1、湖南省地方标准DB43辣椒种子钴60 辐射诱变技术规程DB43/T 12372016 ICS 65.020.20B 05湖南省质量技术监督局 发 布Technical regulations of Co60 Mutagenesis of pepper2017-03-01实施2016-12-30发布DB43/T 12372016 I 目 次 前言1 范围 12 原理 13 辐照设备及材料 14 操作步骤 15 计算公式 26 植株材料编号 2附录 A（资料性附录） 突变体性状调查登记表 3DB43/T 12372016 II 前 言 本标准按照GB/T 1.12009给出的规则起草。 本标准的某
2、些内容可能涉及专利，本标准的发布机构不承担识别这些专利的责任。 本标准由湖南省农业科学院蔬菜研究所提出。 本标准由湖南省农业标准化技术委员会归口。 本标准起草单位：湖南省农业科学院蔬菜研究所。 本标准主要起草人：刘峰、邹学校、戴雄泽、马艳青、李雪峰、张竹青、陈文超、郑井元、欧立军、周书栋、杨博智、杨莎。 DB43/T 12372016 1 辣椒种子钴60辐射诱变技术规程 1 范围 本标准规定了辣椒种子钴60辐射诱变设施、材料及操作步骤等技术规程。 本标准适用于采用钴60射线辐射辣椒种子获得突变体。 2 原理 钴60射线辐射属于物理诱变方式之一，具有很高的能量，能产生电离作用，因而能直接或间接的
3、改变DNA结构。其直接效应是脱氧核糖的碱基发生氧化，或脱氧核糖的化学键和糖-磷酸相连接的化学键断裂，使得DNA的单链或双链键断裂。其间接效应是电离辐射是水或有机分子产生自由基，这些自由基与细胞中的溶质分子起作用，发生化学变化，作用于DNA分子而引起缺失或损伤。此外，辐射还能引起染色体畸变，发生染色体断裂，形成染色体结构的缺失、易位和倒位等。通过辐射诱变不仅可以改良品种，而且可以创造新的种质资源。 3 辐照设备及材料 3.1 辐照设备 钴60辐射源、贮源井、通风系统、升降源装置及被照射物传输系统、报警剂量仪、便携式剂量检测仪，光照培养箱。 3.2 主要材料 塑料膜、滤纸、培养皿、移液器、育苗基质
4、、三元复合肥（NP2O5K2O 15:15:15）、防虫网(40目)、钢架。硫酸亚铁 4 操作步骤 4.1 钴60种子半致死剂量确定 a） 精选饱满辣椒种子，分为10组，每组约150 g，重复3次； b） 钴60辐照剂量设为0Gy，100 Gy，200 Gy，300Gy，400 Gy，500 Gy，600 Gy，700 Gy，800 Gy，900 Gy，1000 Gy； c） 将每组经钴60射线处理过的辣椒种子各取200粒，用清水浸泡之后放置在铺垫湿润滤纸的培养皿中，在温度设置为27/20的光照培养箱中暗培养23 d； d） 然后在昼夜温度为27/20 ，光周期为16h/8h（光/暗）的光照培
5、养箱中继续培养（每隔12d需向培养皿中补加水，使滤纸保持湿润）； e） 测定发芽势和发芽率，并绘制发芽率曲线图，确定钴60半致死剂量。 DB43/T 12372016 24.2 辣椒种子辐照及M1种子催芽 半致死剂量辐照组的剩余辣椒种子待辣椒播种季节按照规程4.1进行适时催芽。 4.3 M1代种子育苗与种植 a） 辐照处理后的辣椒种子和对照种子播于1020 孔含育苗基质的泡沫穴盘中进行营养液（0.1% 三元复合肥）漂浮育苗； b） 待辣椒苗长到适龄大小按每亩2000-2500株进行移栽； c） 辣椒开花前搭钢架（木架）覆盖40目防虫网； d） 植株生长期间以野生型为对照对M1代出现的突变植株表
6、型进行观察，记录、鉴定拍照，待M1代植株果实红熟后按单株统一编号（规程6）并进行种子采收和干燥保存。 4.4 M2代大田种植及表型筛选 a） 将上年收获的M1代种子按每个株系播种20株，其余的种子进入种子库保存备用； b） M2代按规程4.3 进行播种育苗移栽； c） 在植株生长的各个时期以野生型为对照，筛选出性状发生变异的单株，挂牌标记，单株自交留种，单株收种并编号（见附录A）。 5 计算公式 5.1 发芽率 发芽率=（种子14天内总发芽数供试种子数）100% 5.2 发芽势 发芽势=（种子6天内发芽数供试种子数）100% 5.3 突变率 突变率=(突变株成活总株数)100% 6 植株材料编
7、号 诱变种子株系编号：品种名-诱变种类-年月-世代-株系编号-世代-单株编号；如：XX-Co60-XXXX-MX-XXXX-MX-XX。 DB43/T 12372016 3 附录A （规范性附录） 突变体性状调查登记表 记载时间： 记载地点： 记载人： 植株编号： 植株照片 突变株性状 株型 株高() 株幅() 茎粗() 分枝类型 分枝数 叶形 叶色 叶缘 叶长() 叶宽() 叶柄长() 花冠色 花柱长 花瓣数 花柱色 花药色 始花节位 果实着生方向 果形 果面特征 果面光泽 果肩形状 果顶形状 果面棱沟 青熟果色 老熟果色 熟性 单株果数 单果重(g) 果纵径() 果横径() 果肉厚() 心室数 单果种子数 千粒重(g)
