1、ICS 11.040.20 C 31 中华人民共和国医药行业标准YY 0326. 3-2005 一次性使用离心式血浆分离器第3部分:血浆袋Plasmapheresis centrifuge apparatus for single use Part 3: Containers for plasma 2005-12-07发布2006-12-01实施国家食品药品监督管理局发布060801000081 目U昌YY 0326的总标题是一次性使用离心式血浆分离器，包括以下部分:一一第1部分:血浆分离杯;一第2部分:血浆管路;一第3部分:血浆袋。本部分的附录A、附录B和附录C均是规范性附录。本部分由全国医
2、用输液器具标准化技术委员会提出。本部分由国家食品药品监督管理局济南医疗器械质量监督检验中心归口。本部分起草单位:山东省医疗器械产品质量检验中心、上海输血技术有限公司。YY 0326.3一2005本标准参加起草单位:山东威高集团医用高分子制品股份有限公司、陕西正摞科技发展有限责任公司。本部分主要起草人:由少华、姜跃琴、陈晓通、刘忠让、吴平。I 1 范围一次性使用离心式血浆分离器第3部分:血浆袋YY 0326. 3-2005 YY 0326的本部分规定了与YY0326. 1规定的血浆分离杯、YY0326.2规定的血浆管路和YY 0328规定的采血器配套使用的血浆袋的要求。本部分所规定的血浆袋贮存采
3、集的血浆用于制备血液制品，不能用于临床输血。2 规范性引用文件下列文件中的条款通过YY0326的本部分的引用而成为本部分的条款。凡是注日期的引用文件，其随后所有的修改单(不包括勘误的内容)或修订版均不适用于本部分，然而，鼓励根据本部分达成协议的各方研究是否可使用这些文件的最新版本。凡是不注日期的引用文件，其最新版本适用于本部分。GB/T 6682分析实验室用水规格和试验方法(GB/T6682-1992 , neq ISO 3696: 1987) GB/T 14233. 2 医用输液、输血、注射器具检验方法第二部分:生物学试验方法GB/T 16886. 1 医疗器械生物学评价第1部分:评价与试验
4、(GB/T16886. 1-2001 , idt ISO 10993-1:1997) YY 0326. 1 一次性使用离心式血浆分离器第1部分z血浆分离杯YY 0326.2 一次性使用离心式血浆分离器第2部分t血浆管路YY 0328 一次性使用机用采血器3 术语和定义下列术语和定义适用于YY0326的本部分。3. 1 血浆袋container for plasma 专门设计成可与YY0326.1规定离心杯的出口相连接，并收集血浆的袋式容器。3.2 贮存寿命s曲helf-Ii灭菌和失效日期之间的期限，超过失效日期后血浆袋不能用于采集血浆o4 型式、规格和标记4. 1 型式与规格血浆袋由袋体和输入
5、管路组成。血浆袋的规格按其公称容量一般分为600mL、800时，、900mL 和1000mL等。4.2 标记示例血浆袋用描述字样血浆袋加YY0326本部分的编号、最后加血浆袋的公称容量标记。例如，符合YY0326本部分要求公称容量为800mL血浆袋的标记为:血浆袋YY 0326. 3- 800 mL YY 0326. 3-2005 5 设计5. 1 总则血浆袋的设计和制造应能为血浆的采集、贮存、处理、转移、分离提供安全和便利。血浆袋应使采集的血浆受微生物污染的危害降至最低，并与YY0326.1规定的分离杯相适用。5.2 输入管路5.2.1 血浆袋应有一个输入管路，供采集血浆。输入管路应配置有与
