1、10; (,S.020.30 842 告黛号:10779 -2000 上海市地方标准DD31厅247-20CO口头的2知rf/I)猪尿中盐酸克仑特罗残留量的检测方法2000-06-06发布2000-07-01实施上海市质量技术监督局发布。1131川247-2。前言.j你月巾上梅市畜牧办公室提出:旨;缸遏制在商牧业生产中非法使用直1:11亮亮仑待岁，确保T肖哥哥者的自皇城和安余c车标准由上得出人结栓验位秘m负货也审.本部准自t房而兽药饲斜11.H再E骨、上海市疾病预防经很i中心共同参加itil慧，本标准主要是卒人:原鸡、朱宝、郭串串怨、沟军、关蝶、黄士新、王宏。上海市地方标准猪原中盐酸克仓特罗践
2、自量的检测方法1 范围牛标准规定r苦苦原甲捡破究仑份罗残雪蛋的泌元);.法。本标准适用寸二尿中盐贩克仑将罗残留量龄浏定。第一篇酶联免吸附法Z原理O3I!T247-.:(则利州回相E串联兔波收附原理A每位酸:1;仓待罗得异性优伴也被于苯乙仰自坦露反应板的1t.穴申.再加入梯粹的尿样(来知til原)及酶标!i!:克仑钊罗扰原(已知抗原)，仪两者与vt.体之间进行兔疫竞争反应.然后kn曲事底销量色.A(色的事在我JIH是宁抗体和配标盐峻宽仓特罗抗1M结合的萃，即样品中盆克仑特罗多，.-g彼抗4丰结合B替你盐酸此仓特罗机原少，颜色说，反之则2束。用自测法仪籍法与主主克仑特罗标佯比较来判断样品中盐1It
3、1:仓符罗的含量。3 试弗l口材精除方法刃有规边外，试剂均为分析!.t, 中止f军1L.tJn150Llmol.L-盐酸由止酶联兔娩反应。(, .7 i11定:在离标测定，仅450nm波长下读取吸光债.7 结果计算7 . t 计算标准品、实验对照和抑品的平均吸;俏。7.2以标准的法度的对效为槌也饭，吸光值为纵然标绘制j标准工作战线7.3 以样品极光健&标准工作曲线上惹出相对浓度.乘以样品衔串倍敬。S 灵敏皮;丰方法的自由rnc;限为5ng/m1.3 其他1. 1 页。盒应放在4-81:冰箱内保存u .2 J.J分析人员安全，操作品l哥哥就U用乳胶于，伞的第二篇气栩色i普-质i曾联用法10 J!
4、jH暨样品月挑战。他衍将i!I:试百成穷县戳茵酶布，pH5.2的缓冲撞程中消化品萃取浪用C1R和SC:XIJ、雀、团干H萃埠t净化，分离的药物残阳经过双二Lfl基磁蕃三氛乙MJ!责(IIST下A)衍坐后，用伴句，黄l!:远t.;章以1的气相色i曹仪测定。: 1 试剂11. 1 乙酸核f.冲液(20l1M，pll5. 2)1在解l.45乙股债二151)O-700m!.水中，)F.乙lIl1训导在pH值为.2 *稀邪到1升U2日-:Jl阪葡萄精疲武酶或:;-，提施峻rill摩洛液301ilml戎相当着-11 . 3 3!1rr.lv:盐flI:稀释3tnLlM盐酸到1刃手在惚水中。11. 4 Jf
5、l;!i事:分tJH吧。11 5 氮化甲晴(4rtlD川1mmeth.c:l):4 %、，同甲仰稀释1m!.氨滔泌(比重0.98)至IO()，11. 6 双_.Cf1.N;碰基景:乙防胶，气啊iA份H.7 甲苯:分析纯。11.8 酸乙酣-异内部(6:1;:份新纯。) 1.9 C小寄:附pcldcar.LC 18 SP.I ?，k小桂5mg，3mJ(怯吏仓:除罗标准品，Jfjll防促成浓度约lmg/mLIfJ标准锁备放e11. 11. 2 盐酸觅仑特罗标峡工作液:将银备浓用币部稿释为O.O-2.0pgmL，存放在11.t箱中如ffic12 仪部及设备12. 1 离心瓶，具窑，50mL.12.2
