1、1专题七 选考第课时 生物技术实践(选修)点点落实(一) 微生物的利用一过基础1理清微生物培养的基本技术基本技术 过程或类型培养基的制备 计 算 称 量 溶 化 灭 菌 倒 平 板消毒 煮沸消毒法、巴氏消毒法以及使用化学药剂进行消毒无菌技术 灭菌对培养基进行灭菌，常采取高压蒸汽灭菌；对接种环灭菌采取灼烧灭菌；对玻璃器皿灭菌采取干热灭菌平板划线法通过接种环在琼脂固体培养基表面连续划线的操作，将聚集的菌种逐步稀释分散到培养基的表面微生物的纯化技术稀释涂布平板法将菌液进行一系列的梯度稀释，然后将其分别涂布到琼脂固体培养基的表面，聚集在一起的微生物将被分散成单个细胞，从而在培养基表面形成单个菌落倒平板
2、操作 待培养基冷却至 50_左右时，在酒精灯火焰附近倒平板2把握微生物分离与计数的两个实例(1)土壤中分解尿素的细菌的分离与计数筛选菌株：利用选择培养基筛选菌株。测定微生物数量的常用方法：活菌计数法和显微镜直接计数。过程：土壤取样样品稀释微生物的培养与观察。2鉴定方法：含酚红指示剂以尿素为唯一氮源的培养基细菌出现红色透明圈，则该菌能分解尿素。(2)分解纤维素的微生物的分离实验原理：即：可通过是否产生透明圈来筛选纤维素分解菌。流程：土壤取样选择培养梯度稀释涂布平板挑选菌落。二过易错(1)倒平板时，应将打开的皿盖放到一边，以免培养基溅到皿盖上(2015江苏卷，T19B)()(2)某研究小组从有机废
3、水中分离微生物用于废水处理。接种后的培养皿须放在光照培养箱中培养()(3)纯化菌种时，为了得到单菌落，常采用的接种方法有平板划线法和稀释涂布平板法()(4)在琼脂固体培养基上长出的单个菌落含有多种细菌()(5)检测土壤中细菌总数实验操作中，确定对照组无菌后，选择菌落数在 300 以上的实验组平板进行计数()(6)培养微生物的培养基分装到培养皿后进行灭菌()三过高考1(2018全国卷)将马铃薯去皮切块，加水煮沸一定时间，过滤得到马铃薯浸出液。在马铃薯浸出液中加入一定量蔗糖和琼脂，用水定容后灭菌，得到 M 培养基。回答下列问题：(1)M 培养基若用于真菌的筛选，则培养基中应加入链霉素以抑制_的生长
4、，加入了链霉素的培养基属于_培养基。(2)M 培养基中的马铃薯浸出液为微生物生长提供了多种营养物质，营养物质类型除氮源外还有_(答出两点即可)。氮源进入细胞后，可参与合成的生物大分子有_(答出两点即可)。(3)若在 M 培养基中用淀粉取代蔗糖，接种土壤滤液并培养，平板上长出菌落后可通过加入显色剂筛选出能产淀粉酶的微生物。加入的显色剂是_，该方法能筛选出产淀粉酶微生物的原理是_。3(4)甲、乙两位同学用稀释涂布平板法测定某一土壤样品中微生物的数量，在同一稀释倍数下得到以下结果：甲同学涂布了 3 个平板，统计的菌落数分别是 110、140 和 149，取平均值 133；乙同学涂布了 3 个平板，统
5、计的菌落数分别是 27、169 和 176，取平均值 124。有人认为这两位同学的结果中，乙同学的结果可信度低，其原因是_。解析：(1)链霉素是抗生素，可抑制细菌生长，故在 M 培养基中加入链霉素作为选择培养基，可筛选出真菌。(2)培养基中的营养成分一般包括碳源、氮源、水和无机盐等。细胞中含有氮元素的生物大分子有蛋白质、核酸等，故加入的氮源可参与以上物质的合成。(3)能产生淀粉酶的微生物可将淀粉水解成麦芽糖，淀粉遇碘液变蓝，向加有淀粉的培养基中加入碘液后培养基呈现蓝色，产淀粉酶的菌落周围的淀粉被水解，形成透明圈，可根据透明圈的大小判断产生淀粉酶的多少。(4)统计菌落数时，一般选择菌落数在 30
