1、ICS 65.020.30 B 44 DB33 浙江省 地方标准 DB33/T 2110.4 2018 实验动物 长爪沙鼠 第 4 部分：组织病理检查规程 Laboratory animal Mongolian gerbil Part 4： Guideline of histopathological examination 2018 - 04 - 12 发布 2018 - 05 - 12 实施 浙江省质量技术监督局 发布 DB33/T 2110.4 2018 I 前 言 实验动物 长爪沙鼠分为七个部分： 第 1部分：微生物控制等级及监测； 第 2部分：寄生虫控制等级及监测； 第 3部分：遗传
2、质量控制； 第 4部分：组织病理检查规程； 第 5部分：配合饲料营养成分； 第 6部分：环境及设施； 第 7部分：饲养管理规程。 本部分为实验动物 长爪沙鼠的第 4部分。 本部分 由浙江省科技厅 提出 并归口 。 本部分起草单位：浙江省医学科学院、杭州师范大学。 本部分的主要起草人：褚晓峰、郭红刚、宋晓明、戴方伟、赵德明、杨利峰、李巍、卢领群、应华忠、萨晓婴。 本部分为首次发布。 DB33/T 2110.4 2018 1 实验动物 长爪沙鼠 第 4部分：组织病理检查规程 1 范围 本部分规定了实验动物长爪沙鼠（ Mongolian gerbil）组织病理检查的内容和方法，包括检查规则、检查程序
3、等。 本部分适用于实验动物长爪沙鼠的组织病理检查。 2 术语和定义 下列术语和定义适用于本文件。 2.1 长爪沙鼠 Mongolian gerbil （ Meriones unguieulataus） 经人工饲育，对其携带的病原微生物和 寄生虫实行控制，遗传背景明确或者来源清楚，用于科学研究、教学、生产和检定以及其他科学实验的长爪沙鼠。 3 缩略语 ALB：白蛋白 ALP：碱性磷酸酶 ALT：丙氨酸氨基转移酶 AST：天门冬氨酸氨基转移酶 BUN：尿素氮 CK：肌酸激酶 CRE：肌酐 GLU：血糖 HCT：红细胞比积 HGB：血红蛋白 LDH：乳酸脱氢酶 MCH：平均红细胞血红蛋白含量 MCH
4、C：平均红细胞血红蛋白浓度 MCV：平均红细胞体积 MPV：平均血小板体积 PCT：血小板比积 PLT:血小板 RBC：红细胞 DB33/T 2110.4 2018 2 WBC：白细胞 T-BIL：总胆红素 T-CHO：总胆固醇 TG：甘油三脂 TP：总蛋白 NE:嗜中性白细胞 EO：嗜酸性白细胞 LY:淋巴细胞 MO:单核细胞 HDL:高密度脂蛋白 LDL:低密度脂蛋白 UA：尿酸 4 检查规程 4.1 检查对象 疑似患病动物或必要时，进行采样和检查。 4.2 采样要求 4.2.1 方式 对疑似患病动物，应选择临床症状典型者进行及时采样和检查。或必要时，选择 12 周龄以上长爪沙鼠用于检测，
5、随机抽样。 4.2.2 检测程序 检测程序按图 1执行。 图 1 检查程序 动物编号 外观检查 采血 血液学和血液生物化学指标检测 解剖病理检查 组织病理检查 DB33/T 2110.4 2018 3 5 检查 5.1 外观检查 精神状态、被毛、皮肤、天然孔、营养状况、 运动状态。 5.2 血液学检查 5.2.1 采样要求 动物准备：禁食 12 h 20 h。当疑似患病时，应及时采样。 采血量： 1 mL 2 mL。 标本储存条件： 4 条件下不超过 12 h。 5.2.2 检测项目 RBC、 HCT、 MCV、 RDW 、 HGB、 MCH、 MCHC、 PLT、 MPV、 WBC、 NE、
6、 BA、 EO、 LY和 MO。 5.2.3 正常值参考范围 长爪沙鼠血常规指标正常值参考范围参见附录 A。 5.3 血液生物化学检查 5.3.1 采样要求 动物准备：禁食 12 h 20 h。当疑似患病时，应及时采样。 采血量： 1 mL 2 mL。 标本处理：室温放置 30 min 60 min， 3000 rpm 离心 5 min，取血清用于检测。 标本储存条件：血清标本密封、避光保存， 4 条件下不超过 24 h。 5.3.2 检测项目 CRE、 BUN、 ALP、 CK、 LDH 、 TP、 ALB、 GLU、 TG 、 TBIL 、 TCH、 ALT、 AST、 HDL、 LDL、
