1、ICS 11220B 41 a雷中华人民共和国国家标准GBT 1799912008代替GBT 17998-1999SPF鸡 微生物学监测第1部分：SPF鸡 微生物学监测总则SPF chicken-Microbiological surveillance-Part 1：General rules for the microbiological surveillance for SPF chicken200812-31发布 2009050 1实施宰瞀徽鬻瓣譬矬瞥霎发布中国国家标准化管理委员会“”。刖 吾GBT 1799912008GBT 17999SPF鸡微生物学监测分为10个部分：第1部分：SP
2、F鸡微生物学监测总则；第2部分：SPF鸡红细胞凝集抑制试验；第3部分：SPF鸡血清中和试验；第4部分：SPF鸡血清平板凝集试验；第5部分：SPF鸡琼脂扩散试验；第6部分：SPF鸡酶联免疫吸附试验；第7部分：SPF鸡胚敏感试验；第8部分：SPF鸡鸡白痢沙门氏菌检验；第9部分：SPF鸡试管凝集试验；第10部分：SPF鸡间接免疫荧光试验。本部分为GBT 17999的第1部分。本部分代替GBT 17998 1999SPF鸡微生物学监测总则。本部分与GBT 17998 1999相比主要变化如下：限定了SPF鸡的饲养环境；扩大了检测样品的种类；对副鸡嗜血杆菌、鸡毒支原体、滑液囊支原体、禽流感病毒、新城疫病
3、毒、传染性支气管炎病毒、传染性喉气管炎病毒、传染性法氏囊病病毒、网状内皮增生症病毒、鸡传染性贫血病毒、禽呼肠孤病毒(病毒性关节炎)、禽脑脊髓炎病毒和禽腺病毒群(EDS)等多个病原微生物的监测增加了ELISA检测方法；一增加了禽流感病毒和鸡传染性贫血病毒PCR检测方法；增加了副鸡嗜血杆菌、多杀性巴氏杆菌和禽痘病毒临床观察检测方法。本部分的附录A、附录B和附录C为规范性附录，附录D为资料性附录。本部分由中华人民共和国农业部提出。本部分由全国动物防疫标准化技术委员会(SACTC 181)归口。本部分起草单位：中国农业科学院哈尔滨兽医研究所、中国动物卫生与流行病学中心、济南斯帕法斯家禽有限公司。本部分
4、主要起草人：曲连东、韩凌霞、邵卫星、朱果、单忠芳、姜骞、刘家森、郭东春、司昌德、于海波。本部分所代替标准的历次版本发布情况为：GBT17998 19991范围SPF鸡微生物学监测第1部分：SPF鸡微生物学监测总则GBT 17999卜一2008GBT 17999的本部分规定了无特定病原体(specific pathogen free，SPF)鸡和SPF鸡蛋(胚)需要监测的微生物种类及相应微生物的监测方法。本部分适用于SPF鸡和鸡蛋(胚)的微生物学控制。2规范性引用文件下列文件中的条款通过GBT 17999的本部分的引用而成为本部分的条款。凡是注日期的引用文件，其随后所有的修改单(不包括勘误的内容
5、)或修订版均不适用于本部分，然而，鼓励根据本部分达成协议的各方研究是否可使用这些文件的最新版本。凡是不注日期的引用文件，其最新版本适用于本部分。GB 149252001实验动物环境及设旅NYT 5382002鸡传染性鼻炎诊断技术NYT 563-2002禽霍乱(禽巴氏杆菌病)诊断技术NYT 772 2004禽流感病毒RTPCR试验方法NYT 11872006鸡传染性贫血病毒聚合酶链反应试验方法3 术语和定义下列术语和定义适用于本部分。31无特定病原鸡specific pathogen free chickenSPF鸡在符合GB 14925 2001中规定的屏障环境或隔离环境的饲养条件下，符合本部
