1、ICS 67.040 X 04 和国同家标准11: 、中华人民GB/T 225出一2008粮油检验酶改性磷脂中卜和2皿溶血磷脂酷胆碱的测定高效液相色谱法Inspection of grain and oils-Determination of 1蛐and2- acyl lysophosphatidylcholine in enzymatically modifie岳phospholipids-四High performance liquid chromatography 2008-11-04发布中华人民共扣国国家质最监督检验检疫总局中国国家标准化管理委员会2009-01晴20实施发布本标准的附
2、录A为资料性附录。本标准出国家穰食局提出。由肌&刷_._ F，lIJ百本草草礁告全国粮油辑推化接术委员会归口。本标准妞革单垃z江南大学。本标准主要起草人:王兴器、金背哲、单丧、文Ij元桂、宋志华、潘秩琴。GB/T 22506-2008 1 ? 范围艘油检验酶攻性磷脂中卜和2-溶血磷黯酷胆键的满足商效液相色谱法GB!T 22506 2008 本挥准规定了用离效擅相色谱法揭定酶改性磷黯中L潜血磷腾鼓应蘸(l-aclylysophosphatidyl choline; 1-LPC)和2溶血磷黯戴黯碱(2-acly lysophosphatidylcholine; 2-LPC)的黑理、试剂、仪器设备、
3、样品准备、操作步骤、结果表示及精密度和准确度。本林樵适用以大豆磷脂、蛋黄磷黯、菜籽磷脂为原料制备的榕血磷Ii望先胆碱的测定本标准的检出限为0.1go2 去器菇性引用文件下歹目标准中的条款通过本标准的引用商成为本标准的条款。凡是注日期的号IJ司文件，其陆后所有的修攻单不包括勘误的内容或修订版均本适用于本标准，熊雨，鼓励棋蚕本际准达成协议的各方研究是奇可使用速楼文件的最新殷本。凡是不住5期的引用文件，其最新摇本适用于本事手准。GB/T 6682 分斩实基金室用水规格和试黯方法(GB!T6682一2008.ISO 3696 , 1987. MOD) 主原理酶攻性磷脂产品中的L和公溶血磷黯黠胆碱与磷膳
4、酸黯醺(PC)等其也成分用高效摄相色潜分离，采揭示差折光检磁器检测，外标法定量。4 试然j以下所用的试剂，除特殊拉朝外，均为分析纯试弗u;水为符合GB/T6682规定的一级水。4. 1 95%乙醉。4.2 革黯(H2C204 2H20)。4.3 草酸攘攘(0.02moL/L) :准确称取1.261 g革赣(4.2) .如水落解并稀释至500mLo 4.4 磷黯样F佳品1)，磷黯殷殷碱(PC).l-蒜梅酷榕血磷黯黠臣碱(1-LPC)，各榕桶曹先攘应磷黯黠扭碱(2叫LPC)。5 仪器设备5. 1 商蚊液招色谱住:配折光拴溺器。5.2 高速离，台机，10000 r/mino 5.3 纤维膜，0.45
5、pm。5.4 超声援清洗仅:180W o 5.5 天平:分股值0.0001 go 。标准品可使用Sigma公词的产品a绘出Sgma公司仅为方便用户使用本标准，并元其他商业行为，其他凡是能够达到要求的标准品，均可以选择使用。G/T 22506-2008 6 样品准备称取50mg100 mg酵政性磷黯样品(m)，用95五乙醉溶解稀释至25mL，黯高速离心机(5.2)离心，取上清被用。.4511m纤维膜(5.3)过掠，现现现用。7 操作步黯7. 1 琵潜条件色菇柱:氨基住，250mmX4. 6 mm，较稳5m，或分离效果相当的色谱柱。蔬动相:95%乙番事(4馨。:1在酸揭穿被(4.3)口92: 8(
6、体棋比)，通过0.4511m纤维膜(5.坊，并挺过超声被(5.的现气娃理。流速:1mL/min. 柱温:25.C。进样最:10 I止。7.2 标准曲擒分别精确称取适盘预先经五氧化二磷子蝶两天的磷黯最胆碱、1溶血磷黯航程摊、2潜蛊磷脂酷题碱挥准品(4.的，用95%乙醇(4.1)溶解、精释，配置一系列蛙度的辑推攘攘，标准攘攘中各磷脂组分的浓度在O.05 mmoL/L2. 0 mmoL/L拖擂内，现配现用。蹭微黯进样器准确注入10严L现配的各浓度标准溶被子高效攘相色谱技(5.1)中，记录蜂黯积，Id.晦面积对进持量给帝挥准曲钱。标准品的色谱00参见附录人。注:配制好的标准溶液应在12h内完成泌定。7
7、.3 色谱黯定用微盘进样器准确注入10L现配的样品液(的于高效液相色谱仪(5.1)中，按照(7.1)妮定的色谱条件进行色谱分斩，记录蜂酣棋衍样品液中待测组分激度较高时应进行适当稀释，保证其响应锚均在战器按规i的钱性?在围内。银据保黯时间定性，外栋法定量，得到样品中1-溶血磷脂酸旦旦碱和公溶血磷B酷盟暗的军如浓度(c)注:配制好的稳品液应在12h内完成测定。8 结果表示样品中L或去潜血磷蹬哥先瞿碟的含量量控式(1)计算:P X V X 0.1 . ( 1 ) m 式中zP一样品中1-或2溶血磷脂酷坦碱的含髦，以质量分数计，%; c 出外际法翻得的样品中七和公溶盘磷脂曾是且应碱的浓度，单位为毫摩豆
8、豆每升(mmol!L); Mw一1-或2溶血磷黯酷服穰摩尔质擎的平均值，单位为克每摩华(g/moD;v-样品最终定容体积，单位为毫升(mL)jm样品质量，单位为毫克(mgL9 精密度制准确麽测定锚的相对称准偏差小子5%。不i司法Il水平条件下，方法的回校率为96.7%103.5%。2 GB/T 22506 2008 酣最(资料性醋景磷脂酷程铺(PC)和捧血磷握酷胆础(LPC)梅没品色晴剧A 德里雀胆固世隔锁线l耐酣睡再放1时幅幅国握握#带领饺t创酣睡再缝iN崛幡削制制酣阳回擎0.035 0.300 0.025 U饨，nu nuw 巨剧唱密警。.0000.015 0.010 O.导0520 15
9、 10 Iij问/min5 0.005 6 确脂酷距赣(PC)和溶血魏黯黠阻醋(LPC)标准品色谱固黯A.lKCC队lgm叭叭忡剧。华人民共和剧家标准粮油检验酶改性瞬黯中卜和2溶撒磷摇酷股键的耐克离敢擅韬色谱法GB/T 22506 2008 国中号陡中国标准出版社出版发行北京复兴门外汪里河北街16号邮政编码:100045 网址电话:6852394668517548 国标准出版社秦皇岛印刷厂印刷各地新华书店经销峰白3张0.5字数7千字2009年1月第一次印刷开本880X12301/16 2009年1月第一版9峰定价10.00元fn提差错由本社发行中心调挟应权专有强权必究举摄电话:(010)68533533书号:155066 1-35575 如GBI22506-2008