6、$ep-Pk真空线头。12.3 ，风暴囚氟乙始键的试管.12.4 NWJl。12 5 机械真空泵。12. 旋涡混合器.12.7倔1I箱.37土3c.12. 8 恒温筒，80土3，12.9 恒温桶，100土3.t2.10 气相色谱仪，n!t量检测器.13试泣步骤13.1 微政用移泼雪移取5.00m1原异于50mL具塞的离心管中，同乙磁夜整pH徨差5.2，却入2()mr叫他己始缓缓1申辩液lmL，mJ人5UL盐段肯ti罚酒应!I酶浴徽、于f紧m子，震荡、超声15分钟，于37;精养18h孔，如l入10时，乙隙乙41-;1;.丙碎混合浪，Rlii15分钟，用消管收掬有机徊.r自lI)ml.，上述混合波
7、霆1迁徙取-二.合.tf:两次提取的熔植于一玻璃试管中，用氯气吹干.用lmL2CuM的乙戳按缓冲洛浓浓俏。13. 2 净化装好爽，空采取1接管.构C附和scx副相l 13.3衍啡，化川j气吹干上述派出液.JIJ1001，1.甲来溶解施，如11人100L陈STFA，:bU直在并于触放式起粥。锦上震荡.在l!(陀的纵箱中M热Jhr，族干多余的;在剂，JIfO. 5mL甲末消f_取i挚的盐，夜必仑特罗标准.J:f浓.同时衍生化，用气质联同仪逃得E肖子监测方式桃按1.以4检测13.4.1 气相色t活条付13.4. 1. 1 f!3营位:四、-5MS5%米格11玉1i自，30m x 1I. 25m:t(
8、内径).O.2S(m(黯厚); 13.4.1.2是样口:22(C; 13.4. 1.3 娩样方式;不少波:13.4. 1. 4 址样体积:2L.13.4.1.5位头lli(70,;: 7. 6p,i; 13.4.1.6硅温:70(;(侬挎0.6分钟).以25:1分钟升百21:(保岱6分钟).以25t:!分钟升温至2驯陀(Ctt守5分铮)t 13.4.1.7就气:氯气，说这0.9，叶.1分钊I(恒孤儿13.4.2质陪条件13.4.2. J MS传输线1iIN:2RC陀:- 1)U31 !T 247 - 2000 13.4.2.2 I由开l)t&:8分钟;13.4.2.3 I:M也应.底子调i持也
9、fE20QV, 13.4.2.4 分析n谧度230t.: . 4.2. 5 囚缺杆温度106t:。13.吨.2.6选养高手监测(MZ)86.243.262，勿7.13.5 测定根据籽，晶宫E巾盐酸f!:-e-抒罗含B情况.边定场面积指近的标准工作溶液标准工作溶液和将占1，被小剖t恪先仓特罗响应i且均Ilv.在仪器检测线性范回内。对1，1、准工作济液和惮，i:!耐得j4.:织参捕ill样MIX草e定制;，串品t节与你样的保!，!I时饲之差不于3秒.Q值J;.大于80，当Q值小于60时.通过人:r:比校选择那子的事I:ll.以基峰U分数表示代13.6 ，1算x= h ELX V 一1 X m 式中:X一试串串中盐磁吏仑丰13残留古泣，口可rll.，h一样液中经衍先化盐酸克仑特罗的场裔，rrun;h，一析10!工你$程中经衍生t化盐眼克仓待罗的峰高.rnrn; C，一标准工作!JI吁阿盐政亮仑特罗的浓皮.1，/mt;V一小事问jfi纯m容体帜，时-.m一最终样浓所代表伯试砰量.，nL。注计算结民币带将?在自道如盼也14箱密度和灵敏庭在上述带条件下.本方法的检测限为f，g/.，回收率为80:!:15%。4
