1、中华人民共和国国家标准蔬菜、水果卫生标准的分析方法Method Cor analysis oC hygienic standard 。Cvegetables and Cruits 1 主要内容与适用范围本标准规定了蔬菜、水果中卫生指标的分析方法。GB/T 5009. 38-1996 代替GB5009.38-85 本标准适用于蔬菜、水果中六六六、滴滴涕、有机磷农药、菜、锅、氟、碑、甲基托布津、多菌灵各项卫生指标的分析。2 51用标准GB/T 5009. 11 食品中总碑的测定方法GB/T 5009.15 食品中锅的测定方法GB/T 5009. 17 食品中总柔的测定方法GB/T 5009. 18
2、 食品中氟的测定方法GB/T 5009.19 食品中六六六、滴滴涕残留量的测定方法GB/T 5009. 20 食品中有机磷农药残留量的测定方法3 感官检查外观正常，不能有腐烂霉变现象。4 理化检验4. 1 六六六、滴滴涕按GB/T5009.19操作。4.2 有机磷农药按GB/T5009. 20操作。4.3隶按GB/T5009. 17操作。4.4锅按GB/T5009.15操作。4. 5氟按GB/T5009.18操作。4.6畔按GB/T5009.11操作。4.7 甲基托布津、多菌灵4. 7. 1 原理中华人民共和国卫生部1996-06-19批准82 1996-09-01实施GB/T 5009. 3
3、8-1996 用甲醇自样品中提取出甲基托布浮，在pHl2时，用二氯甲烧提取，甲基托布津经闭环反应转变为多茵灵，提纯后，用紫外分光光度法进行定量测定。多菌灵经提取后可直接测定吸光度而进行定量。定段时为了排除各种作物中的干扰影响，采用作图法，求得校正吸光度，再根据校正吸光度和甲基托(Ji津(或多菌灵)的关系绘制成标准曲线。多商灵具有苯并咪瞠的特异吸收，植物成分子扰不大。4.7. 2 试剂4. 7.2. 1 甲醇。4.7.2.2 一氯甲烧。4.7.2.3 三氯甲烧。4.7.2.4 石油田述:沸程3060C。4.7. 2. 5 乙酸-乙酸铜溶液:称取2g乙酸铜，加100mL冰乙酸，稍加热溶解，用水稀释
4、至200mL。4.7. 2. 6 盐酸(1十11):量取盐酸90mL，加水稀释至1000 mL. 4. 7.2. 7 氢氧化纳溶液(80日/L):称取8g氢氧化销，加水溶解并稀释至100mL 4. 7.2.8 氮氧化镀溶液。+7)量取氨水10mL，加水稀释至80mL。4.7. 2. 9 氧化纳溶液(100日/L)。4.7.2.10 甲基托布津标准溶液z准确称取50.0mg甲基托布津，置于烧杯中，用三氯甲烧溶解并移至50时，容量瓶中，稀释至J度。此溶液每毫升相当于1.0 mg甲基托布津。t4.7. 2. 11 甲基托布津标准使用液:吸取10.0mL甲基托布津标准溶液，置于100mL容量瓶中，加三
5、;再甲烧稀释至刻度，此溶液每毫升相当于100.0吨甲基托布津。4.7.2.12 多菌灵标准溶液z准确称取50.0mg多菌灵置于烧杯中，用盐酸(1+11)溶解移入50mL容挝瓶中.并稀释至刻度。此溶液每笔升相当于1.0 mg多菌灵。4.7.2.13 多商灵标准使用液吸取10.0mL多菌灵标准溶液，置于100mL容量瓶中，加盐酸0+11)桶释至要IJ此溶液每笔升相当于100.0g多菌灵。4. 7. 3 仪器4.7. 3. 1 紫外分光光度汁。4.7. 3. 2 空气冷凝管，或用60cm 1:的破璃管(自制L4.7.4 分析步骤4.7.4.1 标准曲线的制备4.7.4.1.1 甲基托布津标准曲线z吸
6、取0，0.1，0.3，0.5mL甲基托布津标准使用液(相当于0，10，30，:;0gjl蒙托:nJ幸).分别置于30mL圆底离心管中，挥干溶剂后，各加10mL乙酸乙酸铜溶液及2粒玻璃珠，接k空气冷凝管，小火缓缓煮沸0.5h，取下，用20mL盐酸。+11)从冷凝管顶端洗涤冷凝管tu回民离心管.并移入125mL分液漏斗中，用二氯甲烧提取二次，每次10mL，弃去二氯甲烧层，酸溶液巾川25mL氮氧化纳溶液(80g/L)至pH6.06. 5(pH试纸试)，用二氯甲烧提取二次，每次20mL , fT井一拭甲烧提取液，用10mL水洗涤一次，静置分层后，将二氯甲娩层分入另一个干的分液漏斗中，准确加入10时，盐
7、酸。十11)，振摇5mm，静置分层后，盐酸提取液用1cm p英比包杯，以盐酸(1十11)l司17分光光度计零点，测读250300nm的吸光度，以波长为横坐标，吸光度为纵坐标，绘制吸收图谱。将因谱上260nm和290nm吸光度读数点连成直线，设直线上282nm的吸光度为A，吸收图谱上282nrzl的吸光度为A，两者之差为A(A=A282nm-A282nm，为校正吸光度)。再以校正吸光度为纵坐标.j1基托布津的含量为横坐标，绘制各甲基托布津标准点L!-A值的标准曲线。4.7.4. 1.2 多前灵标准曲线:吸取0，0.1，0.3，0.5mL多菌灵标准使用液(相当于0.10，30，50f1g多菌灵).
