨基酸态氮的含量，；c氢氧化钠标准滴定溶液的浓度，单位为摩尔每升(toolL)；加人甲醛溶液后，滴定样品消耗氢氧化钠标准滴定溶液的体积，单位为毫升(mL)；y，加人甲醛溶液后，空
17、白试验时消耗氢氧化钠标准滴定溶液的体积，单位为毫升(mL)；20样品稀释倍数；0014与100 mL氢氧化钠标准溶液c(NaOH)一1000 toolL相当的以克表示的氨基酸态氮的质量；m样品的质量，单位为克或毫升(g或mL)；x。样品的水分含量，；墨样品的氯化钠含量，。所得结果表示至一位小数。656精密度在重复性条件下获得的两次独立测定结果的绝对差值应不超过算术平均值的5。666氨基酸态氮转化率661原理根据样品中的氨基酸态氮含量和总氮含量的比值，求得氨基酸态氮转化率。662结果计算氨基酸态氮转化率按式(5)计算，其数值以表示。xs一釜GBT 23530-2009式中：x5样品氨基酸态氮转化
18、率，；x4氨基酸态氮含量，；X。总氮含量，。67 pH671仪器酸度计(pH计)。672分析步骤称取试样2 g(精确至002 g)，加100 mL水溶解，用酸度计测定溶液pH。673允许差在重复性条件下获得的两次独立测定结果的绝对差值应不超过004pH。68灰分681原理样品经550灼烧后所残留的物质，以百分数表示，即为该样品的灰分。682仪器6821高温炉：温度550士20。6822分析天平：感量01 mg。6823瓷坩埚：50 mL。6824干燥器：用变色硅胶作干燥剂。683分析步骤称取样品1 g(精确至0000 2 g)于灼烧至恒重的坩埚中，先在电炉上缓缓加热，小心炭化，直至无烟，移人高
19、温炉内，在550士25灼烧4 h后，炉温降至200左右，取出坩埚，加盖，放入干燥器中，冷却至室温，称量。然后，再移人高温炉内灼烧l h，取出，冷却，称量，直至恒重。684结果计算灰分含量按式(6)计算，其数值以表示。墨一(mzl-m丽)j(mF,-巧m)_-型A-!-2100(6)墨一_丽ji玎_型 ()100式中：x。样品的灰分含量，；m，灼烧至恒重，坩埚加残渣的质量，单位为克(g)；m坩埚的质量，单位为克(g)；m，灼烧前坩埚加样品的质量，单位为克(g)；x。样品的氯化钠含量，；x。样品的水分含量，。所得结果表示至一位小数。7GBT 23530-2009685精密度在重复性条件下获得的两次
20、独立测定结果的绝对差值应不超过算术平均值的5。69铵盐691仪器同642。692试剂同643。693分析步骤预先在接收瓶中加入25mL硼酸(30 gL)以及1滴2滴溴甲酚绿混合指示液，并使冷凝管的下端伸人液面下。称取样品10 g20 g，用少量水溶解并无损地转移到凯氏定氮装置的反应室中。将10 mL氢氧化钠溶液(400 gL)倒人小玻杯中，提起玻塞使其缓缓流入反应室，立即将玻塞塞紧，并加水于小玻杯内以防漏气。夹紧螺旋夹，开始蒸馏。蒸馏5 min，移动接收瓶，液面离开冷凝管下端，在蒸馏1 min。然后用少量水冲洗冷凝管下端外部。取下接收瓶，用盐酸标准滴定溶液滴定至绿色消失转变为灰红色为终点。同时
21、做空白试验，使用2 g蔗糖代替样品。694结果计算铵盐含量按式(7)计算，其数值以表示。!丕!坠二坠!圣! m塑铲 100 (7)式中：x，样品中铵盐的含量(以氮计)，；c盐酸标准滴定溶液的浓度，单位为摩尔每升(molL)；v，样品消耗盐酸标准滴定溶液的体积，单位为毫升(mL)；y：试剂空白消耗盐酸标准滴定溶液的体积，单位为毫升(mL)；0014与100 mL盐酸Ec(HCI)一1000 molL相当的以克表示的氮的质量；m样品的质量，单位为克(g)；x，样品的水分含量，；x：样品的氯化钠含量，。所得结果保留至两位小数。695精密度在重复性条件下获得的两次独立测定结果的绝对差值应不超过算术平均
22、值的10。610钾按GBT 500991规定的方法测定。6II不溶物6111仪器61111三角瓶：250mL。61112 G3玻璃坩埚过滤器。61113电热干燥箱：控温精度士l。611I4分析天平：感量士0000 1 g。61115干燥器：用变色硅胶作干燥剂。6112分析步骤称取样品5 g(精确至0Ol g)于250 mL三角瓶中，加75 mL水，充分溶解。盖上表面皿，微沸8GBT 23530-20092 rain，用已知重量的G3玻璃坩埚过滤器过滤，将G3玻璃坩埚过滤器过滤连同滤渣置于105干燥1 h，取出放人干燥器内，冷却后称量。6113结果计算不溶物的含量按式(8)计算，其数值以表示。墨