6、符合YY0326.1的分离杯匹配的接口，并有保护套。5.2.2 输入管路在正常使用时应与外界隔绝无破裂。5.2.3 血浆袋充水至公称容量并密封后，与血浆袋连接的输入管路应形成密封，并且连接处抗泄漏，能承受施加到管路上的20N的拉力，持续15s元泄漏。施加拉力时应与连接处边缘成直角，且在血浆袋平面纵轴方向上。试验在(23士5)c条件下进行。连接处应无泄漏，血浆袋还应满足6.2.6中规定的要求。5.2.4 以目力检测，输入管路应无裂纹、气泡、扭结或其他缺陷。5.3 悬挂血浆袋应有悬挂或固定装置，不影响血浆袋在采集血浆、贮存、处理和转移时的使用。在(23士5).C条件下，悬挂或固定装置应能承受沿输入
7、管路轴向施加的25N拉力60min不断裂。6 要求6. 1 总则血浆袋在使用条件下(见6.2.5)应透明或半透明、无色(见6.2.4)、柔软、无菌、无热原、无毒性(见6.4)并不易破碎。在正常贮存条件下应与内装液相容。血浆袋应满足最终灭菌的要求，在灭菌过程中和在温度不超过40C的贮存寿命内不应帖连。6.2 物理要求6.2.1 生产条件血浆袋制造、组装和贮存的全过程，应在符合国家相关法规规定的洁净、卫生条件下进行。在整个制造过程中应采取各种有般的预防措施，以降低微生物或外来物质污染的风险。6.2.2 灭菌6.2.2. 1 血浆袋应经过确认过的方法灭菌。6.2.2.2 灭菌方法不应对血浆袋的材料产
8、生不良影响，且不使各连接处松动、塑料材料热合强度下降和血浆袋产生明显变形。6.2.2.3 制造厂应能向国家主管部门提供所用灭菌过程有效性的证据。6.2.3 透明度当按第B.l章的规定试验时，与一充满水的同种血浆袋相比较，透过血浆袋应能观察出悬浮液呈乳白色。6.2.4 色泽灭过菌的血浆袋材料着色的程度应不影响对血浆颜色的评价。6.2.5 热稳定性将血浆袋充人符合GB/T6682的水至公称容量的一半，血浆袋应能承受缓慢冷冻至一80.C的低温环境，并贮存24h，随后浸入(37士2).C的水浴中60min.然后再恢复至室温，血浆袋应仍能满足5. 2. 3、5.3、6.2.6和6.2.7的要求。6.2.
9、6 抗泄漏向血浆袋内充入符合GB/T6682的水至公称容量，并将其密封。随后将血浆袋放在两平板之间进2 YY 0326. 3-2005 行挤压，在(23土5)oc条件下，使内部压力升至高于大气压强50kPa，持续10min，应不产生世漏。对于软聚氯乙烯(PVC)血浆袋，宜在40C下重复进行上述试验。6.2.7 微粒污染血浆袋的生产应避免微粒污染。按第B.2章规定试验时，血浆袋液路中宜无可见粒子。注:建立提供粒子数量和大小极限的工作正在进行中。目前可采用药典中给出的限量和试验方法(如欧洲药典中规定的制剂的极限和方法)。6.3 化学要求6.3.1 原始喜器或薄片要求薄片应符合表1规定。性能灼烧残渣
10、6.3.2 试验液要求表1巍烯姬和PVC灼烧残渣塑料材料聚烯短含增塑剂的PVC最大允许残渣0.5 mg/g 1 mg/g 当对按附录A制备的浸提被进行试验时，应不超过表2规定的限量。表2血浆袋漫提液化学限量性能最大允许限量还原物质1. 5 mL 镀离子0.8 mg/L 氯离子(Cl-) 4 mg/L 金属，Ba，Cr，Cu，Pb每种1mg/L Sn , Cd 每种0.1mg/L Al 0.05 mg/L 重金属2 mg/L 酸碱度0.4 mL氢氧化纳溶液，以NaOH)=O.01 mol/L; 0.8 mL盐酸溶液，c(HCI) =O. 01 mol/L 蒸发残渣5 mg或50mg/L 浊度微乳
11、浊，但不超过参照悬浮液色泽元色紫外(UV)吸收在230nm360 nm范围内，0.2 醇溶出物a15 mg/100 mL a 只适用于邻苯二甲酸二(2-乙基)己醋CDEHP)增塑的软PVC。试验方法第A.2章试验方法A. 4.1 A. 4. 2 A. 4. 3 A. 4. 4, 1 A. 4. 4.2 A. 4. 5 A. 4. 6 A. 4. 7 A.4.8 A. 4. 9 A. 4.10 宜慎重选择制造血浆袋所用材料，尽量减少因材料化学成分沥出进入内装液而引起的风险。对所用材料的毒性和血浆袋与内装液的生物相容性宜特别给予注意。注，GB 15593规定了制造血浆袋材料的成分和不同组分的限量及