7、 UA。 5.3.3 正常值参考范围 长爪沙鼠血清生物化学指标正常值参考范围参见附录 B。 5.4 解剖病理检查 5.4.1 安乐死 实验动物常规麻醉后处死。 5.4.2 大体解剖 5.4.2.1 解剖程序 体表检查 皮下检查 剖开腹腔实施一般视检 摘出腹腔脏器并检查 摘出骨盆腔脏器并检查 剖开胸腔作一般视检 摘出胸腔脏器并检查 摘出口腔和颈部器官并检查 剖开颅腔，摘出头部器官并检查 剖开脊椎管，摘出脊髓并检查 肌肉、关节和淋巴结检查 骨和骨髓检查。 5.4.2.2 检查内容 DB33/T 2110.4 2018 4 根据实验要求或检查目的不同，选择性地检查组织脏器或做全身脏器检查。全身组织脏
8、器的大体病变检查程序可参见附录 C。 体表：被毛、皮肤、天然孔、营养状况。 皮下： 脂肪、乳腺、颌下腺、睾丸、附睾。 头颈部：口腔、鼻腔、大脑、小脑、脑干、垂体、甲状腺、甲状旁腺。 胸腔：胸腔液、胸腺、肺和肺门淋巴结、心包、心包液和心脏、主动脉、气管和支气管。 腹腔：腹腔液、脾脏和脾 门淋巴结、肝脏、胆囊、肝门部位的血管、胆管和淋巴结、胰腺、肾脏、肾上腺、胃、肠道（十二指肠、空肠、回肠、盲肠、结肠、直肠）、肠系膜淋巴结。 盆腔：膀胱、前列腺、精囊腺、卵巢、输卵管、子宫、阴道。 5.5 组织病理检查 5.5.1 组织标本取材 参见附录 D。 5.5.2 检查内容 可根据检查目的不同，确定需要取材
9、的组织脏器或做全身脏器的取材。 全身脏器包括：血液循环系统（心脏），呼吸系统（肺），消化系统（颌下腺、胃、十二指肠、空肠、回肠、盲肠、结肠、直肠、肝脏、胰腺），泌尿系统（肾脏、膀胱），生殖系统（睾丸、附睾、前列腺、凝固腺、精囊腺、卵 巢、子宫角、子宫体、子宫颈、阴道），免疫系统（胸腺、脾、肠系膜淋巴结），神经系统（脑），内分泌系统（甲状腺、垂体），以及大体解剖检查发现异常的器官和组织。 5.5.3 病理组织制片 常规石蜡切片，伊红 -苏木精染色，必要时进行免疫组织化学鉴定。 5.5.4 阅片及分析 由具有病理诊断经验的病理学专业人员进行。 6 结果判断 6.1 外观、血液学和血液生化检查结果判
10、断 6.1.1 判断标准 检查结果分为四个等级，分别为未见异常、轻微异常、中度异常和明显异常，判定标准如下： a) 未见异常：动物外观无异常，同时血液化验指标均在正常参考值范围内； b) 轻微异常：动物外观无 明显异常， 但是血液化验指标有 1 项 2 项异常升高或降低，最大变异不超过正常参考值范围临界值的 20%； c) 中度异常： 1) 动物外观无明显异常，但是超过 2 项血液化验指标异常升高或降低，最大变异达到正常参考值范围临界值 20% 50%； 2) 动物外观轻微或中度异常，同时超过 2 项血液化验指标异常升高或降低，最大变异达到正常参考值范围临界值 20% 50%； d) 明显异常
11、： DB33/T 2110.4 2018 5 1) 动物外观无明显异常，但是超过 2 项血液化验指标异常升高或降低，最大变异超过正常参考值范围临界值的 50%； 2) 动物外观轻微或轻度异常，同时超过 2 项血液化验指标 异常升高或降低，最大变异超过正常参考值范围临界值的 50%； 3) 动物外观明显异常。 6.1.2 结果确认 检查结果出现异常变化时，需要重复检测一次。当两次检测结果不相符时，对于血常规指标需再以显微镜检测做最终判定，对于血清生物化学指标则需再做第三次检测，以其中两次一致的结果为准。 6.2 解剖病理检查结果判断 解剖病理检查结果为 4 分评定法，分为五个等级，分别为未见异常
12、、轻微病变、中度病变、严重病变、非常严重病变，判定标准见表 1。 表 1 分级判定 计分 分级 描述 0 未见异常 在研究条件下，考虑到年龄、性别和动物的负荷等因素，认为组 织未见异常。 1 轻微病变 表现出的变化程度刚刚超过正常范围。 2 中度病变 通常情况下，病变能被轻易认出，但尚不严重。 3 严重病变 病变显著，但很有发展到更加严重的可能。 4 非常严重病变 组织器官大面积区域发生病变。 6.3 组织病理检查结果判断 组织病理检查报告应由具有组织病理诊断经验的病理学专业人员出具，当需要对疾病作出诊断时，应由具有病理诊断经验的病理学专业人员对所取组织器官的 主要 病变进行描述，确定 病变类
