1、September 2017 DIN-Normenausschuss Lebensmittel und landwirtschaftliche Produkte (NAL)Preisgruppe 13DIN Deutsches Institut fr Normung e. V. Jede Art der Vervielfltigung, auch auszugsweise, nur mit Genehmigung des DIN Deutsches Institut fr Normung e. V., Berlin, gestattet.ICS 67.050; 67.060; 67.080.2
2、0; 67.140.20Zur Erstellung einer DIN SPEC knnen verschiedene Verfahrensweisen herangezogen werden: Das vorliegende Dokument wurde nach den Verfahrensregeln einer Vornorm erstellt.!%Y“2585425www.din.deDIN CEN/TS 17083Lebensmittel Bestimmung von Acrylamid in Lebensmitteln und Kaffee mit Gaschromatogra
3、phie-Massenspektrometrie (GC-MS);Deutsche Fassung CEN/TS 17083:2017Foodstuffs Determination of acrylamide in food and coffee by gas chromatography-mass spectrometry (GC-MS);German version CEN/TS 17083:2017Produits alimentaires Dosage par CG-SM des produits alimentaires et caf avec GC-MS;Version alle
4、mande CEN/TS 17083:2017Alleinverkauf der Spezifikationen durch Beuth Verlag GmbH, 10772 Berlin www.beuth.deGesamtumfang 25 SeitenDIN SPEC 10808 DDIN CEN/TS 17083 (DIN SPEC 10808):2017-09 2 Nationales Vorwort Dieses Dokument (CEN/TS 17083:2017, DIN SPEC 10808) wurde vom Technischen Komitee CEN/TC 275
5、 Lebensmittelanalytik Horizontale Verfahren erarbeitet, dessen Sekretariat von DIN (Deutschland) gefhrt wird. Das zustndige nationale Gremium ist der Arbeitsausschuss NA 057-01-14 AA Prozesskontaminanten“ im DIN-Normenausschusses Lebensmittel und landwirtschaftliche Produkte (NAL). Eine DIN SPEC nac
6、h dem Vornorm-Verfahren ist das Ergebnis einer Normungsarbeit, das wegen bestimmter Vorbehalte zum Inhalt oder wegen des gegenber einer Norm abweichenden Aufstellungsverfahrens von DIN noch nicht als Norm herausgegeben wird. Zur vorliegenden DIN SPEC wurde kein Entwurf verffentlicht. Erfahrungen mit
7、 dieser DIN SPEC sind erbeten vorzugsweise als Datei per E-Mail an naldin.de in Form einer Tabelle. Die Vorlage dieser Tabelle kann im Internet unter http:/www.din.de/stellungnahme abgerufen werden; oder in Papierform an den DIN-Normenausschuss Lebensmittel und landwirtschaftliche Produkte (NAL) im
8、DIN Deutsches Institut fr Normung e. V., Burggrafenstrae 6, 10787 Berlin. Diese Technische Spezifikation enthlt neben den gesetzlichen Einheiten auch die Einheit Da“ (Dalton), die in Deutschland nicht zugelassen ist. Es wird ausdrcklich darauf hingewiesen, dass die Anwendung dieser Einheit im nation
9、alen amtlichen und geschftlichen Verkehr auf Grund des Gesetzes ber Einheiten im Messwesen nicht zulssig ist. Umrechnung: Nicht zugelassene Einheit Zugelassene Einheit Umrechnung Da (oder u) kg 1 Da = 1 u = 1,660 539 040 (20) 10-27kg Fr die in diesem Dokument zitierten internationalen Dokumente wird
10、 im Folgenden auf die entsprechenden deutschen Dokumente hingewiesen: ISO 5725-2:1994 siehe DIN ISO 5725-2:2002-12 Nationaler Anhang NA (informativ) Literaturhinweise DIN ISO 5725-2:2002-12, Genauigkeit (Richtigkeit und Przision) von Messverfahren und Messergebnissen Teil 2: Grundlegende Methode fr