23、一竺1X100 m式中：x。样品的不溶物含量，；m烘干后坩埚加样品的质量，单位为克(g)；m，坩埚的质量，单位为克(g)；m样品的质量，单位为克(g)。612谷氨酸6121原理使用离子交换氨基酸分析仪，样品经色谱柱分离后与(水合)茚三酮试剂混合，通过记录仪连续不断地自动测量反应产物在570 nm的吸光度。6122仪器61221 离子交换氨基酸分析仪。61222容量瓶：100 mL、1 000 mL。61223分析天平：感量土0000 1 g。61224滤膜：02 um。6123试剂和溶液61231盐酸溶液Ec(HCl)一o02molL：量取18mL浓盐酸，注入1 000mL的高纯水中，摇匀。6
24、1232谷氨酸标准储备溶液：称取0735 6 g谷氨酸于100 mL容量瓶，用盐酸溶液(61231)溶解，并稀释至刻度。该溶液含谷氨酸005 molL。61233谷氨酸标准使用溶液：吸取谷氨酸标准储备溶液1 mL，用盐酸溶液(6。1231)稀释至1 000 mL。每50 pL该溶液含有25 nmol的谷氨酸，相当于50 PL该溶液含有谷氨酸36783 ng。6124分析步骤61241样品制备称取样品1 g(精确至0000 1 g)，加入40 mL盐酸溶液(61231)，充分搅拌溶解后，全部转移至100 mL容量瓶中，并用盐酸溶液(61231)稀释至刻度。取上述溶液100 mL，用盐酸溶液(61
25、231)稀释至100 mL，再用滤膜过滤。该溶液为样品待测液。注：当谷氨酸含量大于7“时，应适当减少称样量。61242测定分别取50 pL的谷氨酸标准使用溶液和样品待测液上机测定。仪器最佳条件选择和操作方法依照设备制造商的操作说明。根据获得的色谱图，比较标准溶液和样品溶液的保留时间来鉴别谷氨酸所产生的峰。记录样品中谷氨酸的峰面积为A。，标准溶液中谷氨酸的峰面积为A。6125结果计算谷氨酸的含量按式(9)计算，其数值以表示。耻A,X,l_OOX-lOs羔100竺灿。一羹五9一一_x 1”。一面6丽 L。JGBT 23530-2009式中：x。样品中谷氨酸的含量，；A。50 pL样品待测液在仪器上
26、产生的峰面积；A。50 pL谷氨酸标准使用溶液在仪器上产生的峰面积；m50 pL谷氨酸标准使用溶液中含有谷氨酸的质量，单位为纳克(ng)；m样品的质量，单位为克(g)。613 IMP，GMP，CMP，UMP，I+G(以钠盐水合物计，以干基计)6131原理同一时间进入色谱柱的各组分，由于在流动相和固定相之间溶解、吸附、渗透或离子交换等作用的不同，随流动相在色谱柱两相之间进行反复多次的分配，由于各组分在色谱柱中的移动速度不同，经过一定长度的色谱柱后，彼此分离开来，按顺序流出色谱柱，进入信号检测器，在记录仪或数据处理装置上显示出各组分的谱峰数值，根据保留时间用归一化法或外标法定量。6132仪器613
27、21 高效液相色谱仪(配有紫外检测器和柱恒温系统)。61322色谱柱：c，s柱(如：如intersil C。8 250 ram500 5722将抽取的样本分为两份，一份作感官和理化分析，另一份保留备查。当抽取的样本总量少于200 g时，应适当加大抽样比例。73检验分类731出厂检验7311产品出厂前，应由生产厂的质量监督检验部门按本标准规定逐批进行检验，检验合格，并附上质量合格证明的，方可出厂。7312检验项目：感官要求、水分、总氮、氨基酸态氮(纯品型)、氯化钠、I+G含量(I+G型)、pH、菌落总数。732型式检验7321检验项目：本标准中全部要求项目。7322一般情况下，同一类产品的型式检
28、验每年至少进行一次，有下列情况之一者，亦应进行：a)原辅材料有较大变化时；b)更改关键工艺或设备时；c)新试制的产品或正常生产的产品停产3个月后，重新恢复生产时；d) 出厂检验与上次型式检验结果有较大差异时；e) 国家质量监督检验机构按有关规定需要抽检时。74判定规则741验收项目均合格时，判为整批产品合格。742如有一项指标不合格，应重新自同批产品中抽取两倍量样品进行复验，以复验结果为准。若仍有一项不合格，则判整批产品为不合格。8标志、包装、运输和贮存81标志811销售产品的标签应符合GB 7718的有关规定，并标明产品所属类型。812外包装箱上应标明产品名称、生产日期(批号)、厂名、厂址、净重。813储运图示的标志应符合GBT 191的有关规定。82运输821 运输工具应保持清洁、干燥，无外来气味和污染物。822产品在运输时，箱子上不应压重物，保持干燥、洁净，不得与有毒、有害、有腐蚀性物品混装混运，避免日晒和雨淋。823货物装卸时应轻拿轻放。1 2GBT 23530-200983贮存831成品不得露天堆放，不得与有霉变、有毒、有异味、有腐蚀性物质存放在一起。832成品仓库要保持阴凉、干燥、通风(最适温度25，相对湿度75)。仓库内应有防潮湿、防霉烂、防鼠虫害、防变质设施，并定期检查。