6、300 的平板进行计数，甲同学统计的 3 个平板中的菌落数在正常范围内且差距不大，比较准确；乙同学统计的 3 个平板中，1 个平板的计数结果与另 2 个相差悬殊，结果的重复性差。答案：(1)细菌 选择 (2)碳源、无机盐 蛋白质、核酸(3)碘液 淀粉遇碘液显蓝色，产淀粉酶的菌落周围淀粉被水解，形成透明圈 (4)乙同学的结果中，1 个平板的计数结果与另 2 个相差悬殊，结果的重复性差2(2018江苏高考)酵母的蛋白质含量可达自身干重的一半，可作为饲料蛋白的来源。有些酵母可以利用工业废甲醇作为碳源进行培养，这样既可减少污染又可降低生产成本。研究人员拟从土壤样品中分离该类酵母，并进行大量培养。下图所
7、示为操作流程，请回答下列问题：(1)配制培养基时，按照培养基配方准确称量各组分，将其溶解、定容后，调节培养基的_，及时对培养基进行分装，并进行_灭菌。(2)取步骤中不同梯度的稀释液加入标记好的无菌培养皿中，在步骤中将温度约_(在 25 、50 或 80 中选择)的培养基倒入培养皿混匀，冷凝后倒置培养。(3)挑取分离平板中长出的单菌落，按步骤所示进行划线。下列叙述合理的有4_。a为保证无菌操作，接种针、接种环使用前都必须灭菌b划线时应避免划破培养基表面，以免不能形成正常菌落c挑取菌落时，应挑取多个菌落，分别测定酵母细胞中甲醇的含量d可以通过逐步提高培养基中甲醇的浓度，获得甲醇高耐受株(4)步骤中
8、，为使酵母数量迅速增加，培养过程中需保证充足的营养和_供应。为监测酵母的活细胞密度，将发酵液稀释 1 000 倍后，经等体积台盼蓝染液染色，用2516 型血细胞计数板计数 5 个中格中的细胞数，理论上_色细胞的个数应不少于_，才能达到每毫升 3109个活细胞的预期密度。解析：(1)配制培养基时，进行计算、称量、溶解、定容后，需先调 pH 再分装到锥形瓶中进行高压蒸汽灭菌。(2)倒平板时的培养基温度约为 50 ，冷凝后倒置培养。(3)平板划线时，接种针、接种环使用前和每次划线后都需要进行灼烧灭菌，以免造成杂菌污染；划线时不能划破培养基表面，否则不能形成正常菌落；挑取菌落时，应挑取多个不同的菌落，
9、分别测定酵母细胞中蛋白质含量；逐步提高培养基中甲醇的浓度，能筛选出其中的耐受菌，获得甲醇高耐受的菌株。(4)酵母菌是兼性厌氧型真菌，在有氧条件下可大量繁殖。酵母扩大培养时，需保证充足的营养和氧气等条件。由题中信息“经等体积台盼蓝染液染色”可知，计数室中培养液容积实际只有 0.120.05 (mm3)。设 5 个中方格中无色(活细胞不能被台盼蓝染色)的细胞数目为 x 个，则 3109 x/5251 0001 0000.05，解得 x30(个)。答案：(1)pH 高压蒸汽(湿热) (2)50 (3)a、b、d(4)氧气 无 30规律技法微生物纯化培养的方法比较(1)平板划线操作：2 稀释涂布平板操
10、作：先将菌液进行一系列梯度稀释后涂布平板，在稀释度足够高的菌液里，聚集在一起的微生物将被分散成单个细胞，从而在培养基表面形成单个菌落。如图所示：点点落实(二) 传统发酵技术的应用5一过基础1果酒和果醋的制作2腐乳的制作(1)制作原理(2)实验流程及影响因素3泡菜的制作二过易错(1)夏季生产果酒时，常需对罐体进行降温处理(2018江苏卷，T16A)()(2)在制作果酒的实验中，将葡萄汁液装满整个发酵装置(2018北京卷，T4A)()(3)勤向腐乳坯表面喷水，有利于毛霉菌丝的生长()(4)某研究性学习小组以樱桃番茄为材料进行果酒、果醋发酵实验。先供氧进行果醋发酵，然后隔绝空气进行果酒发酵()(5)
