1、ICS 67.180.20 X 11 道自中华人民共和国国家标准G/T 20377-2006/ISO 11215: 1998 变性淀粉乙酷化二淀粉己二酸醋中己二酸含量的测定气相色谱法Modified starch-Determination of adipic acid content of acetylated di-starch adipates-Gas chromatographic method CISO 11215 :1 998 , IDT) 061214000046 2006-03-14发布2006-10-01实施中华人民共和国国家质量监督检验检疫总局告在中国国家标准化管理委员会供
2、W中华人民共和国国家标准变性淀粉Z酷化二淀粉己二酸醋中己二酸含量的测定气相色谱法GB/T 20377-2006/ISO 11215: 1998 * 中国标准出版社出版发行北京复兴门外三里河北街16号邮政编码:100045网址电话:6852394668517548 中国标准出版社秦皇岛印刷厂印刷各地新华书店经销晤开本880X12301/16 印张O.75 字数16千字2006年11月第一版2006年11月第一次印刷9峰书号:155066 1-28229 定价10.00元如有印装差错由本社发行中心调换版权专有侵权必究举报电话:(010)68533533G/T 20377一2006/18011215
3、: 1998 前本标准等同采用ISO11215: 1998(变性淀粉一一乙酷化二淀粉己二酸醋中己二酸含量的测定一一气相色谱法)(英文版)，其内容和结构与ISO11215: 1998一致。本标准的附录A、附录B和附录C均为资料性附录。本标准由中国商业联合会提出。本标准由中国商业联合会商业标准中心归口。本标准起草单位:江南大学食品学院、吉林淀粉批发市场、中国淀粉工业协会变性淀粉专业委员会。本标准主要起草人:顾正彪、张燕萍、洪雁、陈洪兴、钟立满、王旭、秦悔丽、周心怡。I G/T 20377-2006/ISO 11215: 1998 变性淀粉乙酷化二淀粉己二酸醋中己二酸含量的测定气相色谱法1 范围本标
4、准规定了气相色谱法测定乙2 规范性引用文件下列文件中的条款通们的修改单(不包括勘误的是否可使用这些文件3 原理将待测样品乙酸乙醋将游离细管柱的气相色、用水将游离甲硅炕基化4 试剂和材料4.3 己二酸(C6H1004)溶4.4 庚二酸(C7H1Z 04)溶液:4.5 氢氧化铀(NaOH)溶液:c=4.6 4. 7 乙酸乙醋(C4HgOz)。4.8 氮气:纯度99%。4.9 乙腊。注日期的引用文件，其随后所有达成协议的各方研究标准。己二酸。4. 10 甲硅炕基化试剂:双(三甲基甲硅皖基)三氟乙眈胶(BSTFA)，其中包含1%三甲基氯硅烧(TMCS)。4. 11 氮气:纯度99.9999%(如N60
5、级)。4. 12 氢气:纯度99.99% (如N400级或更高级)。4. 13 空气:纯度99.999%(如S级)。5 仪器5. 1 玻璃反应试管:100 mm X 16 mm，带有旋盖，内衬有聚四氟乙烯(PTFE)材质，采用橡胶密封，能够GB/T 20377一2006/ISO11215:1998 抵抗浓盐酸(4.6)的侵蚀。5.2 可调移液器z量程1.00 mL5. 00 mL，精确到0.01mL。注:移液器在使用前应进行校正，检验是否符合制造公差。5. 3 旋转振荡器。5.4 巴氏移液管。5.5 加热装置:温度可保持在30oC:!:20C。5.6 气化装置:根据榕液特点，选择氮气流。5.
