1、中华人民共和国国家标准草果和山植制品中展青霉素限量卫生标准Hygienic standard for tolerance limits 。fpatulin In apple and hawthorn products 1 主题内容与适用范围本标准规定了苹果、山梅制品中展青霉素限量及检验方法。本标准适用于苹果、山植制品及其半成品（原汁、原酱）。2苹果、山撞制品中展青霉素是高允许量苹果、山檐制品中展青霉素最高允许量见下表。半成品（原汁、原酱果汁、果酱果洒罐头山植条（饼）3 检嘘方法3. 1 原理晶种&. 飞三三三 运二GB 1497 4-94 指标，用kg100 50 50 50 50 样品中展青
2、霉素经提取、净化、浓缩、薄层展开后，利用薄层扫描仪进行紫外反射光扫描定量。3. 2 试剂3. 2. 1 硅胶GF剧。3.2.2薄层色谱展开剂横向：氯仿丙翻（301. 5）；纵向2甲苯乙酸乙磁甲酸（50151）。3.2. 3 展青霉素标准晶。3.2.4 乙酸乙醋。3.2.5 1.5%碳酸销溶液。3.2.6 无水硫酸锅。3.2. 7 三氯甲烧。3.2. 8显示剂溶解o.1 g MBTl-1 HCl H,O 3甲基2苯并哇哇阑陈水合盐酸盐于20mL蒸馆水中，置于冰箱中保存，每3天重新配制。3. 3 仪器中华人民共和国卫生部1994a3 1 s批准1994-09-01实施523 GB 14974 94
3、 3. 3. 1 薄层扫描仪。3. 3. 2 层析槽（内径11.5 cm、高20cm的标准备。3.3.3玻璃板lOcmXlOcm,3.3.4 紫外光灯。3. 4 操作方法3. 4. 1 提取3.4.1.1 果汁、果酒量取果汁25mL，置于分液漏斗中，加入等体积的乙酸乙酶，振摇2min，静置分层，重复以上步骤两次，合并有机相加2.5 mLl. 5%碳酸销振摇1min，静置分层后，弃去碳酸锅层，同上步骤再用碳酸销处理一次。将提取液滤入100mL梨形瓶中，于40水浴上用真空减压浓缩至近干，用少许氯仿清洗瓶壁，浓缩干，加氯仿0.4 mL定容，供薄层色谱测定用。3.4.1.2 果酱：称取样品25g置于乳
4、钵中，加适量无水硫酸销研磨后，称至三角瓶中，加80mL乙酸乙酶浸泡30min，振荡30min，过滤，取滤液50mL，以下操作同3.4.1.1。3. 4. 2测定3.4.2.1 薄层板的制备：取硅胶GF,5 g，加水15mL，涂布10cmXlO cm玻璃板上，二次涂成5块，薄层厚度为0.3 mm，阴干后，105烘烤2h，放入干燥器中备用。3.4.2.2 点样：取一块薄板，在距底边和右边10cm处，用微量注射器滴加1.0 g/ml.的展青霉素标准液10L，相距左边4cm处滴加10L样液，在样品点同一垂直线上，距顶端2cm处点20ng的标准液，为位置参考点。3.4.2.3展开横向展开到顶端后取出挥干
5、，进行纵向展开，至顶端后，取出挥干，在254nm紫外灯下观察，出现黑色吸收点则样品为阳性。进行扫描定量测定。3.4.2.4 薄层色谱扫描测定仪器操作条件测定波长270nm；参考波长310nm；反射光测定；扫描速度40nm/min；记录仪纸速20nm/min；测定标准及样品中展青霉素峰面积。3.4.2.5 阳性样品的确证：将阳性样品的薄层色谱板，喷以MBTH显色剂，130烘烤15min，冷至室温后，于365nm紫外灯下观察，展青霉素应呈橙黄色点。3.4.2.6计算果汁，X=c3VXDX在1 8 果酱，X=c5XVXDXW 式中：X一一展青霉素含量，g/mL;3. 5 3.6 524 c一一展青霉素标准液浓度，问mL;A一样液展青霉素峰面积；5一标准溶液展青霉素峰面积；v一加入氯仿定容体积，ml,;D 样液点稀释倍数，W一样品的重量，pV1一一液体样品的体积，mL,精密度：变异系数（%）小于10%。最低检出限，3g/L, ( 1) (2) GB 14974-94 附加说明2本标准由卫生部卫生监督司提出。本标准由中国预防医学科学院营养与食品卫生研究所负责起草。本标准主要起草人吴南、刘勇、刘兴阶。本标准由卫生部委托技术归口单位卫生部食品卫生监督检验所负责解释。525
