1、 +. 0, , ll , 6+- mmmmmmmmmmmmmmmmmmmmmmmmmmmmmmmmmmmk.oi ICS65.150 B50 浙江省地方标准DB33/T 5642005水产品中三唑磷残留量的测定 气相色谱法 Determination of triazophos in aquatic product Gas chromatography 2005-07-01 发布 2005-07-15 实施浙江省质量技术监督局发布DB33DB33/T 5642005 I 前 言 本标准的附录A为资料性附录。 本标准由浙江省海洋与渔业局提出并归口。 本标准起草单位：农业部渔业环境及水产品质量监
2、督检验测试中心(舟山)。 本标准主要起草人：郭远明、钟志、刘士忠、刘琴、金彩杏、陈雪昌、朱敬萍。 DB33/T 5642005 1 水产品中三唑磷残留量的测定 气相色谱法 1 范围 本标准规定了水产品中三唑磷残留量的测定方法。 本标准适用于水产品可食部分中三唑磷残留量的测定。 2 规范性引用文件 下列文件中的条款通过本标准的引用而成为本标准的条款。凡是注日期的引用文件，其随后所有的修改单（不包括勘误的内容）或修订版均不适用于本标准，然而，鼓励根据本标准达成协议的各方研究是否可使用这些文件的最新版本。凡是不注日期的引用文件，其最新版本适用于本标准。 GB/T 6682 分析实验室用水规格和试验方
3、法 3 原理 样品以丙酮提取，经净化、浓缩、定容，毛细管柱气相色谱分离，氮磷检测器或火焰光度检测器检测，保留时间定性，外标法定量。 4 试剂 4.1 本标准所用试剂在三唑磷出峰处应无干扰峰。实验用水均符合 GB/T 6682 二级水要求。 4.2 甲苯：色谱纯。 4.3 丙酮：分析纯。 4.4 二氯甲烷：分析纯。 4.5 正已烷：分析纯。 4.6 无水硫酸钠：分析纯。650灼烧 4h，干燥器中冷却后置于密闭容器中备用。 4.7 中性氧化铝：200 目300 目。650灼烧 1h，干燥器中冷却后置于密闭容器中备用。 4.8 硫酸钠溶液：30g/L。称取 30g 分析纯硫酸钠，定容至 1L。 4.
4、9 三唑磷标准品：纯度97。 4.10 三唑磷标准储备液：100 g/mL。准确称取三唑磷标准品 10mg(精确至 0.1mg)，用甲苯(4.1)定容至 100mL。贮于 4冰箱中保存，有效期一个月。 4.11 三唑磷标准使用液： 1.0 g/mL。 临用前， 取三唑磷标准贮备液 1.00mL， 用甲苯(4.1)定容至 100mL。 5 仪器 5.1 气相色谱仪：配氮磷检测器或火焰光度检测器。 5.2 电子天平：感量 0.1mg。 5.3 均质机：0rpm24000rpm。 5.4 离心机：0rpm10000rpm。 5.5 旋涡混匀器。 5.6 旋转蒸发仪。 5.7 氮吹仪。 6 色谱条件
5、DB33/T 5642005 2 6.1 色谱柱：SUPELCO SPB- 1701 石英毛细管柱，30m0.32mm0.25 m；或与之相当的色谱柱。 6.2 载气：高纯氮，纯度99.99。 6.3 进样口温度：270，分流比 0.75min 开，1:5。 6.4 柱流速：2.0mL/min，恒流。 6.5 温度程序：初始 150，30/min 升至 250，维持 1m in，10/min 升至 260，维持 10min。 6.6 检测器：选择下列一种检测器。 6.6.1 氮磷检测器： 温度300， 铷珠电流3.100A或调至最佳， 尾吹气(氮气)28mL/min， 氢气4.2mL/min，
6、空气 175mL/min。 6.6.2 火焰光度检测器：温度 300，尾吹气(氮气)25mL/min，氢气 75mL/min，空气 10 0mL/min。 6.7 进样体积：1.0 L。 7 分析步骤 7.1 工作曲线绘制 吸取三唑磷标准使用液 (4.10)0.10mL、 1.50 mL、 3.00 mL、 5.00 mL 于 5mL 刻度试管中，用甲苯 (4.1)稀释至 5.00mL，浓度分别为 0.02 g/mL、 0.30 g/mL、 0.60 g/mL、 1.0 g/mL。 分别吸取上述溶液 1.0 L 注入色谱仪，以溶液浓度为横坐标，峰面积为纵坐标，绘制工作曲线。 7.2 样品预处理