6、分规定的微生物学监测要求的鸡。32饲养单元raising unit相同饲养环境内的最小鸡饲养设备，如一台鸡饲养隔离器或屏障环境内的一个饲养房间。4 检测样品种类根据所采用的监测方法，检测样品包括鸡血清、抗凝血、鸡蛋、羽髓、咽拭子或泄殖腔拭子等。5监测项目及其方法51监测项目的分类511必须检测项目：在进行实验动物质量评价时必须检测的项目。512必要检测项目：在下列情况下必须检测的项目，包括引进SPF种鸡(蛋)时、怀疑有本病流行时、申请实验动物生产使用许可证和申请实验动物质量合格证时。】GBT 179991200852监测项目及其方法SPF鸡微生物监测项目及其方法见表1，依据细菌、支原体和病毒顺
7、序排列。表1 SPF鸡的微生物学监测项目及其方法序号 病原微生物 方 法 要求1 鸡白痢沙门氏菌Salmonella pullorum SPAIATA2 副鸡嗜血杆菌Haemophilus paragallinarum CO，SPA，IA，ELISA3 多杀性巴氏杆菌Pasteurella multocida CO，AGP，IA4 鸡毒支原体Mycoplasma gallisepticum SPAHIELISA5 滑液囊支原体Mycoplasma synoviae SPA，HI，ELISA6 禽流感病毒Avian Influenza Virus AGP，HI，ELISA，RT PCR7 新城疫
8、病毒Newcastle Disease Virus HI，ELISA8 传染性支气管炎病毒Infectious Bronchitis Virus ELlsA，SN，AGP，HI9 传染性喉气管炎病毒Infectious Laryngotracheitis Virus ELISAAGP，SN10 传染性法氏囊病病毒Infectious Bursal Disease Virus AGP，ELISA，SN11 淋巴白血病病毒Lymphoid Leukosis Virus ELISA12 网状内皮增生症病毒Reticul。endotheliosis Virus ELISA。AGP13 马立克氏病毒Ma
9、reks Disease Virus AGP14 鸡传染性贫血病毒Chicken Infectious Anaemia Virus ELISA，IFA，PCR15 禽呼肠孤病毒(病毒性关节炎)Avian Reovirus AGPELISA16 禽脑脊髓炎病毒Avian Encephalomyelitis Virus ELlSA，AGP，EST，SN17 禽腺病毒I群Avian Adenovirus Group I AGP18 禽腺病毒群(EDS)Avian Adenovirus Group HIELISA19 禽痘病毒Fowl Pox Virus C0，AGP注1：表中排在第一位的检测方法为首
10、选方法。注2：“”为必须检测项目，要求阴性；o为必要检测项目，要求阴性。注3：SPA一血清平板凝集试验；EsT胚敏感试验；IA病原体分离；sN血清中和试验；AGP琼脂扩散试验；HI血凝抑制试验；IFA间接免疫荧光试验；ELIsA酶联免疫吸附试验；TA一试管凝榘试验；CO一临床观察；RT PcR反转录聚合酵链式反应；PcR聚合酶链式反应。注4：副鸡嗜血杆菌的检测方法见NYT 538 2002，多杀性巴氏杆菌的检测方法见NYT 583 2002、禽流感病毒RT-PCR检测方法见NYT 772-2004、鸡传染性贫血病毒的PCR检测方法见NYT 1187 2006。6监测程序具体监测程序见图1。GB
11、T 1799912008图1 SPF鸡微生物学监测流程示意图61监测前的准备对被检鸡编号，临床观察监测是否感染禽痘、副鸡嗜血杆菌和多杀性巴氏杆菌(见附录A、附录B、附录C)。62样品采集621开产后鸡的禽脑脊髓炎病毒抗体监测和淋巴白血病病毒监测可采集鸡蛋。622鸡白痢沙门氏菌、多杀性巴氏杆菌、禽流感病毒和新城疫病毒监测可采集肛拭子。623禽流感病毒、鸡毒支原体、滑液囊支原体和副鸡嗜血杆菌监测可采集咽拭子。624淋巴白血病病毒、网状内皮增生症病毒和鸡传染性贫血病毒监测可采集全血。625马立克氏病毒监测可采集羽髓。626所有病原微生物均可采集血清进行抗体监测(参见附录D)。63取样比例631未开产