12、重金属和氯乙烯单体的限量。6.3.3 环氧乙蜿残留量若血浆袋采用环氧乙炕灭菌，环氧乙烧残留量应不大于10g/g。注，GB/T 14233. 1及GB/T16886.7规定了环氧乙烧残留量的试验方法和放行控制。单包装上采用易于环氧乙烧迸出的透析材料(如采用一面是透析纸，另一面是塑料膜的复合包装袋，或在己打孔的包装袋上加贴透析纸)可YY 0326.3一2005有效降低环氧乙烧残留。6.4 生物学要求6.4. 1 总则血浆袋不应对血浆产生不良作用，不应释放出能产生毒性、细胞毒性、抑菌、杀菌、热原或溶血反应的物质。注:GB/T 16886给出了通用的毒性试验方法(见参考文献)。除了第C.2章第C.5章
13、中规定的试验以外，第C.6章中给出的试验可用作指南。6.4.2 微生物不透过性按第C.2章试验时，血浆袋应不透过微生物。6.4.3 相睿性按第C.3章、第C.4章和第C.5章规定试验时，血浆袋不应向血浆中释放任何能产生热原、毒性或榕血反应的物质。7 检验规则7. 1 型式检验时生物学评价应按照GB/T16886.1规定的基本原则进行。若无特殊规定，物理性能各随机检验5套。7.2 所有型式检验项目均合格，则通过型式检验。型式检验未通过时，不得进行批量生产。8 包装8. 1 8.2至8.6规定了密封在外包装内的血浆袋的要求。8.2 制造厂应根据血浆袋的稳定性数据给出贮存寿命(见3.2)。8.3 外
14、包装材料或对其内表面的任何处理既不宜与血浆袋相互反应，又能防止霉菌生长。如采用化学杀真菌剂，应提供对血浆袋元有害渗透或不良影响的证明。8.4 外包装的密封一旦打开或再闭合应有明显打开过的痕迹。8.5 外包装在正常处置和使用条件下，应有足够强的耐破损性。8.6 血浆袋及其组件在外包装中的放置，应尽可能防止输入管路形成扭结和永久变形。9 标签9. 1 总则血浆袋的标签应符合相应的国家法律法规要求，此外还应包括9.2至9.5规定的要求。可使用YY 0466中给出的图形符号。9.2 血浆袋上的标签如可能，标签应包括下列a)至i)中规定的信息，但如果标签的空间太小，d)、e)、f)和g)允许在使用说明书
15、中给出而不用在标签上给出t4 a) 预期使用的描述;b) 可采集血浆的体积(毫升)或质量(克); c) 无菌、无热原限定条件的说明;d) 若发现任何肉眼可见变质迹象禁止使用的说明;e) 不需通气的说明;f) 血浆袋仅供一次性使用的说明;g) 血浆袋的使用说明;h) 制造厂和/或供应商名称和地址;) 批号。YY 0326.3-2005 若适宜，标签还可包括超过失效日期后血浆袋不宜用于采集血浆和有关产品编码的信息。9.3 外包装标签外包装标签应包括下列内容:a) 制造厂和/或供应商名称和地址;b) 失效日期;c) 批号。如果使用透明外包装，9.2和9.3要求的信息宜标在血浆袋的标签上。9.4 运输
16、箱上的标签该标签宜是明显可见的，应包括下列信息:的制造厂或供应商名称和地址;b) 内装物说明;c) 贮存条件;d) 批号;e) 失效日期。9.5 标签要求血浆袋的标签应:a) 为血浆袋制造厂和用户信息保留足够使用的面积;b) 在血浆袋上留出一个无任何标记的区域，以便于目力检验血浆;c) 标签上的印字不会渗人血浆袋的塑料材料内;d) 使用时标签上的印字仍保持清晰可认。5 YY 0326. 3-2005 A.l 总则附录A(规范性附录)化学试验试验材料宜取自完成的、灭过菌的血浆袋上与血浆接触的材料，包括血浆袋上的塑料薄片、输入管路及其他与血浆接触的部分。A.2 灼烧残渣的测定称量1.00 g2.