6、7 超声波水浴:功率120W。5.8 气相色谱仪:安装有毛细管柱，同时配有火焰离子化检测器和微机积分仪。色谱条件参见附录A。5.9 试验筛:孔径为800m。5. 10 螺旋式磨粉机。5. 11 实验室离心机:可在1100 g离心力下工作。6 取样要求样品具有代表性，同时在运输或贮藏过程中不发生任何损伤或变化。7 样晶的制备将样品过孔径为800m的筛子(5.的。如果样品不能通过筛子，需用螺旋式磨粉机(5.10)研磨，至其全部通过800m筛子。充分混匀样品。8 操作方法8.1 己二酸总量的校正8. 1. 1 称取4份约50mg蜡质玉米淀粉(4.2) (精确至O.000 19)，分别置于4个玻璃反应
7、试管中(5.1)。8.1.2 用移液管(5.2)吸取1.00 mL、0.75mL、0.50mL和0.25mL己二酸溶液(4.3)分别放入这4个玻璃反应试管中。8. 1.3 在每个试管中分别加水(4.1)至溶液总体积为1.5 mL，然后在每个试管中加入1.00 mL庚二酸梅液(4.4)。使每个试管中都含有50g庚二酸，同时分别含有50.0阅、37.5阅、25.0月和12.5问己二酸。注:庚二酸溶液中可能含有少量己二酸，因此应准备第5支相同的试管，但不要加入己二酸溶液(4.3)。8. 1. 4 轻轻摇动试管，直至淀粉完全分散。然后加入2.5mL氢氧化铀(NaOH)熔被(4.5)。8. 1. 5 密
8、封试管，并置于旋转振荡器(5.3)中振荡5min。8. 1. 6 取下试管，在冷却条件下，加入1.0 mL盐酸溶液(4.6创)，11混昆合均匀。8. 1. 7 加入5mL乙酸乙醋(4.7) ，i垒封I紧试管，并剧烈振荡1min 8. 1. 8 静置试管，直至溶液清晰分层。用巴氏移液管(5.4)将上清液(乙酸乙醋层)转移到一个干净的具有螺螺、丝塞的试管中。注:不要将水层混入有机溶剂层。8.1.9 将试管置于300C加热装置(5.5)中，用气化装置(5. 6)在氮气流下(4.8)将乙酸乙醋彻底蒸发掉。8. 1. 10 重复8.1.78.1.9步骤至少三次，将干燥残留物收集到同一个试管中。8. 1.
9、 11 将干燥残留物榕解在0.6mL乙腊(4.9)中，并将试管封闭好，放于超声波水浴(5.7)中均质2 mino 8. 1. 12 加入0.3mL甲基硅皖化试剂(4.10)，再将试管封好，并在超声波水浴中均质2min。GB/T 20377-2006/ISO 11215: 1998 8. 1. 13 将试管置于30.C加热装置(5.5)中，反应30min，使样品完全衍生化。8. 1. 14 吸取o.5L溶液注射到气相色谱仪中，详见附录A中的色谱操作条件。8.2 己二酸总量的测定8.2.1 称取约50mg待测样品(蜡质玉米淀粉(4.2)(精确至0.0001 g)，置于玻璃反应试管中(5.1)。8.
10、2.2 加入1.5 mL水(4.1)和1.00 mL庚二酸溶液(4.4)，摇匀。8.2.3 其余步骤参照8.1. 48. 1. 14。8.3 己二酸游离量的校正8.3. 1 称取4份约500mg蜡质玉米淀粉(4.2) (精确至o.000 1 g)，分别置于4个玻璃反应试管中(5.1)。8.3.2 用移液器(5.2)吸取1.00 mL、0.75mL、0.50mL和0.25mL己二酸溶液(4.3)分别放入这4个玻璃反应试管中。8.3.3 在每个试管中分别加水(4.1)至帘液总体积为4.0mL，在每个试管中加入1.00 mL庚二酸溶液(4.4)。使每个试管中都含有50g庚二酸，以及分别含有50.0阅
11、、37.5阅、25.0附和12.5问己二酸。注:庚二酸溶液可能含有少量己二酸，因此应准备第5支相同的试管，但不要加入己二酸溶液(4.的。8.3.4 密封试管，置于振荡器中振荡16h。8.3.5 取下试管，在离心机(5.11)上以1100 g离心力下离心5min。8.3.6 将澄清的上清液转移到一个干净的玻璃反应试管中(5.1) ，加入50L浓盐酸(4.6)和5mL乙酸乙醋(4.7)。8.3.7 试管封紧，并剧烈振荡1min 。8.3.8 其余步骤参照8.1. 88. 1. 14. 8.4 己二酸游离量的测定8.4. 1 称取约500mg被测样品(精确至0.0001剖，置于玻璃反应试管中(5.1
12、)。8.4.2 加入4.0mL水(4.1)和1.00 mL庚二酸溶液(4.4)，摇匀。8.4.3 其余步骤参照8.3. 48. 3. 8。8.5 水分含量按照ISO1666标准测定样品的水分含量。9 结果计算9. 1 校正圄测定庚二酸和己二酸的保留时间，并测定校正溶液(8.1.3)中各组分的峰面积，参见附录B的色谱图。将加到蜡质玉米淀粉中的己二酸的不同质量(g)标在x-轴上，相应地，把己二酸对庚二酸的峰面积之比标在y-轴上。通过线性回归法，画出工作曲线。对于每一个样品，计算出己二酸的峰面积与庚二酸的峰面积之比，从而从曲线中查出己二酸的质量。9.2 己二酸总量和游离量的计算以干淀粉计，运用下面的