12、鸡，对所有饲养单元进行全部项目的监测，每个饲养单元按10的比例抽样，每个隔离器至少抽检1羽。632利用胚敏感试验对开产鸡进行禽脑脊髓炎病毒监测时，每个饲养单元送检鸡蛋的个数占母鸡数的10。633采集鸡蛋对开产鸡进行淋巴白血病病毒感染监测时，每个饲养单元送检鸡蛋的个数占母鸡数的30。64监测频率首次监测从8周10周龄开始。常规监测时，每隔4周-8周，监测本部分规定的所有项目。有特定病原微生物感染危险时，随时进行相关项目的检测。65取送方法取送检样品应编号标识、冰盒包装，低温送达检测单位，并附送检单，写明鸡群数量、样品名称、检测要求及样品数量等。7结果判定所有监测项目均为阴性的，判为合格。监测结果
13、如有一项以上(含一项)为阳性，则判为不合格。GBT 1799912008附录A(规范性附录)禽痘的临床观察检测方法A1 禽痘是鸡的一种传播缓慢的病毒病，肉眼观察，存在皮肤型和白喉型两种临床表现型(症状)。A2皮肤型(干痘)：在冠、肉髯和其他无羽毛部位发生小结节至球形的疣状块，皮肤呈增生性病变。A3 白喉型(湿痘)：在黏膜上产生轻微隆起的白色不透明结节，迅速增大变成黄色白喉膜病变，遍布于口腔、食道、喉和气管黏膜等部位。A4出现上述症状之一的鸡群，即疑似感染禽痘病毒，应采取其他方法进行复核性监测。4附录B(规范性附录)鸡感染副鸡嗜血杆菌的临床观察检测方法GBT 1799912008B1 副鸡嗜血杆
14、菌可以引起鸡呼吸道症状。B2鼻道和鼻窦有粘液性或浆液性鼻分泌物流出，面部水肿，有结膜炎症状。肉髯可出现明显肿胀特别是公鸡。下呼吸道感染的鸡可听到哕音。B3产蛋鸡群产蛋率下降。B4出现上述全部症状的鸡群，即判为疑似感染副鸡嗜血杆菌，应利用其他方法进行复核性监测。GBT 1799912008附录c(规范性附录)鸡感染多杀性巴氏杆菌的I临床观察检测方法C1鸡感染多杀性巴氏杆菌有急性和慢性两种不同程度的临床症状。C2急性型：表现为发热，厌食，羽毛松乱，口腔有黏液性流出物，腹泻，呼吸加快。临死前有发绀现象，以头部无毛处如冠和肉髯最明显。C3慢性型：以局部感染为主。肉髯、鼻窦、腿或翅关节、足垫和胸骨囊出现
15、肿胀。可见渗出性结膜炎和咽部病变。呼吸道感染可致气管哕音和呼吸困难。C4出现上述症状之一的鸡群，即判为多杀性巴氏杆菌疑似感染，应利用其他方法进行复核性监测。附录D(资料性附录)鸡血清的采集与制备GBT 1799912008D1 75酒精棉球对鸡脚静脉或翅下静脉进行消毒。D2无菌或一次性注射器，抽取鸡血2mL以上。37静置1 h，4静置2 h。D3将凝固的血块及析出的液体置离心管中，4 000 rrain离心15 rain，取上清，即为鸡血清，可立即进行检测或一20贮存待检。GBT 1799912008参考文献GBT 18643-2002鸡马立克氏病诊断技术GBT 191672003传染性囊病诊断技术NYT 536 2002 鸡伤寒和鸡白痢诊断技术NYT 540 2002鸡病毒性关节炎琼脂凝胶免疫扩散试验方法NYT 5512002产蛋下降综合征诊断技术NYT 553-2002禽支原体病诊断技术NYT 556-2002鸡传染性喉气管炎诊断技术NYT 680-2003禽白血病病毒p27抗原酶联免疫吸附试验方法NYT 681-2003鸡传染性贫血诊断技术SNT 1221 2003鸡传染性支气管炎抗体检测方法琼脂免疫扩散试验嘲嘲刚嘲网阴嘲嘲_呈】