17、00 g材料(切成小片)置于己灼烧并恒量的捕塌内，精确称量，加热至1000C 1050C 1 h。然后在(550土25)OC下灼烧。放入干燥器内冷却并称量，重复灼烧直至恒量。计算每克材料残渣的质量。可以采用药典中描述的评价方法。A.3 试验液制备先后两次向血浆袋内充入公称容量的注射用水，振摇约1min后排空血浆袋。洗液排空后，向血浆袋内充入公称容量的注射用水。然后挤压血浆袋，排出血浆袋中残存空气并密封血浆袋。在(70士2)OC下浸提(24:l:2泊。取250mL的注射用水用作对照液(空白液)。A.4 试验A. 4.1 还原物质的测定加20.0mL高锤酸伺c(KMn04)=0.002 mol/L
18、和1.0 mL硫酸溶液c(HzS04)=1mol/L至20.0 mL的试验液中，煮沸3min。加入1.0g腆化饵，用硫代硫酸铀榕液c(NazSz 03) = 0.01 mol/L 滴定直至溶液呈淡棕。加入5滴淀粉溶液，滴定至无色。计算试验液和水(作为对照液)消耗高锚酸锦c(l/5KMn04)=0.01 mol/L洛液的量，两者之差不应大于1.5 mL。A. 4. 2 镀离子测定向10mL试验液中加入2mL氧氧化纳c(NaOH)= 1 mol/L.使溶液呈碱性。随后用蒸馆水稀释至15mL.加入0.3mL纳氏试剂)。同时制备对照液。向8mL质量浓度为(NHn=lmg/L镀标准溶液中加入2mL氢氧化
19、铀c(NaOH) = 1 mol/L.使溶液呈碱性。随后用蒸馆水稀释至15mL.加入0.3mL纳氏试:JfiJ1) 0 30 s后进行检查，试验溶液所呈现出的黄颜色不应深于对照溶液。A.4.3 氯离子测定加0.3mL硝酸银洛液c(AgN03)=0.1 mol/L至O.15 mL的稀硝酸中，再将该混合液加至15 mL的浸提液中。同法用12mL氯标准液(5mgCl-/U和3mL水制备对照液。振摇混合液.2min后，用浸提液制备的洛液不应比对照液泪浊。应避免阳光直射溶液。A.4.4 金属的测定1)见GBjT14233. 1-1998中5.8.2怕。6 YY 0326. 3-2005 A. 4. 4.