11、Ermittlung der Wiederhol- und Vergleichprzision eines vereinheitlichten Messverfahrens (ISO 5725-2:1994 einschlielich Technisches Korrigendum 1:2002) TECHNISCHE SPEZIFIKATION TECHNICAL SPECIFICATION SPCIFICATION TECHNIQUE CEN/TS 17083 Juni 2017 ICS 67.050; 67.060; 67.140.20; 67.080.20 Deutsche Fassu
12、ng Lebensmittel Bestimmung von Acrylamid in Lebensmitteln und Kaffee mit Gaschromatographie-Massenspektrometrie (GC-MS) Foodstuffs Determination of acrylamide in food and coffee by gas chromatography-mass spectrometry (GC-MS) Produits alimentaires Dosage par CG-SM des produits alimentaires et caf av
13、ec GC-MS Diese Technische Spezifikation (CEN/TS) wurde vom CEN am 14. Mai 2017 als eine knftige Norm zur vorlufigen Anwendung angenommen. Die Gltigkeitsdauer dieser CEN/TS ist zunchst auf drei Jahre begrenzt. Nach zwei Jahren werden die Mitglieder des CEN gebeten, ihre Stellungnahmen abzugeben, insb
14、esondere ber die Frage, ob die CEN/TS in eine Europische Norm umgewandelt werden kann. Die CEN-Mitglieder sind verpflichtet, das Vorhandensein dieser CEN/TS in der gleichen Weise wie bei einer EN anzukndigen und die CEN/TS verfgbar zu machen. Es ist zulssig, entgegenstehende nationale Normen bis zur
15、 Entscheidung ber eine mgliche Umwandlung der CEN/TS in eine EN (parallel zur CEN/TS) beizubehalten. CEN-Mitglieder sind die nationalen Normungsinstitute von Belgien, Bulgarien, Dnemark, Deutschland, der ehemaligen jugoslawischen Republik Mazedonien, Estland, Finnland, Frankreich, Griechenland, Irla
16、nd, Island, Italien, Kroatien, Lettland, Litauen, Luxemburg, Malta, den Niederlanden, Norwegen, sterreich, Polen, Portugal, Rumnien, Schweden, der Schweiz, Serbien, der Slowakei, Slowenien, Spanien, der Tschechischen Republik, der Trkei, Ungarn, dem Vereinigten Knigreich und Zypern. EUROPISCHES KOMI
17、TEE FR NORMUNG EUROPEAN COMMITTEE FOR STANDARDIZATION COMIT EUROPEN DE NORMALISATION CEN-CENELEC Management-Zentrum: Avenue Marnix 17, B-1000 Brssel 2017 CEN Alle Rechte der Verwertung, gleich in welcher Form und in welchem Verfahren, sind weltweit den nationalen Mitgliedern von CEN vorbehalten. Ref
18、. Nr. CEN/TS 17083:2017 DCEN/TS 17083:2017 (D) 2 Inhalt Seite Europisches Vorwort . 3 1 Anwendungsbereich 4 2 Normative Verweisungen 4 3 Kurzbeschreibung 4 4 Reagenzien . 4 5 Herstellung der Standardlsungen 6 6 Gerte . 7 7 Durchfhrung 9 8 GC-MS-Analyse . 10 9 Berechnung und Berichterstattung 13 10 U
19、ntersuchungsbericht 14 11 Przisionsdaten 14 Anhang A (informativ) Typische Chromatogramme 15 Anhang B (informativ) GC-MS-Fehlersuche . 17 Anhang C (informativ) Einzellaborvalidierung 19 Anhang D (informativ) Przisionsdaten aus Ringversuch . 21 Literaturhinweise . 23 DIN CEN/TS 17083 (DIN SPEC 10808)
20、:2017-09 CEN/TS 17083:2017 (D) 3 Europisches Vorwort Dieses Dokument (CEN/TS 17083:2017) wurde vom Technischen Komitee CEN/TC 275 Lebensmittelanalytik Horizontale Verfahren“ erarbeitet, dessen Sekretariat von DIN gehalten wird. Es wird auf die Mglichkeit hingewiesen, dass einige Elemente dieses Doku
