1、儿童EBV感染及其 相关疾病的实验室诊断,四川大学华西第二医院检验科,EBV简介:,EBV是人疱疹病毒4型,在淋巴细胞中潜伏。 EBV在正常人群中感染非常普遍,约90%以上的成人血清EBV抗体阳性 EBV主要通过唾液传播,也可经输血传染 EBV原发感染后,大多数无临床症状,4-6岁以下儿童大多表现为隐性或轻型发病,多发生传染性单核细胞增多症。 一旦感染,EBV在人体B细胞建立潜伏感染,受感染者将成为终生带毒者 在机体免疫功能下降和某些因素触发下,潜伏的EBV可以被再激活,引起病毒复制及临床疾病,EBV相关疾病,传染性单核细胞增多症(Infectious mononucleosis,IM)慢性活
2、动性EB病毒感染(Chronic active EBVinfection,CAEBV)EB病毒相关性嗜血细胞综合征(EBV-associated hemophagocytic syndrome, EBVAHS)Burkitts淋巴瘤何奇金淋巴瘤,临床需要回答的问题,是否感染EBV? EBV感染的时相? 是否EBV活动性感染? 疾病是否与EBV感染相关?,EBV感染的实验室诊断方法简介,EBV特异性抗体检测,原发性EBV感染过程中首先产生针对衣壳抗原(capsid antigen,CA)的 IgM和IgG在急性感染的晚期,抗早期抗原(early antigen,EA)抗体出现在恢复期晚期,抗核抗
3、原(nuclear antigen,NA)抗体产生抗CA-IgG和抗NA-IgG可持续终生,传统检测策略的问题,EBV抗体检测结果分析1,NA-IgG (+),CA-IgG(+)和EA-IgG(+)和/或CA-IgM(+)或CA-IgA强阳性复发,只是高亲合力的CA-IgG既往感染,EBV抗体结果分析2,NA-IgG(-),CA-IgG(+),NA-IgG阴性,CA-IgG和IgM(-) 未感染EBV,CA-IgM(-)和高亲和力的CA-IgG,CA-IgM(+)和低亲和力CA-IgG,EA-IgG可能阳性原发感染,EA-IgG(+) NA-1抗体丢失的复发,EA-IgG(-) NA-1抗体丢
4、失的既往感染,EBV病毒核酸检测,实时荧光定量PCR是目前最主要的监测EBV载量的方法 鉴别EBV健康携带者的低水平复制与EBV相关疾病患者高水平活动性感染。,不同EBV相关疾病中EBV病毒载检测的标本选择,传单的EBV感染实验室诊断,血清学检测:同时满足下列2条者可以诊断为EBV-IM: 1.下列临床症状中的3项:发热、咽峡炎、颈淋巴结肿大、肝肿大、脾肿大; 2.原发性EBV感染的血清学证据,满足下列2条中任一项:(1)抗EBV-CA-IgM和抗EBV-CA-IgG抗体阳性,且抗EBV-NA-IgG阴性 (2)抗EBV-CA-IgM阴性,但抗EBV-CA-IgG阳性,且为低亲和力抗体,传单的
5、EBV感染实验室诊断,DNA检测:IM患者外周血中EB病毒载体在2周内达到峰值,随后很快下降。 至病程14天,多数EBV-IM患者血清中已检测不到病毒核酸,病程22天后,所有EBV-IM患者血清中均检测不到病毒核酸。 IM患者不推荐进行EB病毒载量检测,慢性活动性EBV感染的实验室诊断,EBV抗体检测,慢性活动性EBV感染的实验室诊断,DNA检测:绝大多数CAEBV患者PBMC中EBV-DNA水平高于102.5拷贝/ug DNA 部分CAEBV患者血浆/血清中EBV-DNA阴性 CAEBV患者血浆/血清中EBV-DNA水平与病情严重程度和预后有关,EB病毒相关噬血淋巴组织细胞增生症,EBV-HLH可以发生在原发性EBV感染时期,既往EBV感染再激活时期 EBV-HLH患者血清中EBV抗体反应呈多种反应类型,单纯血清EBV抗体检测对EBV-HLH的诊断意义不大。,EB病毒相关噬血淋巴组织细胞增生症,DNA检测:EBV-HLH患者外周血单个核细胞和血浆/血清均含有很高的EBV-DNA载量,结合血清学抗体检测,有助于EBV-HLH的诊断。监测EBV-HLH患者血清中EBV-DNA载量有助于评估治疗效果。,小结,人群EBV感染普遍,EBV与许多疾病相关 EBV血清学抗体检测有助于判断是否EBV感染,以及感染的大致时相 EBV-DNA定量检测有助于判断是否存在活动性感染,