20、1 重金属用原子吸收光谱分析法测定金属Ba、Cd、Cr、Cu、Pb，Sn和Al。将按第A.3章制备的试验液蒸发使其浓缩可以提高检测限。在这种情况下，向250mL试验液中加入2.5mL盐酸溶液pCHCD= 10 g/L。A. 4. 4. 2 重金属试验的另选方法重金属总量化学检测法可用于代替原子吸收光谱法检测按第A.3章制备的试验液中的重金属。向12mL试验液中加入1.2 mL硫代乙酷胶试剂和2mL乙酸镀缓冲溶液CpH=3.5)，立即混合。同法向10mL铅榕液(Pb2+)= 2 mg/L中加入2mL试验液，制备对照液。2min后被检榕液所呈现出的棕色不能深于对照液。A.4.5 酸磁度测定向10m
21、L浸提液中加入2滴酣t试液，溶液不应呈红色。加入少于0.4mL的氢氧化铀榕液c(NaOH) =0.01 mol/L ，应呈红色。加入0.8mL盐酸c(HCl)=0. 01 mol/L，红色应消失。加入5滴甲基红溶液，梅液应呈红色。A.4.6 蒸发残渣测定在水浴上将100mL的试验液蒸干，并在1050C下干燥至恒量。A. 4.7 浊度和乳色程度测定A. 4. 7.1 总则使用同一无色、透明、内径为15mm至25mm的中性玻璃平底试管，比较被测液和按下所述新制备的对照悬浮液，试管内液体层深40mm。制备好悬浮液后，在漫射日光下，垂直于黑色背景观察榕液5mino光线的漫射应使对照悬浮液1能易于区分于
22、水，对照悬浮液2能易于区分对照悬浮液1。A. 4. 7. 2 试剂A. 4. 7. 2. 1 硫酸雕溶液用水溶解1g硫酸胁，稀释至100mL，放置4h至6h。A.4.7.2.2 六亚甲基四肢溶遭在100mL具塞玻璃瓶中，用25mL的水溶解2.5g六亚甲基四胶。A.4.7.2.3 初级乳色悬浮液向六亚甲基四肢榕液(A.4. 7. 2. 2)中加入25mL硫酸阱潜液(A.4.7.2.1)，泪合后放置24h。该悬浮液贮存在无表面缺陷的玻璃容器中可保持稳定两个月。悬浮液不应粘附到玻璃容器上，使用前应充分混合。A. 4. 7. 2. 4 乳色标准液加水稀释15mL初级悬浮液(A.4. 7. 2. 3)至
23、1000 mL。该悬浮液应是新制备的，存放至多24h。A. 4. 7. 2. 5 对照悬浮液按表A.1制备对照悬浮液，使用前振荡?昆匀。对照悬浮液乳色标准液，V水，VA.4.7.3 结果表示1 F d 95 表A.l对照悬浮液2 10 90 单位为毫升3 4 30 50 70 50 A.4.7.3.1 当在上述条件下检查时，如果液体透明度和水或所用的溶剂的透明度一样，或其乳色与对照悬浮液1元明显差别，则认为该液体清澈。A.4.7.3.2 如液体的乳色度比A.4. 7. 3.1明显，但与对照悬浮液2元明显差别，则认为液体微乳YY 0326. 3-2005 1虫。A.4.7.3.3 如液体的乳色度
24、比A.4. 7. 3. 2明显，但与对照悬浮被3元明显差别，则认为液体乳浊。A.4.7.3.4 如液体的乳色度比A.4. 7. 3. 3明显，但与对照悬浮液4元明显差别，则认为液体高度军u虫。A.4.8 色泽程度测定A. 4. 8.1 总则在棕黄-红范围内的液体色度的测定应按A.4. 8. 2和A.4. 8. 3规定的两种方法之-进行。A. 4. 8. 2 方法1在漫射日光下，以白色为背景，用2支无色、透明、内径为12mm的中性玻璃试管，水平观察比较2 mL试验液和2mL水的颜色。A. 4. 8. 3 方法2在漫射日光下，以白色为背景，用2支无色、透明、内径为16mm的中性玻璃试管，沿试管轴垂
