1、ICS 67.050 X 04 中华人民共和国国家标准GB/T 23584-2009 水果、蔬菜中昵虫眯残留量的测定液相色谱-串联质谱法Determination of acetamiprid residue in fruits and vegetables- Liquid chromatography-tandem mass spectrometry 2009-04-14发布中华人民共和国国家质量监督检验检夜总局中国国家标准化管理委员会2009-08-01实施发布剧吕本标准的附录A、附录B均为资料性附录。本标准由中国标准化研究院提出并归口。GB/T 23584-2009 本标准起草单位:国家
2、加工食品质量监督检验中心(山东)、天津市产品质量监督检测技术研究院。本标准主要起草人:王骏、张卉、祝建华、张喜琦、刘祥、华京君、胡梅、杨颖。I GB/T 23584-2009 1 范围水果、蔬菜中院虫眯残留量的测定液相色谱-串联质谱法本标准规定了水果、蔬菜中皖虫眯残留量的液相色谱-串联质谱测定方法。本标准适用于水果、蔬菜中皖虫眯残留量的测定。本标准定量限:0.01mg/kg。2 规范性引用文件下列文件中的条款通过本标准的引用而成为本标准的条款。凡是注日期的引用文件，其随后所有的修改单(不包括勘误的内容)或修订版均不适用于本标准。然而，鼓励根据本标准达成协议的各方研究是否可使用这些文件的最新版本
3、。凡是不注日期的引用文件，其最新版本适用于本标准。GB/T 6682 分析实验室用水规格和试验方法(GB/T6682-2008 , ISO 3696: 1987 , MOD) 3 原理试样经粉碎、混匀后，以酸性乙腊提取，经基质分散固相萃取净化后，用液相色谱-串联质谱测定。4 试剂和材料除非另有说明，所有试剂均为分析纯，水为GB/T6682规定的一级水。4. 1 乙腊z色谱纯。4.2 甲醇:色谱纯。4.3 甲酸z色谱纯。4.4 乙酸。4.5 氯化锅。4.6 元水硫酸候。4. 7 乙酸-乙腊溶液:1+99(体积比)。4.8 甲酸水溶液:0.1%(体积分数)。4.9 N-丙基乙二胶(PSA)吸附剂:
4、150m-300m。4.10 十八烧基键和硅胶(C吸附剂:150m-300m。4. 11 院虫眯标准品:跪虫眯含量不低于96.0%。4.12 标准储备溶液:准确称取10.0mg睫虫眯标准品，用乙腊溶解并定容于100mL容量瓶中，此溶液浓度为100g/mL，作为标准储备溶液;40C冷藏保存，有效期3个月。4.13 标准工作溶液:量取标准储备溶液(4.12)适量，用乙腊稀释成浓度为0.05g/mL、0.25g/mL、0.5g/mL、2.5g/mL、5.0g/mL的系列标准工作溶液。4. 14 微孔滤膜:孔径0.22m，有机相。5 仪器和设备5. 1 液相色谱一串联四极杆质谱仪:配有电喷雾电离源。5
5、.2 分析天平:感量0.1mg。1 GB/T 23584-2009 5.3 组织捣碎机。5.4 超声波振荡器。5.5 涡旋混合器。5.6 振荡器。5. 7 高速离心机:转速不低于10000 r/mino 6 样品制备取有代表性的水果、蔬菜样品适量，将可食用部分充分捣碎、混匀，置于洁净的容器中，密封并做好标记，于一18oc避光冷冻保存。7 样品处理7. 1 提取称取5g(精确到0.01g)试样匀浆，置于30mL具塞离心管中，加入5mL乙酸-乙腊溶液(4.7)，摇匀，超声波提取15min，加入5g氯化锅，盖上塞子，振荡5min ,4 000 r/min离心5min，将上层有机相转移至10mL容量瓶
6、中。在离心管中再加入4mL乙酸-乙腊溶液(4.7)，重复上述操作，合并有机相至同一10mL容量瓶中，用乙腊定容至刻度，摇匀。7.2 净化移取7.1中提取液1.5 mL，加入预先装有300mg元水硫酸镜的离心管中，混匀后再加入50mg C18吸附剂(4.10)、100mg PSA吸附剂(4.9)，涡旋混合1min, 10 000 r/min离心5min，移取上清液200L，加入800L水，混匀后经微孔滤膜(4.14)过滤备用。8 测定8. 1 操作条件8. 1. 1 液相色谱条件a) 色谱柱:C18柱，50mmX2.1 mm(内径),1. 7m，或相当者;b) 流动相及梯度洗脱条件见表1; 时间