8、附于盛有20mL盐酸o十11)的分液漏斗中，各用二氯甲烧提取二次，每次10mL，弃去二氯甲烧时7J;(fi仪11氮氧化接0+7)中和到pH为6.06. 5(pH试纸试)，用二氯甲烧提取二次，每次20mL. 83 GB!T 5009. 38-1996 提取液肘10mL水洗涤次，以下按4.7.4.1甲基托布津标准曲线自将二氯甲烧层分入另一个干的分液漏斗中，准确加入10mL盐酸(1+11)起依法操作，并绘制吸收图谱，计算出6.A值后，绘制多菌灵的标准曲线。4.7. 4.2 样品的提取和分离称取50.0g切阵、1昆匀的样品，加50mL甲醇振摇0.5h，用布氏漏斗抽滤，容器和滤器用甲醇洗涤二次电每次15
9、20mL.抽干后，滤液移入烧杯中，抽滤瓶用约10mL水洗涤，洗液并入滤液l司、在水浴上用?古气流吹去部分甲醇后，移入分液漏斗中，加30mL氯化纳溶液(OOg!L)，用石油酶振摇摄取-次.每次25mL.弃去石油酶，加盐酸酸化至pH为12(用pH试纸试)，用二氯甲烧提取二次，每次25mL，合并三氯甲烧提取液，用25mL水洗涤一次，分出二氯甲:境层留作甲基托布津测定用。水洗涤液合并入水层，留作多菌灵测定用。4.7.4.3 甲基托布津的测定二氯甲馆提取液自然挥干后，用10mL乙酸乙酸铜溶液分次溶解残渣，并移入30mL圆底离心管中，加2粒玻璃珠，以下按4.7.4.1.1自接上空气冷凝管起依法操作，计算出
10、样品的6.A值，再与甲基托布津的标准曲线比较，计算样品中的含量。4.7. 4.4 多菌灵的测定取4.7.4.2中留作多商灵测定的水溶液，用氢氧化锻0+7)中和至pH6. O 6.5，然后按4.7.4.1多菌灵标准曲线自用二氯甲烧提取二次起依法操作，汁算出样品中的6.A值，再与多菌灵标准曲线比较，计算样品中的含量。甲基托布津在植物中的主要代谢物是多菌灵，是甲基托布津水解和闭环所形成，因而目前甲基托布津的残笛量是以这两个化合物测得的残留量之和表示。4.7. 4. 5 计算X一(m1+ m ,) X 1 000 m, X 1000 式中X一一样品中甲基托布津和多菌灵含量，mg/kg;Jn I一一测定
11、用祥品中甲基托布津的质量，g;nll一一测定用样品中多菌灵的质量，哩，附3一一样品质量，g。R.j 0.18 吃司O. 16 o. 14 1- I 1 11 O. 12 f 0.10 1- 1 111 0.08 0.06 Q. 04 0.02 。260 298 G/T 5009.38-1996 吧0.14 Q.12 a 3 Q.I0 。o. 。10 波长.nmM ,-lO lA，0.052一o.019 0.033 lA,-20 M，O. 112一0.022=0.090lA ,-30 lA，0.180-0. 0300.150 50 啻量，四图l甲基托布津标准紫外吸收光谱图Z甲基托布津标准曲线附加说明z牛二标准由卫生部卫生监督司提出。本标准由卫生部食品E生监督检验所负责起草。本标准由卫生部委托技术归口单位卫生部食品卫生监督检验所负责解释。8;)