25、直观察比较10mL试验液和10mL水液柱的颜色。A.4.8.4 结果表示在方法1或方法2规定的条件下测定时，如试验液具有水的外观，即认为无色。A. 4. 9 紫外(UV)吸收测定在1cm池内，测定浸提液相对于空白液在230nm至360nm波长范围内的紫外吸收度。A.4.10 醇溶出物(DEHP)测定注:该测定方法仅适用于含有DEHP的软PVc，A. 4. 10. 1 试剂A. 4. 10. 1. 1 乙醇z体积分数为95.1%至96.6%.密度从0.8050 g/mL至0.8123 g/mL。A. 4. 10. 1. 2 浸提榕剂:用液体比重天平测定密度p为0.9373 g/mL至0.9378
26、 g/mL的乙醇水混合液。A. 4. 10. 1. 3 邻苯二甲酸二(2乙基)己醋(CZ4 H38 0 4 ) : -种无色油状液体，不溶于水，溶于有机搭剂;p为0.982g/mL至0.986g/mL.20oC时折光指数nD20 l. 486至l.487。A. 4. 10.2 标准溶灌制备A. 4. 10.2. 1 溶液1在乙醇(A.4.10. l. 1)中榕解1g DEHP(A. 4.10. 1. 3).用乙醇稀释至100mL。A.4.10.2.2 溶液2用乙醇稀释10mL的溶液l(A.4.10.2.1)至100mL。A. 4. 10.2.3 标准溶液A至E按下列步骤配制标准榕液A至标准榕液
27、E:a) 溶液A.用浸提榕剂(A.4.10. 1. 2)稀释20mL榕液2(A.4.10.2.2)至100mL(DEHP含量:20 mg/lOO mL)。b) 溶液B:用浸提溶剂稀释10mL榕液2至100mL(DEHP含量:10 mg/100 mL)。c) 溶液C.用浸提榕剂稀释5mL溶液2至100mL(DEHP含量:5 mg/100 mL)。d) 榕液D:用浸提溶剂稀释2mL洛液2至100mL(DEHP含量:2 mg/l 00 mL)。e) 溶液E:用浸提榕剂稀释mL溶液2至100mL(DEHP含量:1 mg/100 mL)。A.4.10.3 标准曲线法在272nm下，用浸提溶剂作参照液，测
28、量标准溶液(A.4. 10. 2. 3)的最大吸光度，绘出吸光度对DEHP浓度的曲线。A. 4.10.4 漫提步骤将浸提溶剂加热到37C.通过血浆袋的采血管注入血浆袋内至公称容积的一半，将血浆袋中的空8 YY 0326. 3-2005 气全部排出，封住采血管，将其水平漫人(37:!:1)OC的水浴中(60士1)min.不加振动。从水洛中取出血浆袋轻轻倒转10次，将内装液移至一只玻璃烧瓶中。用浸提溶剂作参照液，测量在272nm处最大吸收度。. 4.10.5 结果表示将血浆袋中获得的结果(见A.4. 10.4)和标准榕液吸光度校准曲线(见A.4.10.3)比较，测定可浸提的DEHP的量。9 YY
29、0326.3一2005B. 1 遗明性试验附录B(规范性附录)物理试验将初级乳色悬浮液(A.4.7.2.3)在lcm池中640nm条件下，测量时稀释至吸光度为O.37至0.43(稀释比约1: 1肘，然后充入血浆袋至公称容量。B.2 微粒污染试验B.2.1 在洁净室条件下向血浆袋内充入用孔径为0.2m的滤膜过滤过的纯化水2)至公称容量。B.2.2 用能快速直接检验可见粒子的适宜方法检验血浆袋中的液体。2) 中国药典或欧洲药典。10 YY 0326. 3-2005 C.1 试验液制备C. 1. 1 试验市1(水浸提渣)附录C(规范性附录)生物学试验两次向血浆袋内充入公称容量的注射用水，振摇约1mi