21、ments Patentrechte berhren knnen. CEN ist nicht dafr verantwortlich, einige oder alle diesbezglichen Patentrechte zu identifizieren. Dieses Dokument wurde unter einem Mandat erarbeitet, das die Europische Kommission und die Europische Freihandelszone dem CEN erteilt haben. Die Anhnge A, B, C und D s
22、ind informativ. WARNUNG 1 Die Anwendung dieser Technischen Spezifikation bringt den Einsatz gefhrdender Stoffe, Arbeitsablufe und Gerte mit sich. Dieses Dokument erhebt nicht den Anspruch, alle Sicherheitsaspekte, die bei ihrer Anwendung auftreten knnen, aufzuzeigen. Es liegt in der Verantwortung de
23、s Anwenders dieses Dokuments, geeignete Vorkehrungen fr den Arbeits- und Gesundheitsschutz zu treffen und vor Anwendung zu prfen, welche einschrnkenden Vorschriften und Regelungen zu bercksichtigen sind. WARNUNG 2 Vorsicht ist geboten, wenn Kunststoffe aus Polyacrylamid verwendet werden, da Acrylami
24、d aus diesen Werkstoffen ausgewaschen werden kann. Entsprechend der CEN-CENELEC-Geschftsordnung sind die nationalen Normungsinstitute der folgenden Lnder gehalten, diese Technische Spezifikation anzukndigen: Belgien, Bulgarien, Dnemark, Deutschland, die ehemalige jugoslawische Republik Mazedonien, E
25、stland, Finnland, Frankreich, Griechenland, Irland, Island, Italien, Kroatien, Lettland, Litauen, Luxemburg, Malta, Niederlande, Norwegen, sterreich, Polen, Portugal, Rumnien, Schweden, Schweiz, Serbien, Slowakei, Slowenien, Spanien, Tschechische Republik, Trkei, Ungarn, Vereinigtes Knigreich und Zy
26、pern. DIN CEN/TS 17083 (DIN SPEC 10808):2017-09 CEN/TS 17083:2017 (D) 4 1 Anwendungsbereich Diese Technische Spezifikation legt ein Verfahren zur Bestimmung von Acrylamid in Getreideerzeugnissen, Kartoffelerzeugnissen und Kaffee durch Gaschromatographie gekoppelt mit Massenspektrometrie (GC-MS) fest
27、. Dieses Verfahren wurde in einer Einzellaborvalidierung durch die Analyse von aufgestockten Proben (Pommes frites (ungegart), Brot, Krcker, Getreidebeikost, Kekse, Rohkaffee, Rstkaffee und lslicher Kaffee) im Bereich von 30 g/kg bis 1 500 g/kg Acrylamid untersucht. Die Ergebnisse der Einzellaborval
28、idierung wurden von einem Labor mit umfangreicher Erfahrung in der Acrylamid-Analytik erzielt. Auerdem wurde dieses Verfahren auch in einem Ringversuch durch Untersuchung von Proben mit einem Anteil an entstandenem Acrylamid von etwa 200 g/kg bis 2 000 g/kg untersucht. Kritische Punkte des Verfahren
29、s werden in 7.5 und Abschnitt 8 benannt. 2 Normative Verweisungen Die folgenden Dokumente, die in diesem Dokument teilweise oder als Ganzes zitiert werden, sind fr die Anwendung dieses Dokuments erforderlich. Bei datierten Verweisungen gilt nur die in Bezug genommene Ausgabe. Bei undatierten Verweis