13、式(1)计算己二酸总量和游离量:式中zm. 100 . =x ( 1 ) m (100 - Wm) W.一一被测样品的己二酸含量(干基)，单位为毫克每千克(mg/kg); 3 GB/T 20377-2006/ISO 11215: 1998 m, 从曲线(9.1)中读出的己二酸质量，单位为微克(g);m一一被测样品的质量，单位为克(g);切m一一被测样品(见8.5)的水分质量分数，%。结果精确至1mg/峙。9. 3 己二酸结合量的计算己二酸总量减去游离量即为己二酸结合量。10 精密度10.1 实验室内的实验对于这一方法实验室间测定的梯度变化和矩阵变化B:10.2 重复性，总在很短的时间间一一取样
14、方法;一一实验方法;一一一获得的实验结果;一一若重复性已被核对，最后获得的结果。还应提及在本标准中所有的未列出的或非必要的操作细节，还要写出任何偶然的可能影响实验结果的细节。4 GB/T 20377-2006/ISO 11215: 1998 附录A(资料性附录)典型的色谱仪工作条件A.1 色谱柱内径为0.32mm，长度为10m; WCOT熔融硅胶担体，涂有CP-SIL5CB固定相，涂层厚度为O.12m。A.2 操作条件载气:氮气(4.11): 氢气(4.12): 注:上述条件250C / min; 2900C; 5 min; 5 GB/T 20377-2006/ISO 11215: 1998
15、附录B(资料性附录)典型的色谱固图B.l为一个乙酷化二淀粉己二酸醋玉米淀粉样品的典型色谱图。图中显示，己二酸衍生物的保留时间为3.2min.庚二酸的保留时间为3.7min. 信号强度60 50 dyh.凹40 问N.的30 10 20 。2 3 4 5 6 7 mm 圄B.l乙酷化二淀粉己二酸醋玉米淀粉样晶的典型色谱圄6 GB/T 20377-2006/180 11215: 1998 附录C(资料性附录)实验室间实验结果统计9个实验室按本标准进行实验，对五个不同的乙酷化二淀粉己二酸醋样品(蜡质玉米淀粉为原料)分别进行测试。获得的结果都是按照GB/T63791J进行统计分析，给出精确度的数据见表
16、C.l和表c.z。表C.1己二酸总量的统计结果样口口口a 参数1 2 3 4 5 消去异常数据后的实验室数目9 9 9 8 8 有异常数据的实验室数目。1 1 可接受的实验结果18 18 18 16 16 己二酸总量的平均值/(mg/kg)430 386 659 90 405 重复性标准偏差S，/Cmg/kg)22 21 36 5 7 重复性变异系数/C%)5. 1 5.3 5.5 5.4 1. 7 重复性限r(r=2.8XS，)/(mg/kg)61 58 102 14 19 再现性标准偏差SR/(mg/kg)50 32 62 12 40 再现性变异系数/C%)11. 7 8.4 9.4 13
17、.0 10.0 重现性限R(R=2.8XSR)/(mg/kg)142 91 175 33 114 注:参考文献2J表明用此方法获得的结果精确度较高。a 所有的乙散化二淀粉己二酸醋样品的原料皆为蜡质玉米淀粉。表C.2己二酸游离量的统计结果样口口口a 参数1 2 3 4 5 消去异常数据后的实验室数目9 9 9 9 8 有异常数据的实验室数目。l 可接受的实验结果18 18 18 18 16 己二酸游离量的平均值/Cmg/kg)33 110 17.8 14. 6 100 重复性标准偏差S，/(mg/kg)3.4 6.1 2.0 2.3 2. 5 重复性变异系数/C%)10.3 5. 5 11. 3
18、 16.1 2. 5 重复性限rCr= 2. 8) S,) / C mg/kg) 9.6 17.1 5.7 6. 6 7.0 再现性标准偏差SR/(mg/kg)11. 4 29.3 6.0 6.0 31. 2 再现性变异系数/C%)35.0 26. 7 33. 7 41. 0 31. 2 再现性限R(R=2.8X SR)/(mg/kg) 32.4 82.8 17.0 17.0 88.3 a 所有的乙散化二淀粉己二酸醋样品的原料皆为蜡质玉米淀粉。GB/T 20377一2006/ISO11215: 1998 白白-参考文献lJ GB/T 6379一1986，测试方法的精密度通过实验室间试验确定标准测试方法的重复性和再现性.2J Sanders P. And Brunt , K.乙酷化交联淀粉中己二酸总量测定方法的改进，Starch/St!.rke , 1994 ,46(7):255-259. 3J Sanders P. And Brunt，K.己二酸醋交联淀粉中游离己二酸含量的气相色谱测定方法，Starch/St!.rke ,1996 ,48(11/12):448-452. -NFF 。自OON|hhmONH阁。版权专有侵权必究每mu-兀。，-06-pd-O Ja-nu -nu nhu nu whu phu-号一价书一定