30、n后倒空洗涤液。向血浆袋内加入无菌、无内毒素的氯化铀溶液(NaCl)=9g/日，所加榕液应满足血浆袋的内表面积(平方厘米)与氯化铀溶液的体积(毫升)之比至少为6: 1。随后挤压血浆袋，排出残存气体并密封。血浆袋可装入一个外袋内，在(70士2)OC下浸提(24土2)h。冷却后混合各血浆袋中的浸提液。以同样的方法在一烧瓶内制备250 mL无菌、无内毒素的等渗氯化铀溶液，用作对照液(空白样品产。C. 1.2 试验渡n(油漫提渡)按C.1.1 制备试验液I的方法制备试验液n，但一一用注射用水清洗过的血浆袋在500C下干燥1h，或干燥至以目力检测无水分为止;一一采用胃肠外用芝麻油4)或棉籽油4)作为浸提
31、介质;一一所用的浸提介质作为对照液。C.2 微生物不透过性试验取数只血浆袋在无菌条件下加入培养基(如酷蛋白陈大豆粉肉汤培养基)至公称容量，密封。将血浆袋或血浆袋的适宜部分漫入试验菌悬液(如枯草杆菌变种NCTC10073，菌含量约106CFU/mL)中至少30min。取出后用无菌水清洗，将血浆袋置于适合试验菌生长的温度(如枯草杆菌需370C)下培养至少7d。以相同方式制备1个血浆袋，向其内装液接种1mL试验菌悬液用作阳性对照。也可以将培养基注入血浆袋后穿刺血浆袋的特定区域，再将血浆袋漫入试验菌液内用作阳性对照。检查内装掖是否有微生物生长。阳性对照应呈现混浊，试验样品应不?昆浊。C.3 细菌内毒素
32、试验按GB/T14233. 2试验时，每只血浆袋注入浸提介质不超过40mL，细菌内毒素限量应小于0.5EU/mL。C.4 细胞毒性试验C. 4.1 细胞培养方法将L-929哺乳动物成纤维培养细胞(如ATCC细胞系CCL1 , NCTC Clone 929)用含血清MEM(最低必需培养基)制备成细胞密度约105个/mL的细胞悬液。将制备好的细胞悬液2mL加入至直径3) 适宜的阴性和阳性对照样品如HD-PE高密度聚乙烯CUSP阴性生物反应参照样品)和含有有机锡添加剂的PVC(USP阳性反应参照样品)0 US Pharmacopoeia , Rockville , MD. 20852. USA有售。
33、这一信息仅是为本标准的使用者提供方便，并不表示IS0对这些产品的认可。如表明能导致相同的结果，也可使用其他等效的产品。的见美国药典。11 YY 0326. 3-2005 为35mm的培养皿内，在(37士1)OC下、体积分数(百分数)为代CO2)= (5士1)%的二氧化碳气体中培养至少24h.直至不小于80%的汇合单层细胞形成。用显微镜观察培养细胞，证实已形成均匀、近汇合单层细胞。C.4.2 步骤培养完成后，将培养皿中培养液弃去，替换成2mL用含血清细胞培养液稀释的试验液1(试验液的体积分数为25%)。以同样的步骤处理试验液E、试验液I和E的对照液(空白样品)、阴性对照样品和阳性对照样品的浸提液
34、(见C.1.1和C.1. 2)。所有试验液、空白样品和对照液均平行制备两个培养皿。全部培养皿置(37:!:1)oC的有氧环境中培养48h.最好置于体积分数为(C02)= (5土1)%的二氧化碳气体培养箱内。培养完成后在显微镜下检查培养细胞。可采用适宜的染色剂进行细胞染色。C. 4. 3 评价描述每个培养皿中的生物学反应(细胞退化和畸形).按表C.l分成0至4级。检查空白样品、阴性和阳性对照样品，以评定试验步骤的适宜性。如果出现异常现象需重复试验。试验液培养细胞应显示至多是轻微反应(2级)。如试验液培养细胞的生物学反应明显大于阴性对照液培养细胞，用不同稀释度的试验液重复试验。表C.l反应程度级别
