1、JCS 65.020.01 B4口B 中华人民共和国国家标准GB/T 205742006 蜂胶中总黄酬含量的测定方法分光光度比色法Method for determination of total flavonoids in propolis一Colorimetric method 2006翩。9“14发布2007心1翩。1实施中华人民共和国国家质量监督检验检班总局啪世中国国来标准化管理委员会枫叩前茵本标准由中华全网供销合作总杖提出并归口。本标准烧草单位：阂家蜂产品质量量监督检验中心。本标准主要起藏人g马兰字、曾S己旗。本标P能为首次发布。GB/T 20574-2006 请注1蓝本标准的某些内
2、容有可能涉及专利。本标准的发布机构不应承担识别这些专利的资任GB/T 20574-2006 引唯鱼俨院黄酬类化合物的测定有多种方法，如液相色谱法、分光光度法络。液相包i普法可以测定岛生的黄阙成分，分光光度l:t.t.去可以测定黄面向成分的总簸。本标准采用分光光度t色法，）；衷方法具有设备要求简单、操作简便、扇子推广普及的特点。IT 1 范围蜂股中总黄酬含量的测.iE:方法分光光fl比色法本标准规定了螃胶中黄酬类化食物的总含垦测定方法。本标准适用于陈胶，包括原始蜂胶、精制蜂胶lk蜂胶的乙醉溶液。标准百H自于测定黄阙类化合物的总含戴在0.1%以上的烧月变。2 8草现GB月20574-2006溶于乙
3、回事的黄酬类化俞物在弱碱性条件下，与显色fill二三价惚离子结合致成有色物质，可在415nm 议长附i丘产生主盖其；吸收。在一定浓度范围内，只吸光度与贫翻类化合物的含垦成正比。1夺标准幽线比较，可Xfj量测定1富丽类化合物的含量。3 试剂和材料除非另有说明，夜分析中至少使用分析纯试剂和草草饿水或亲离子水。3. 1 乙即C95%）。3. 2 3吃水乙回事。3.3 硝酸锁溶液(100日L）：称11&Al(NO, c. 9日，o17. 60日，加水溶解，豆豆容于100mL容量瓶中，摇匀。3.4 酸酸柳溶液（9.8 g/L)：称取酸酸仰9.814日，加水榕解，定容于100mL容量重瓶，摇匀。3 5 芦
4、丁标准熔液3. 5. 1 芦了对照品储备液（1.0g/L)：精密称淑绞120减底真空干燥烹制烫的芦丁对P.品50m窟，量最于50mL辛辛数瓶中，加元水乙回事（3.2l溶解并稀辛苦孩刻）宜，撼匀。3.5.2 芦丁对.J古在朋溶液（0.2日L)：精密吸取？宰了对P.品储备液（3.5.l)lOml，呈辈子50mL l学蜜瓶中加元乙醇（3.2) ?E刻度摇匀。4 仪铺设备4. 1 可见分光光度计。4.2 减EE干燥丰富（真空；温度200）。4.3 高速组织捣部机：8000 r/min 12 000 r/mm。5 试梯的制吉普5. 1 服始蜂胶原始蜂胶指米经过击是纯处理的天然蜂胶。5. 1. 1 将同一
5、份样品的所有蜂胶块（取约50g 100日）置予冷冻条件下冷冻，待其变硬变脆的，用木锤敲打砸成小碎块，用商速组织捣碎机（4协3）粉碎后，tt14因筛，i昆匀。5. 1. 2 称取土述巳粉仰的燎胶样品约1日，精确到1日驭。寰烧杯中，加入乙得（3.1）约.lomL，；烧杯载于65水浴中加热约45min，搅拌使之前军解。取tJ后冷却絮絮说，上消液使fll快速滤纸过滤。！烧杯、漏斗、滤涨2走滤纸用少鼓乙目事（3.1）洗涤交游、液流色。最后期乙国事（3.）稀释至50mL，摇匀，待测。GB/T 20574-2006 5.2 精串j蜂胶精制螃胶指绞i:1:除去蜂虫击和砂有碎块等杂燎的提纯蜂胶。称取蜂胶样品。.
6、5 g，中青确到lmgo置1烧杯中，按5.1. 2制备。5.3 蜂胶溶液蜂胶溶液指蜂胶的乙醇提取液。吸取蜂胶溶液样品5mL 10 mL，景于50mL容最瓶中，加乙陈（3.1)稀稀交刻度，掰匀，待测。iii股浓蜂胶样品溶液5ml,10 mL，盒子50rnL容篮瓶中。称茧，精确到1mgo加乙醇（3.1)稀释至刻度，撼匀，待测。6 分析步骤6. 1 标准曲线的绘制6. 1. 1 精密吸取树丁对照品使用溶液（3.5刷2llmL.2 ml.3 mL.4 mL,5 mL,6 mL，分别最辈子50ml 容簸瓶中。6. 1. 2 加乙醇（3.1）空总体积为15mL，依次加入硝酸馅溶液（3刷3)1mL，醋股仰溶
7、液（3.4)1 ml，挺喜匀，加水充刻度，摇匀。静量E1 h, 6. 1. 3 用lcm比e杯子415nm处，以30%乙部溶液为空白，现tliE吸光度。6. 1. 4 以50rnL中芮丁质最（mg）为横然栋，吸光Ji为纵坐标，绘制标准嗣线成按激线阴归方税计算。线性工作范自0 mgl. 2 mg(50 mLl。6.2 空白试验梢辛苦吸取待测试料溶液1.o mL，盒子50mL号子篮瓶中，加乙醇（3.1) 总体积为15mL. ;IJp水稀释至刻度，摇匀。6. 3测.lE6. 3. 1 精密吸取待测试料溶液1.o mL，篮子50rnL容量瓶中，按6.1. 2迸行操作。6.3.2 以实雪白试液（6.2）
8、作参比，用1cm比色杯，夜波长415nm处视Y!i!式料溶液的吸光Jlo6.3. 3 资标准曲线豆豆通过凶归方程计算，求出试料溶液中的黄酣类化食物含暨（mg)o 7 结巢的表述7. 1 躲胶巾黄酬焚化合物的总含量按式(1)ii练。M川AU A 1 EU ZU 町八Uml EX - ,“ vw x o( 1 ) 火中x i寄自同类化合物的总含赣啕%；m一白标准幽线上迸出成囱直线凶归方程求t!HI样品比色液中芦了质锺单位为是整克（mg);w一一样品的质鼓iii本积，再lL为JI;（制裁忿升（mLl;d币暗释比例。7. 2 计算结果表示到小数点后两位。8 允许攀问一操作者问次平行视H式纺巢允许：E在始蜂胶相对相去去延8%;精制螃胶反滕胶浓浓相对相望去5%o