11、在制作果醋时，如果条件适宜，醋酸菌可将葡萄汁中的糖分解成醋酸()6(6)在家庭中用鲜葡萄制作果酒时，让发酵装置接受光照并放在 45 处()(7)在制作腐乳时，将长满毛霉的豆腐装瓶腌制时，底层和近瓶口处需加大用盐量()(8)泡菜腌制利用了乳酸菌的乳酸发酵()三过高考1现代生物技术与我们的生活息息相关，且给人类的生活带来了重大的变化，依据所学的现代生物技术知识，回答下列有关问题：(1)果酒制作离不开酵母菌，酵母菌是_型微生物，其最适生长温度约为_，在利用葡萄自然发酵生产果酒的过程中，未经杀菌，但绝大多数其他杂菌却不能生长的原因是_。(2)在制作腐乳、果醋、泡菜的过程中需要氧气的是_，腐乳生产过程中
12、有多种微生物参与，其中起主要作用的是_，加盐腌制的目的是_。(3)微生物的实验室培养技术中，虽然各种培养基的具体配方不同，但一般都含有_，微生物接种的方法很多，最常用的是_和_。解析：(1)酵母菌在氧气充足时进行有氧呼吸，无氧时能进行生成酒精的无氧呼吸，属于兼性厌氧型微生物，最适生长温度为 20 左右。在缺氧、呈酸性的发酵液中，酵母菌可以生长繁殖，而绝大多数其他微生物会因无法适应这一环境而受到抑制。(2)腐乳制作过程中主要利用毛霉，果醋制作过程中主要利用醋酸菌，它们都是需氧微生物；泡菜制作过程中利用的乳酸菌是厌氧菌。制作腐乳过程中，加盐腌制的主要目的是析出豆腐中的水分，使豆腐块变硬，防止其在后
13、期制作过程中过早酥烂，同时抑制微生物的生长，避免豆腐块变质。(3)虽然各种培养基的具体配方不同，但一般都含有碳源、氮源、水和无机盐。平板划线法和稀释涂布平板法是最常用的微生物接种的方法。答案：(1)兼性厌氧 20 发酵液缺氧、呈酸性(合理即可) (2)腐乳和果醋 毛霉 析出豆腐中的水分，抑制微生物的生长 (3)水、碳源、氮源和无机盐 平板划线法 稀释涂布平板法2(2018包头一模)某生物兴趣小组积极参加当地盛产苹果的乡镇生产苹果酒、苹果醋的调研项目。下面是他们调查之后发现的一系列问题，请回答下列问题：(1)制备高产果酒的酵母菌菌株：秋季的葡萄园中，在_的周围土壤中，酵母菌大量生长繁殖。为测定土
14、壤中酵母菌的数量，一般选用_倍稀释，用_法接种上述所得酵母菌稀释液。7在_的发酵液中，酵母菌能大量生长繁殖，而绝大多数其他微生物都因无法适应这一环境而受到抑制。(2)苹果酒、苹果醋的生产：小组同学在制作果酒的发酵阶段，发酵瓶的瓶盖应_。A一直打开 B打开并盖上一层纱布C定时拧松 D始终拧紧苹果醋生产可在苹果酒生产基础上改变_进行，其发酵温度应_(填“低于”或“高于”)苹果酒的生产。在果醋的制作中，提供碳源的物质主要是_。解析：(1)秋季的葡萄园中，在葡萄成熟落地流出的果汁的周围土壤中，酵母菌大量生长繁殖。为测定土壤中酵母菌的数量，一般选用 102、10 3、10 4倍稀释，用稀释涂布平板法接种
15、上述所得酵母菌稀释液。在缺氧、偏酸性环境中，酵母菌能大量生长繁殖，而绝大多数其他微生物都因无法适应这一环境而受到抑制。(2)小组同学在制作果酒的发酵阶段，发酵瓶的瓶盖应定时拧松，排出二氧化碳。苹果醋生产可在苹果酒生产基础上改变菌种和发酵条件进行，其发酵温度应高于苹果酒的生产。在果醋的制作中，提供碳源的物质主要是葡萄糖或乙醇。答案：(1)葡萄成熟落地流出的果汁 10 2、10 3、10 4 稀释涂布平板 缺氧、呈酸性 (2)C 菌种和发酵条件 高于 葡萄糖或乙醇规律技法控制杂菌的四大措施(1)通过发酵条件控制杂菌。无氧发酵时的无氧环境可以抑制好氧菌。乳酸发酵形成的酸性环境抑制杂菌繁殖。(2)利用
