1、ICS 67.040 C 53 B 中华人民共和国国家标准GB/T 5009.49-2003 代替GB/T5009. 49一1996发酵酒卫生标准的分析方法2003-08-11发布Method for analysis )f hygienic standard of fermented wines 2004-01-01实施中华人民共和国卫生变发布中国国家标准化管理委员再GB/T 5009.49-2003 前言本标准代替GB/T5009. 49-1996(发酵酒卫生标准的分析方法儿本标准与GB/T5009.49-1996相比主要修改如下=按照GB/T20001. 4-2001(标准编写规则第4部
2、分=化学分析方法对原标准的结构进行了修改。增加了发酵酒中的甲酶的测定方法。本标准由中华人民共和国卫生部提出并归口。本标准由北京市卫生防疫站负责起草，山东省卫生防疫站、辽宁省卫生监督所、天津市卫生监督所参加起草。本标准中发酵酒中的甲酶的测定方法主要起草人z吕燕柏、迟玉聚、玉旭太、崔春明、梁进、张正、王1占。本标准于1985年首次发布，1996年第一次修订，本次为第二次修订。424 GB/T 5009.49-2003 发酵酒卫生标准的分析方法1 范围本标准规定了发酵酒中各项E生指标的分析方法。本标准适用于以含糖或淀粉的物质为原料，经糖化发酵后不经蒸馆而制成的酒中各项卫生指标的分析。2 规范性引用文
3、件下列文件中的条款通过本标准的引用而成为本标准的条款。凡是注目期的引用文件，其随后所有的修改单(不包括勘误的内容)或修订版均不适用于本标准，然而，鼓励根据本标准达成协议的各方研究是否可使用这些文件的最新版本。凡是不注日期的引用文件，其最新版本适用于本标准。GB 2758 发酵酒卫生标准GB/T 5009. 12 食品中铅的测定GB/T 5009. 22 食品中黄曲霉毒素队的测定GB/T 5009.26 食品中N-亚硝胶类的测定GB/T 5009. 34 食品中亚硫酸盐的测定GB/T 5009. 35 食品中合成著色剂的测定3 感盲橙查3.1 量取30mL样品，置于50mL清洁干燥无色玻璃烧杯中
4、，观察其颜色，应透明无沉淀，无杂质。3.2 尝其味应有该种酒特有的芳香昧和滋味，不应有霉昧、酸昧、异味。应符合GB2758的规定。4 理化检验4.1铅按GB/T5009. 12操作。4.2 黄曲霉霉素B，按GB/T5009. 22操作。4.3 二氧化硫按GB/T5009. 34操作。如果加四氯家销吸收的溶液有色，可加入少量活性炭脱色，过滤，滤液备用。4.4 N-亚硝肢类(啤酒)按GB/T5009. 26操作。4.5 着色剂按GB/T5009. 35操作。4.6 用踵4.6.1 原理甲应在过量乙酸镀的存在下，与乙酷丙翻和氨离子生成黄色的3，5二乙酷基1，4-二氢毗院化合物。在波长415nm处有最
5、大吸收，颜色的深浅与甲醒的含量成正比，相应可得出试样中甲醒的含量。4.6.2试liIJ4.6.2.1 乙酸丙酣溶液=称取0.4g新蒸馆乙l!iI:丙翻和25g乙酸馁、3mL乙酸溶于水中，定容至200 mL备用。(用时配制)425 GB/T 5009.49-2003 4.6.2.2 36%38%甲酸。4.6.2.3 0.1000 mol/L硫代硫酸锅标准溶液。4.6. 2. 4 O. 1 mol/L腆标准溶液。4. 6. 2. 5 50 g/L淀粉指示剂。4. 6. 2. 6 1 mol/L硫酸溶液。4. 6. 2. 7 1 mol/L氢氧化纳溶液。4.6.2.8 200 g/L磷酸溶液。4.6
6、.2.9 甲醒标准溶液的配制和标定:吸取36%38%甲醒溶液7.0mL，加入O.5 mL 1 mol/L硫酸，用水稀释至250mL。吸此溶液10.0 mL于100mL容量瓶中，加水稀释定容。再吸10.0mL稀溶液于250mL腆量瓶中，加90mL水$20 mL O. 1 mol/L的确溶液和15mL 1mol/L氢氧化纳溶液，摇匀，放置15min。再加入20mL 1 mol/L硫酸溶液酸化，用0.1000 mol/L硫代硫酸销标准溶液滴定至淡黄色，然后加约1mL5 g/L淀粉指示剂，继续滴定至蓝色褪去即为终点。同时做试剂空白试验。甲醒标准溶液的浓度按式(1)计算x = (V1 - V2) X C
7、l X 15 式中-X一一甲醒标准溶液的浓度，单位为毫克每毫升(mg/mL); V1一一空白试验所消耗的硫代硫酸纳标准溶液的体积，单位为毫升(mL);V，一滴定甲隆溶液所消耗的硫代硫酸销标准溶液的体积，单位为毫升(rnL); Cl一一硫代硫酸纳标准溶液的浓度，单位为摩尔每升(mol/L); 15 与1.0 mL腆标准溶液(1.000mol/L)相当的甲醒的质量，单位为毫克(mg)。用上述已标定甲酸浓度的溶液，用水配制成含甲醒1g/mL的甲醒标准使用液。4.6.3 仪器4.6.3.1 分光光度计。4.6.3.2 水蒸气蒸馆装置。4. 6. 3. 3 500 mL蒸馆瓶。4.6.4 分析步骤4.6
8、.4.1 试样处理. ( 1 ) 吸取已除去二氧化碳的啤酒25mL移入500mL蒸馆瓶中，加20mL 200 g/L磷酸熔液于蒸馆瓶，接水蒸气蒸馆装置中蒸馆，收集馆出液于100rnL容量瓶中(约100mL)冷却后加水稀释至刻度。4.6.4.2 测定精密吸取O.00 , O. 50 ,1. 00 , 2. 00 , 300 , 4. 00 , 8. 00 rnL 1g/mL的甲醒标准溶液于25mL比色管中，加水至10rnL。吸取样品馆出液10mL移入25mL比色管中。标准系列和样品的比色管中，各加人2mL乙酸丙阁溶液，摇匀后在沸水浴中加热10min，取出冷却，于分光光度计波长420nm处测定吸光度，绘制标准曲线。从标准曲线上查出试样的含量。4.6.5 结果计算426 见式(2), 式中:A x= V X一一试样中甲酶的含量，单位为毫克每升(mg/L);A一一从标准曲线上查出的相当的甲醒的质量，单位为微克(g); V一一测定样液中相当的试样体积，单位为毫升(mL)。( 2 )