7、 鱼去头、去尾、去内脏、去鳞、去皮 (如果是非可食部分 )，取可食部分；蟹去壳、去腮，取可食部分；虾去头、去壳、去附肢，取可食部分；牡蛎、蛤蜊等贝壳类动物去壳，取可食部分 (包括其中的汁液 )；冷冻水产品要完全解冻，沥干水分；罐装水产品必须包括其中所有的可食部分。 样品用高速组织捣碎机搅碎混匀， 12 小时内测定；如不能立即测定，应放置于 -18低温冰箱中。 7.3 提取及净化 称取 10.0g样品于 50mL离心管中， 加入 20mL丙酮 (4.2)， 均质机均质 1min， 分散均匀， 离心机 4000rpm离心 3min，将丙酮层转移至 100mL鸡心瓶中；向离心管中再加入 10mL丙酮
8、 (4.2)，重复上述操作，合并丙酮层于鸡心瓶中，于 35水浴中减压旋转蒸发至约 5mL。 向鸡心瓶中加入 30mL硫酸钠溶液 (4.7)和 10mL正已烷 (4.4)，充分振荡 1min，转移至 50mL离心管中，4000rpm离心 3min，除去上层正已烷层。重复向水相中加入正已烷提取，直至正已烷层呈无色。 水相倒入 125mL分液漏斗中，加入二氯甲烷 (4.3)20mL，充分振摇 2min，静置分层。将下层二氯甲烷提取液放入 100mL锥形瓶中。往分液漏斗中再加入二氯甲烷 (4.3)20mL，重复上述操作，合并二氯甲烷层于锥形瓶中。 往锥形瓶中加入 1g中性氧化铝 (4.6)， 振摇 1
9、min， 经过无水硫酸钠 (4.5)柱脱水过滤于 100mL鸡心瓶中，于 35水浴中减压旋转蒸发至约 5mL，转移至 5mL刻度试管中并用氮气吹干，加入 1.00mL甲苯 (4.1)，供气相色谱分析用。 7.4 气相色谱测定 注入 1.0 L样品于气相色谱仪分析，记录峰面积，响应值应在仪器检测的线性范围之内。以标准样品的保留时间定性，外标法定量。三唑磷色谱分析图参见附录 A。 8 计算 样品中三唑磷的含量按下列公式计算。 X = mVC 式中： DB33/T 5642005 3 X样品中三唑磷含量， mg/kg； C从标准曲线查得对应的三唑磷浓度， g/mL； V样品经提取和净化后的定容体积，
10、 mL； m样品质量， g。 结果的表述：报告算术平均值的二位有效数。 9 方法精密度和准确度 在 10.0g水产品中添加浓度为 0.10 g三唑磷，测得的回收率为 95.3%106%；测定三唑磷含量为0.01mg/kg的水产品，多家实验室的 RSD为 2.19 8.45，实验室间的 RSD为 4.75。 10 方法检出限 在取样量为 10.0g，最终体积为 1.00mL，进样体积为 1.0 L时，使用氮磷检测器，方法检出限为0.0005mg/kg；使用火焰光度检测器，方法检出限为 0.001mg/kg。 11 方法线性范围 方法的线性范围为：使用氮磷检测器，三唑磷标准溶液浓度为0.01 g/
11、mL1.0 g/mL之间；使用火焰光度检测器，三唑磷标准溶液浓度为0.02 g/mL1.0 g/mL之间。 12 允许差 样品的测定结果0.1mg/kg，两次平行测定结果相对偏差20。 样品的测定结果为(0.11.0)mg/kg，两次平行测定结果相对偏差15。 样品的测定结果1.0mg/kg，两次平行测定结果相对偏差10。 DB33/T 5642005 4 附 录 A （资料性附录） 三唑磷色谱分析图 图A.1 三唑磷标准溶液(0.01g/mL)在氮磷检测器上的色谱图 图A.2三唑磷标准溶液(0.02g/mL)在火焰光度检测器上的色谱图 DB33/T 5642005 5 图A.3 泥蚶样品在氮磷检测器检出的三唑磷(0.001mg/kg)色谱图 图A.4 泥蚶样品在火焰光度检测器检出的三唑磷(0.002mg/kg)色谱图