16、盐控制杂菌，如腐乳的制作。(3)利用酒精控制杂菌，如果酒、腐乳的制作。(4)利用香辛料(调味料)控制杂菌，如腐乳、泡菜的制作。 点点落实(三) 生物技术在其他方面的应用一过基础1图解生物技术在其他方面的应用82归纳 DNA 粗提取与鉴定的“五个步骤”3比较植物有效成分提取的三种方法物质 方法 原理 步骤玫瑰精油 水蒸气蒸馏法利用水蒸气将挥发性较强的植物芳香油带出来水蒸气蒸馏分离油层(加NaCl)除水过滤(加无水Na2SO4)橘皮精油 压榨法通过机械加压，压榨出果皮中的芳香油石灰水浸泡、漂洗压榨、过滤、静置再次过滤胡萝卜素 萃取法使提取物溶解在有机溶剂中，蒸发后得到提取物粉碎、干燥萃取、过滤浓缩
17、二过易错(1)鉴定 DNA 时，将粗提产物与二苯胺混合后进行沸水浴(2018北京卷，T4B)()(2)用不同浓度的 NaCl 溶液反复溶解与析出 DNA 可去除蛋白质()(3)薄荷油是挥发性物质，提取薄荷油时应选用干薄荷叶做原料，可采用水蒸气蒸馏法提取()(4)用萃取法提取胡萝卜素的主要步骤是：干燥、粉碎、萃取、浓缩、过滤()(5)在胡萝卜颗粒的加热干燥过程中，温度过高和时间过长会导致胡萝卜素分解()(6)提取的胡萝卜素可通过纸层析法进行鉴定，在鉴定过程中不需要对照()9三过高考1某生物兴趣小组开展 DNA 粗提取的相关探究活动，具体步骤如下：材料处理：称取新鲜的菜花、辣椒和蒜黄各 2 份，每
18、份 10 g。剪碎后分成两组，一组置于 20 C，另一组置于20 C 条件下保存 24 h。DNA 粗提取：第一步：将上述材料分别放入研钵中，各加入 15 mL 研磨液，充分研磨。用两层纱布过滤，取滤液备用。第二步：先向 6 只小烧杯中分别注入 10 mL 滤液，再加入 20 mL 体积分数为 95%的冷酒精溶液，然后用玻璃棒缓缓地向一个方向搅拌，使絮状物缠绕在玻璃棒上。第三步：取 6 支试管，分别加入等量的 2 mol/L NaCl 溶液溶解上述絮状物。DNA 检测：在上述试管中各加入 4 mL 二苯胺试剂，混合均匀后，置于沸水中加热 5 min，待试管冷却后比较溶液的颜色深浅，结果如下表：
19、材料保存温度 菜花 辣椒 蒜黄20 C 20 C 注：“”越多表示蓝色越深。分析上述实验过程，回答下列问题：(1)该探究性实验的课题名称是_。(2)第二步中缓缓地搅拌，这是为了减少_。(3)根据实验结果，得出结论并分析。结论 1：与 20 C 相比，相同实验材料在20 C 条件下保存，DNA 的提取量较多。结论 2：_。针对结论 1，请给出合理的解释：_。(4)氯仿密度大于水，能使蛋白质变性沉淀，与水和 DNA 均不相溶，且对 DNA 影响极小。为了进一步提高 DNA 纯度，依据氯仿的特性，在 DNA 粗提取第三步的基础上继续操作的步骤是：_，然后用体积分数为 95%的冷酒精溶液使 DNA 析
20、出。答案：(1)探究不同材料和不同保存温度对 DNA 提取量的影响 (2)DNA 断裂 (3)等10质量的不同实验材料，在相同的保存温度下，从蒜黄中提取的 DNA 量最多 低温抑制了相关酶的活性，DNA 降解速度慢 (4)将第三步获得的溶液与等量的氯仿充分混合，静置一段时间，吸取上清液2(2019 届高三成都测试)紫甘薯红色素色泽鲜艳自然、无毒、无特殊气味，具有抗突变、抗氧化、缓解肝功能障碍、抗肿瘤、抗高血糖等营养、药理和保健功能，是一种理想的天然食用色素资源。如图是提取紫甘薯红色素的实验流程，请分析回答： 精 选 紫 甘 薯 粉 碎 干 燥 萃 取 过 滤 检 测(1)紫甘薯红色素通常采用萃