35、反应程度培养细胞的状态。无胞浆内有离散的颗粒;无溶解的细胞。1 极轻微至多20%的细胞呈圆形，疏松贴壁，无胞浆内颗粒;偶有溶解的细胞。2 轻微至多50%的细胞呈圆形，无胞浆内颗粒;明显可见溶解细胞和细胞间空区。3 中度至多70%的细胞呈圆形和/或溶解。4 重度细胞层几乎完全破坏。C. 5 溶血试验C. 5.1 红细胞悬浮液制备取抗凝新鲜人血(用符合中国药典的抗凝剂制配)用无菌氯化铀榕液(NaCD= 9 g/L稀释，溶液与血液的体积之比为5: 1。在离心机上以1500 g2 000 g离心5min。吸出上清攘，再加入同样体积的氯化铀溶液在同等条件下重复对红细胞进行处理。注:新鲜人血指采集后不超过
36、72h的人体血液。将以这种方法获得的红细胞用无菌氯化铀搭液p(NaCD=9g/L以1: 9的比例稀释，在室温条件下贮存该悬浮液，应在6h内使用。C. 5. 2 步骤取125mL按第A.3章制备的试验液，在1000C下蒸发，用5mL无菌氯化铀溶液p(NaCl)= 9 g/L溶解蒸发残渣，再加入1mL红细胞悬浮液，在(37士1)oc下放置20min。然后以1500 g 2000 g离心混合液5mino 在相同的条件下但不加入试验液蒸发残渣，同法制备对照液。用1cm比色池在540nm下测量试验液和对照液上清液的吸光度，试验液的吸光度与对照液吸光度之差应不超过10%。注:所述试验不能用于检测试验液中的
37、易挥发性成分，但试验液的浓缩可使试验具有较高的灵敏度。C. 6 可选择的生物学试验方法表C.2中列出的试验方法仅是提供信息。12 YY 03二6.3一-2005表C.2可供选择的生物学试验方法条号生物学试验推荐使用的试验;二、主与血液相互作用GB/T 16886.4 C.6.1 GB/T 14233.2 细胞毒性GB/T 16886.5 C.6.2 GB/T 14zJ1. 2 溶血GB/T 16886.4 C. 6. 3 GB/T 14233. 2 急性全身毒性GB/T 16886. 11 C. 6. 4 GB/T 14233. 2 致敏GB/T 16886.10 C. 6. 5 GB/T 1
38、4233.2 皮内反应GB/T 16886.10 C. 6. 6 GB/T 14233.2 C. 6. 7 热原试验GB/T 14233.2 13 YY 0326. 3-2005 14 参考文献lJ GB 14232. 1-2004 人体血液及血液成分袋式塑料容器第1部分:传统型血袋2J GB/T 14233. 1一1998医用输液、输血、注射器具检验方法第1部分:化学分析方法3J GB 15593 输血(液)器具用软聚氯乙烯塑料4J GB/T 16886.4一2003医疗器械生物学评价第4部分:与血液相互作用试验选择5J GB/T 16886.5-2003 医疗器械生物学评价第5部分:体外细
39、胞毒性试验6J GB/T 16886.7-2001 医疗器械生物学评价第7部分:环氧乙皖灭菌残留量7J GB/T 16886.10一2005医疗器械生物学评价第10部分:剌激与迟发型超敏反应试验8J GB/T 16886. 11 医疗器械生物学评价第11部分:全身毒性试验mCON-伺.Nghh中华人民共和国医药行业标准一次性使用离心式血浆分离器第3部分:血浆袋YY 0326.3一-2005陪中国标准出版社出版发行北京复兴门外三里河北街16号邮政编码:100045 网址电话:6852394668517548 中国标准出版社秦皇岛印刷厂印刷各地新华书店经销* 印张1.25 字数25千字2006年2月第一次印刷开本880X 1230 1/16 2006年2月第一版 7巳如有印装差错由本社发行中心调换版权专有侵权必究举报电话:(010)68533533定价13.00书号:155066 2-16635 YY 0326.3-2005