7、/min。0.5 4.0 5.0 5.1 7.0 c) 流速:0.30mL/min; d) 柱温:40oC; 。进样量:10L。8. 1. 2 质谱参考条件参见附录A。8.2 标准曲线的绘制表1流动相及梯度洗脱条件流动相A(甲醇)/%10 10 60 90 10 10 流动相B(O.l%甲酸水溶液)/%90 90 40 10 90 90 称取相同基质的空白样品5份，每份5g(精确至o.01 g)，分别加入系列标准工作溶液(4.13)各2 GB/T 23584-2009 1. 00 mL，按7.1和7.2操作，所得系列溶液中院虫眯的浓度依次为:1. 0 ng/mL、5.0ng/mL、10.0ng
8、/mL、50.0 ng/mL、100.0ng/mL。按照浓度由低到高进样检测，以定量离子峰面积-浓度作图，得到标准曲线回归方程。院虫眯标样的多反应监测质量色谱图参见附录B中的图B.L8.3 测定8.3. 1 定性测定将空白添加标准溶液和待测样品在上述条件下进样测定，若样品和基质标准溶液质量色谱图中院虫脉的保留时间一致，且定性离子对的相对丰度偏差符合表2的规定，则可判定样品中存在院虫脉残留。表2定性测定时相对离子丰度的最大允许偏差士25:1: 30 三三10士50相对离子丰度/%允许的相对偏差/%50 土202050 1O20 8.3.2 定量测定外标法定量。待测样液中院虫脉的响应值应在标准曲线
9、线性范围内，超过线性范围则应稀释后再进样分析。8.4 结果计算按式(1)计算试样中院虫脉残留量:-Anu -nu v-o x- c一-m x . ( 1 ) 式中:X一一样品中皖虫眯残留量，单位为毫克每千克(mg/kg); c一一由标准曲线得出的测定液中院虫脉的浓度，单位为纳克每毫升(ng/mL); V一一测定液定容体积，单位为毫升(mL);m一一样品质量，单位为克(g)。测定结果保留两位有效数字，以两次平行测定的算术平均值报出结果。8.5 空白实验除不称取样品外，均按上述测定条件和步骤进行。9 方法定量限本方法的定量限为0.01mg/峙。10 回收率在添加浓度O.01 mg/kg 1. 0
10、mg/kg浓度范围内，回收率在80%.，110%之间，相对标准偏差小于10%。11 允许差在重复性条件下获得的两次独立测定结果的绝对差值不得超过算术平均值的10%。3 GB/T 23584-2009 4 质谱参考条件:a) 电离方式:电喷雾电离，正离子;b) 毛细管电压:3.2kV; c) 离子源温度:110 oC; d) 脱溶剂气温度:450oC ; e) 脱溶剂气(N2)流量:600L/h; f) 锥孔气(N2)流量:50L/h; 附录A(资料性附录)质谱参考条件g) 分辨率:Q1(单位质量分辨)Q3(单位质量分辨); h) 碰撞室压力:3. 6 X 10-3 mPa; i) 扫描方式:多
11、反应监测(MRM); j) 庭虫脉参考保留时间、定性定量离子对及锥孔电压、碰撞能量见表A.1。表A.l院虫脉参考保留时间、定性定量离子对及锥孔电压、碰撞能量名称保留时间/定性离子对定量离子对锥孔电压/口un(m/z) (m/z) V 223126 院虫眯3.3 223126 32 22356 碰撞能量/eV 20 16 GB/T 23584-2009 附录B(资料性附录)院虫脉标样的质量色谱图3.32 100叮这川O!If 1 f 1 . 1 1 1 r lt .1. 223126 0.50 1.00 1.50 2.00 2.50 3.00 3.50 4.00 4.50 5.00 t/min
12、a) 22356 0.50 1.00 1.50 2.00 2.50 3.00 3.50 4.00 4.50 5.00 t/min b) 图B.110 ng/mL睫虫眯标样的多反应监测质量色谱图5 gON|寸山的NH闰。华人民共和国家标准水果、蔬菜中院虫眯残留量的测定液相色谱-串联质谱法GB/T 23584-2009 国中* 中国标准出版社出版发行北京复兴门外三里河北街16号邮政编码:100045网址电话:6852394668517548 中国标准出版社秦皇岛印刷厂印刷各地新华书店经销 印张o.75 字数11千字2009年6月第一次印刷开本880X 1230 1/16 2009年6月第一版* 定价16.00元如有印装差错由本社发行中心调换版权专有侵权必究举报电话:(010)68533533书号:155066 1-37622 GB/T 23584-2009 打印日期:2009年10月19日