21、取法提取，说明紫甘薯红色素具有_的特性，萃取之前需要进行粉碎和干燥处理，说明_和_影响萃取效率。(2)柠檬酸、盐酸、无水乙醇、甲醇都能用于萃取紫甘薯红色素，但是不同溶剂的萃取效率不同，某研究小组用不同溶剂进行萃取，利用分光法测定提取液的吸光值，结果如下表(已知色素提取的吸光值与色素含量呈正相关)，由此可判断提取紫甘薯红色素的最理想的有机溶剂是_，原因是_。也有同学认为 15%不一定是柠檬酸的最佳提取浓度，若要进一步设计实验，以探究柠檬酸的浓度对紫甘薯红色素提取效率的影响，实验时设计思路应为_。溶剂种类 无水乙醇 5%盐酸 10%甲醇 15%柠檬酸 纯水溶液的颜色紫红色 红色 橘色 红色 紫红色
22、吸光值 0.333 0.524 0.232 0.624 0.332解析：(1)能够利用萃取法提取的植物有效成分通常是易溶于有机溶剂的物质，由于萃取时原料颗粒的大小和含水量会影响萃取效率，因此萃取前需将原料进行粉碎和干燥处理。(2)分析表格内容可知，提取紫甘薯红色素的几种溶剂中最理想的是柠檬酸，因为用柠檬酸作提取剂时提取液的吸光值最大，说明提取到的色素最多；也有同学认为 15%不一定是柠檬酸的最佳提取浓度，若要进一步设计实验，以探究柠檬酸的浓度对紫甘薯红色素提取效率的影响，实验设计时应以柠檬酸浓度为自变量，设计一组具有浓度梯度的柠檬酸溶液，利用同样的提取方法进行提取，比较各组提取液的吸光值，以确
23、定柠檬酸作为提取剂的最佳浓度。答案：(1)易溶于有机溶剂 原料颗粒的大小 含水量 (2)柠檬酸 用柠檬酸作提取剂时提取液的吸光值最大，说明提取到的色素最多 设计一组具有浓度梯度的柠檬酸溶液，11利用同样的提取方法进行提取，比较各组提取液的吸光值规律技法植物有效成分提取应注意的五个关键点(1)水蒸气蒸馏过程中可用明火加热，萃取过程应该避免明火加热，采取水浴加热，这是因为有机溶剂都是易燃物，直接用明火加热容易引起燃烧、爆炸。(2)在用水蒸气蒸馏法制取玫瑰精油的过程中，油水混合物中要加入 NaCl 的目的是增大水的密度，有利于玫瑰精油与水的分层。加入无水 Na2SO4的目的是吸收精油中残留的水分。(
24、3)蒸馏时若温度太高，时间太短，产品品质较差，若提高产品品质，可适当延长蒸馏时间。(4)橘皮压榨前，可在石灰水中浸泡 10 h 以上，既防止压榨时滑脱，提高出油率，又不会在过滤时堵塞筛眼。(5)萃取时一般来说原料颗粒小，萃取温度高，时间长，则提取的物质能够充分溶解，萃取效果较好。 提 能 增 分 检 测 课堂巩固落实1(2018全国卷)在生产、生活和科研实践中，经常通过消毒和灭菌来避免杂菌的污染。回答下列问题：(1)在实验室中，玻璃和金属材质的实验器具_(填“可以”或“不可以”)放入干热灭菌箱中进行干热灭菌。(2)牛奶的消毒常采用巴氏消毒法或高温瞬时消毒法，与煮沸消毒法相比，这两种方法的优点是