30、ungen gilt die letzte Ausgabe des in Bezug genommenen Dokuments (einschlielich aller nderungen). EN ISO 3696:1995, Wasser fr analytische Laborzwecke Spezifikation und Prfverfahren (ISO 3696:1987) 3 Kurzbeschreibung Die Prfmenge wird mit heiem Wasser extrahiert und isotopenmarkiertes Acrylamid wird a
31、ls interner Standard hinzugefgt. Proben mit hohem Fettanteil werden mit Hexan entfettet, mit Carrez-Lsung gereinigt und zentrifugiert. Die Probenextrakte werden bromiert und mit Essigsureethylester extrahiert. Nachdem Essigsureethylester durch Verdampfung entfernt wurde, wird Triethylamin zur teilwe
32、isen Debromierung hinzugefgt. Danach wird ein Anteil des Probenextrakts zur Quantifizierung in ein GC-MS-System injiziert. Die chromatographische Trennung erfolgt auf einer GC-Kapillarsule mittlerer Polaritt. Das Acrylamid-Derivat wird bei 70 eV ionisiert, im Modus der Einzelionenregistrierung (en:
33、Selected Ion Monitoring, SIM) aufgezeichnet und durch Vergleich mit dem isotopenmarkierten Analogon quantifiziert. 4 Reagenzien Sofern nicht anders festgelegt, sind nur Reagenzien von anerkannter Analysenreinheit und Wasser der Qualitt 1 nach EN ISO 3696:1995 (elektrische Leitfhigkeit niedriger als
34、0,1 S/cm bei 25 C) zu verwenden. Die Standardlsungen werden bevorzugt gravimetrisch hergestellt. Zur Herstellung des nativen und des mit einem stabilen Isotop markierten Acrylamids wird eine Analysenwaage (6.1) verwendet. WARNUNG Acrylamid wurde von der Internationalen Agentur fr Krebsforschung (en:
35、 International Agency for Research on Cancer (IARC) fr Menschen als wahrscheinlich krebserregend eingestuft (siehe 2). Brom ist sehr giftig und tzend. Bromwasserstoffsure ist tzend und gefhrlich. Die hergestellte Bromierungslsung (siehe 4.17) ist als sehr giftig und tzend einzustufen. Es muss Schutz
36、ausrstung wie Laborkittel, Einweghandschuhe und Schutzbrille verwendet werden. Alle Arbeitsschritte unter Verwendung von Acrylamid, Brom, Bromwasserstoffsure, Bromierungs-lsung und organischen Lsungsmitteln mssen in einem Abzug mit ausreichender Belftung erfolgen. WICHTIG Chemikalienabflle sind nach
37、 den geltenden Umweltschutzregeln und -bestimmungen zu entsorgen. Brom ist sehr giftig fr Wasserorganismen, daher mssen Umwelteintrge vermieden werden. Abflle mssen in geeigneter Weise entsorgt werden. DIN CEN/TS 17083 (DIN SPEC 10808):2017-09 CEN/TS 17083:2017 (D) 5 4.1 Acrylamid, Reinheit 99 %. 4.
38、2 1,2,3-13C3-Acrylamid, (Acrylamid-13C3) Isotopenreinheit (13C) 99 %, zu beziehen als Lsung von 1 000 g/ml.1) Es ist zulssig, deuteriertes Acrylamid (Acrylamid-d3) als alternativen internen Standard zu verwenden. In den folgenden Abschnitten des Verfahrens werden der Nachweis und die Berechnung mitt
39、els MS nur fr Acrylamid-13C3beschrieben. 4.3 Brom, Reinheit 99 %. 4.4 Essigsureethylester, MS-Qualitt. 4.5 Helium, gereinigtes Druckgas, (mit einer Reinheit von 99,995 % oder hher). 4.6 n-Hexan, MS-Qualitt. 4.7 Bromwasserstoffsure, 48 % in Wasser, Gehalt 99,9 %. 4.8 Eis, zerstoen. 4.9 Magnesiumsulfa
