1、ICS 65020B 04中华人民 共禾口 国国家标准农业部953号公告一922007转基因植物及其产品环境安全检测抗病水稻第2部分：生存竞争能力Evaluation of environmental impact of genetically modifiedplants and its derived productsDisease-resistant ricePart 2：Survival and competitiveness20071218发布 20080301实施中华人民共和国农业部发布刖 吾农业部953号公告一9 22007本标准由中华人民共和国农业部提出。本标准由全国农业转基因
2、生物安全管理标准化技术委员会归口。本标准起草单位：中国农业科学院生物技术研究所、农业部科技发展中心、中国农业科学院植物保护研究所、中国水稻研究所。本标准主要起草人：金芜军、宋贵文、傅强、黄世文、彭于发、王锡锋、张永军、宛煜嵩、沈平。农业部953号公告一9 22007转基因植物及其产品环境安全检测 抗病水稻第2部分：生存竞争能力1范围本标准规定了转基因抗细菌病害白叶枯病水稻生存竞争能力的检测方法。本标准适用于转基因抗白叶枯病水稻变为杂草的可能性、转基因抗白叶枯病水稻与非转基因水稻及杂草竞争能力的检测。2规范性引用文件下列文件中的条款通过本标准的引用而成为本标准的条款。凡是注日期的引用文件，其随后
3、所有的修改单(不包括勘误的内容)或修订版均不适用于本标准。然而，鼓励根据本标准达成协议的各研究和检测单位使用这些文件的最新版本。凡是不注日期的引用文件，其最新版本适用于本标准。GBT 35434农作物种子检验规程发芽试验GB 44041粮食作物种子禾谷类农业部953号公告一91 2007转基因植物及其产品环境安全检测抗病水稻第1部分：对靶标病害的抗性3要求3 1试验材料转基凶抗病水稻品种(系)和对应的非转基因水稻品种(系)。上述材料的质量应达到GB 44041中不低于二级水稻种子的要求。32其他要求按农业部953号公告一91 2007中“4要求”执行。4试验方法4 1竞争性41 1试验设计试验
4、在稻田进行，分为两种处理类型。处理一，除正常灌溉外不进行农事操作；处理二，按当地常规栽培管理方式进行。小区采用随机区组设计，3次重复。处理-b区面积为6 m2(2 m3 m)，处理-zl,区面积为24m2(4m6m)。41 2播种和移栽按当地栽培要求进行。转基因抗病水稻在处理一中采取直播方式，播种量为50粒m2；处理二采取育苗移栽方式，25 d30 d秧龄(或转基因抗病水稻品种推荐秧龄)时，按当地常规栽插密度或供试品种推荐密度单株移栽。南方稻区早稻为20 CFI：I17 cm，中稻为25 crux20 cm，晚稻为24 cm20 cm。4 13调查方法采用对角线5点取样，杂草调查处理一每点05
5、mX05m，处理二每点10mXl-0m。4 1 4调查和记录处理一：播种后30 d调查记录每小区的水稻株数、出苗率。分趴在播种后33 d及以后每隔20 d调1农业部953号公告一9 22007查记录每点杂草种类、株数，按植株垂直投影面积占取样区面积的比例估算出杂草相对覆盖率；同时每小区随机调查10株水稻的主茎株高、分蘖数、叶片数、生长发育期、相对覆盖率。水稻成熟后每小区随机调查lo株水稻每株穗数、每穗粒数、千粒重。处理二：分蘖盛期调查记录每小区水稻株数、成苗率。分别在水稻分蘖期、拔节期、齐穗期和黄熟期调查和记录每点杂草种类、株数，按植株垂直投影面积占取样区面积的比例估算出杂草相对覆盖率；同时每
6、小区随机调查10株水稻的主茎株高、分蘖数、叶片数、生长发育期、相对覆盖率。水稻成熟后每小区随机调查lO株水稻每株穗数、每穗粒数、千粒重。4 1 5结果分析用方差分析方法比较转基因抗病水稻和对应的非转基因水稻在成苗率、分蘖数、主茎株高、每株穗数、每穗粒数、千粒重、杂草覆盖率等方面的差异。42自生苗和再生苗42 1调查和记录在竞争性试验的同一块田中进行。在收获后即调查落粒数，采用对角线5点取样，每点05 m0。5 m。收获后每隔20 d调查一次试验小区内自生苗和再生苗情况，共调查2次；并在翌年当地水稻分蘖期后调查1次自生苗和再生苗。对出现的自生苗(拔除)取样后带回实验室验证。调查结束后，翻耕。4
7、2 2自生苗的验证采用分子生物学检测方法对自生苗进行检测验证，确认是否为转基因抗病水稻。4 2 3结果分析与表述按公式(1)(3)计算所得结果，用方差分析方法比较转基因抗病水稻和对应的非转基因水稻自生苗数及再生苗数的差异。单位面积的自生苗或再生苗数按公式(1)计算。x一暑(1)式中：x单位面积出苗数，单位为株m2；n。出苗总数，单位为株；A，调查的面积，单位为m2。白生苗的转基凼植株检出率按公式(2)计算。X一善；100(2)V 2式中：X自生苗的转基因植株检出率，单位为百分数()；nz 一自生苗的转基因植株检出数，单位为株；N。一一自生苗的总数，单位为株。转基因抗病水稻自生苗产生率按公式(3
8、)计算。x 2熹lOO(3)式中：、x转基因抗病水稻自生苗产生率，单位为百分数()；m单位面积自生苗中转基因抗病水稻检出数，单位为株；3单位面积稻茬数，单位为株。4 3繁殖力4 31调查和记录，农业部953号公告一9 22007在竞争性试验的同一田块中进行。采用对角线5点取样，每点10株。收获时调查每株分蘖数和总穗粒数。4 32结果分析用方差分析法比较转基因抗病水稻和对应的非转基因水稻每株分蘖数和总穗粒数的差异。44种子发芽率4 4 1试验设计种子收获后10 d内和翌年水稻播种期按GBT 35434规定的方法分别进行1次。4 4 2调查和记录记录转基因抗病水稻和对应的非转基因水稻发芽种子数、未发芽种子数、正常幼苗数、不正常幼苗数。443结果分析用方差分析法比较转基因抗病水稻和对应的非转基因水稻发芽率的差异。45种子生存能力4 fi 1试验设计种子生存能力检测在种子收获后进行。按随机区组试验设计，设浅埋(3 cm)和深埋(20 cm)以及埋后6个月和12个月等4个处理，每个处理3次重复，小区面积1ITl2。待检测种子100粒和材料名称或编号标签封装于200目尼龙网袋中，埋人土壤。分别于6个月和12个月后取出种子检测发芽率。4 5 2结果分析用方差分析法对发芽率进行分析。