13、型及特点。报告内容应使用国际通用规范病理学术语，必要时需进行同行评议。 DB33/T 2110.4 2018 6 附 录 A （资料性附录 ） 长爪沙鼠血液学指标正常值参考范围 长爪沙鼠血液学指标正常值参考范围见表 A.1。 表 A.1 长爪沙鼠血液学指标正常值参考范围 检查项目 单位 参考范围 RBC 1012/L 5.82 9.18 HCT % 27.1 55.3 MCV fL 46.9 68.2 RDW %CV 15.2 18.5 HGB g/L 6.48 13.86 MCH pg 10.30 17.8 MCHC g/L 21.8 28.1 PLT 109/L 403.2 981.5 M
14、PV fL 4.79 5.71 WBC 109/L 0.85 3.01 NE % 5.13 60.36 BA % 0.00 0.45 EO % 0.15 1.41 LY % 29.0 86.9 MO % 0.00 9.23 注 1： 数据主要来自 2 月 4 月龄长爪沙鼠，雌性、雄性动物合并统计。 DB33/T 2110.4 2018 7 附 录 B （资料性附录） 长爪沙鼠血清生物化学指标正常值参考范围 长爪沙鼠血清生物化学指标正常值参考范围见表 B.1。 表 B.1 长爪沙鼠血清生物化学指标正常值参考范围 检查项目 单位 参考范围 CRE mol/L 36.95 53.0 BUN mmol
15、/L 8.45 15.25 ALP U/L 103.7 446.93 CK U/L 404.78 1258.8 LDH U/L 5.93 65.98 TP g/L 28.54 58.8 ALB g/L 25.48 38.9 GLU mmol/L 2.45 9.19 TG mmol/L 0.22 0.78 TBIL mol/L 0.49 2.10 TCH mmol/L 0.92 2.95 ALT U/L 45.66 111.9 AST U/L 142.9 279.86 HDL mmol/L 0.37 1.66 LDL mmol/L 0.08 0.59 UA mol/L 7.62 21.85 注：
16、 数据主要来自 2 月 4 月龄长爪沙鼠，雌性、雄性动物合并统计。 DB33/T 2110.4 2018 8 附 录 C （资料性附录） 大体解剖检查程序 C.1 皮肤、口腔及天然孔 注意被毛的光泽度，皮肤的厚度，硬度及弹性，有无脱毛、褥疮、溃疡、脓肿、创伤、肿瘤、外寄生虫等，有无粪便和其他病理产物的污染。 天然孔 (眼，鼻、口，肛门、外生殖器等 )的检查。检查各天然孔的开闭状态，有无分泌物、排泄物及其性状、量、颜色，味和浓度等。 检查眼结膜，鼻腔，口 腔，肛门，生殖器的粘膜。着重注意粘膜色泽变化。 C.2 腹腔脏器 剖开腹腔，暴露器官，立即进行视检。检查的内容包括： e) 腹腔液的量和性状；
17、 f) 腹腔内有无异常内容物，如气体、血凝块，胃肠内容物，脓汁，寄生虫，肿瘤等； g) 腹膜的性状，是否光滑，有无充血、出血、纤维素性渗出、脓肿、瘘管、破裂、肥厚、肿瘤等； h) 腹腔脏器的位置和外形，注意有无异位、扭转、粘连、破裂、肿瘤、寄生虫结节，肠道浆膜有无出血斑点、坏死结节以及淋巴结的性状； i) 横膈膜的紧张程度，有无破裂。 C.2.1 胃肠道 剔净肠胃外壁脂肪组织后进行检查。 胃的检查，先观察其大小、浆膜 面的色泽、有无粘连、胃壁有无破裂或穿孔等。胃剪开后，检查胃内容物的量、性状、含水量、气味、色泽、成分、有无寄生虫等。最后检查胃粘膜的色泽，注意有无肿胀、充血、溃疡、肥厚等病变。取
18、胃组织作组织学检查。 小肠和大肠的检查：先检查肠管浆膜面的色泽、有无粘连、肿瘤、寄生虫结节等，注意肠内容物的量、性状、气味、有无血液、异物、寄生虫等。除去肠内容物，检查肠粘膜的性状，注意有无肿胀、发炎、憩室、充血、出血、溃疡、肠石、寄生虫和其他病变。小肠与大肠分别截取肠道组织作组织病理学检查。 C.2.2 肝脏 视检肝脏颜色和病理变化，检查肝脏 的形态、大小、色泽、包膜性状、有无出血、结节、坏死等。最后切开肝组织，观察切面的色泽、含血量、血管和胆管的性状。注意切面是否隆突，肝小叶结构是否清晰，有无脓肿、寄生虫性结节和坏死等。取少许肝脏组织作组织病理学检查。 C.2.3 胰腺 随十二指肠取出胰腺，观察有无充血、出血、肿胀、萎缩、囊肿等病变，留样进行组织病理学检查。 C.2.4 肠系膜淋巴结