40、t, wasserfreies Pulver. 4.10 Kaliumbromid, Reinheit 98,5 %. 4.11 Kaliumhexacyanoferrat-Trihydrat (II), K4Fe(CN)63H2O, Reinheit 98,5 %. 4.12 Natriumchlorid 4.13 Natriumthiosulfat-Pentahydrat, Na2S2O35 H2O, Reinheit 99,5 %. 4.14 Natriumthiosulfat-Lsung, Stoffmengenkonzentration c = 1 mol/l. 24,82 g Na
41、triumthiosulfat-Penta-hydrat werden in 100 ml Wasser gelst. 4.15 Triethylamin, N(C2H5)3, Reinheit 99 %. 4.16 Zinkacetat-Dihydrat, Zn(CH3COO)22 H2O, Reinheit 98,5 %. 4.17 Bromierungslsung Die nachfolgenden Schritte werden mit Handschuhen in einem Abzug durchgefhrt. Die Lsung wird alle drei Monate fri
42、sch hergestellt. Zur Herstellung von Bromwasser (gesttigt) wird eine 1-l-Glasflasche mit etwa 400 ml Wasser in ein Bad aus zerstoenem Eis gestellt und etwa 10 min mit einem Magnetrhrer gerhrt. Mithilfe eines Messzylinders werden 15 ml 1 ml Brom (4.3) hinzugefgt, die Flasche wird mit einem Stopfen ve
43、rschlossen und es wird mindestens 60 min weiter gerhrt. Es wird fest verschlossen und bei 4 C bis 6 C gelagert. 1) Dies ist ein Beispiel fr ein geeignetes handelsbliches Produkt, hergestellt durch Cambridge Isotope Laboratories Inc, Andover MA, USA, CLM-813-1.2 oder hnlich. Diese Angabe dient nur zu
44、r Unterrichtung der Anwender dieser Technischen Spezifikation und bedeutet keine Anerkennung dieser Produkte durch CEN. Gleichwertige Produkte drfen verwendet werden, wenn sie nachweisbar zu den gleichen Ergebnissen fhren. DIN CEN/TS 17083 (DIN SPEC 10808):2017-09 CEN/TS 17083:2017 (D) 6 400 g 2 g K
45、aliumbromid (4.10) werden in eine 2-l-Glasflasche mit Schraubverschluss abgewogen und 1 000 ml 5 ml Wasser hinzugefgt. Es wird geschttelt oder gerhrt, um die Bestandteile zu lsen. Dann werden mithilfe eines Messzylinders 20 ml 1 ml Bromwasserstoffsure (4.7) hinzugefgt. Mithilfe von Messzylindern wer
46、den 320 ml 5 ml gesttigtes Bromwasser und danach 660 ml 5 ml Wasser in die Glasflasche (6.3) gegeben und gut vermischt. Die Glasflasche wird mit einem Stopfen verschlossen und bei 4 C bis 6 C gelagert. Nach 3 Monaten wird die Lsung verworfen. Zur Entsorgung von berschssigem gesttigtem Bromwasser wir
47、d festes Natriumthiosulfat-Pentahydrat (4.13) hinzugefgt und solange geschwenkt, bis die braune Farbe verschwindet. 4.18 Carrez-Lsung I 10,6 g Kaliumhexacyanoferrat-Trihydrat (II) (4.11) werden in 100 ml Wasser gelst. Die Lsung wird nach 6 Monaten verworfen. 4.19 Carrez-Lsung II 21,9 g Zinkacetat-Di
48、hydrat (4.16) werden in 100 ml Wasser gelst. Die Lsung wird nach 6 Monaten verworfen. 5 Herstellung der Standardlsungen 5.1 Allgemeines Die Standardlsungen werden bevorzugt gravimetrisch hergestellt. Die Tara-Gewichte smtlicher Behlter und die Massen nach jedem Herstellungsschritt werden notiert und
49、 daraus die Konzentrationen der Standards berechnet. Vorausgesetzt, dass die verwendeten Glasgerte EN ISO 1042 (siehe 1) entsprechen, drfen die Standardlsungen auch volumetrisch hergestellt werden. 5.2 Acrylamid-Standardstammlsung, Massenkonzentration etwa 1 000 g/ml. Es werden 0,1 g 0,001 g Acrylamid in einen 100-ml-Messkolben eingewog