25、_。(3)密闭空间内的空气可采用紫外线照射消毒，其原因是紫外线能_。在照射前，适量喷洒_，可强化消毒效果。(4)水厂供应的自来水通常是经过_(填“氯气” “乙醇”或“高锰酸钾”)消毒的。(5)某同学在使用高压蒸汽灭菌锅时，若压力达到设定要求，而锅内并没有达到相应温度，最可能的原因是：_。解析：(1)干热灭菌是指将物品放入干热灭菌箱内，在 160170 条件下加热 12 h。能耐高温、需要保持干燥的物品，如玻璃器皿(吸管、培养皿)和金属用具等，可采用干热灭菌的方法。(2)巴氏消毒法是在 7075 条件下煮 30 min 或在 80 条件下煮 15 12min，可以杀死牛奶中的微生物，并且使牛奶的
26、营养物质损失较少。(3)接种室、接种箱或超净工作台在使用前，可以用紫外线照射 30 min，紫外线能破坏微生物的 DNA 结构，从而杀死物体表面或空气中的微生物。在照射前，适量喷洒石炭酸或煤酚皂溶液等消毒液，可以强化消毒效果。(4)自来水通常是用氯气进行消毒的。(5)在使用高压蒸汽灭菌锅时，若压力达到设定要求，而锅内并没有达到相应温度，最可能的原因是锅内原有的冷空气没有排尽。答案：(1)可以 (2)在达到消毒目的的同时，营养物质损失较少 (3)破坏 DNA 结构 消毒液 (4)氯气 (5)未将锅内冷空气排尽2(2019 届高三张掖诊断)发酵工业起源很早，中国早在公元前 22 世纪就采用发酵法酿
27、酒，然后开始制酱、制醋、制腐乳等，请回答下列问题：(1)酿酒主要依赖于酵母菌，酒精是在酵母菌细胞的_中产生的。(2)在腐乳发酵过程中起作用的主要是毛霉，其产生的_(填酶名称)能把豆腐中的大分子有机物分解为多种小分子有机物，使腐乳味道鲜美。腐乳发酵过程中，主要依赖于_等物质来防腐。(3)制作泡菜时，泡菜坛口要用水密封，目的是_。从开始制作到泡菜品质最佳这段时间内，泡菜叶逐渐变酸，泡菜坛中乳酸菌和其他杂菌的消长规律是_，原因是_。解析：(1)酿酒主要利用的是酵母菌的无氧呼吸，酒精是在酵母菌的细胞质基质中产生的。(2)在腐乳发酵过程中起作用的主要是毛霉，毛霉可以产生蛋白酶和脂肪酶，其中蛋白酶能将豆腐
28、中的蛋白质分解成小分子的多肽和氨基酸，脂肪酶能将脂肪分解成甘油和脂肪酸，从而使腐乳味道鲜美。在制作腐乳过程中，主要依靠食盐和酒精等物质来进行防腐。(3)制作泡菜时，泡菜坛口要用水密封，目的是创造无氧环境，有利于乳酸发酵。从开始制作到泡菜品质最佳这段时间内，泡菜叶逐渐变酸，泡菜坛中乳酸菌数量会增多，而其他杂菌数量减少，主要原因是乳酸菌比杂菌更能适应酸性环境。答案：(1)细胞质基质 (2)蛋白酶和脂肪酶 食盐和酒精 (3)创造无氧环境，利于乳酸发酵 乳酸菌数量增多，杂菌数量减少 乳酸菌比杂菌更能适应酸性环境3饲养动物常用的植物饲料中含有难溶的植酸钙等物质，很难被动物吸收利用，还影响对其他营养物质的
29、利用。若在饲料中添加植酸酶，则能催化其水解为可以吸收利用的磷酸盐等。以下是科研人员从作物根部土壤中分离产植酸酶菌株的过程示意图。请分析回答下列问题：13(1)分离产植酸酶的菌株，需先配制合适的培养基。配制培养基时，在各成分都溶化后和分装前，要进行的是_和灭菌。对培养基进行灭菌的常用方法是_。(2)接种以前进行的一系列稀释操作，目的是在固体培养基表面形成_。这种接种方法是_。根据土壤样品的稀释倍数和接种稀释液的体积，统计平板上的_就能大致推测出样品中的活菌数。如果一培养基上平均有 3 个菌落，则 1 g 土壤中大致的活菌数量是_个。(3)由于植酸钙的不溶解性，使培养基中形成白色浑浊。产植酸酶的菌
30、株会水解植酸钙，菌落的周围将形成透明的区域，根据透明区域的有无，可初步判断该菌是否产植酸酶。实验结果显示 AE 五种菌株中，_是产植酸酶最理想的菌株。(4)植酸酶的活力可用_的量来表示。解析：(1)分离产植酸酶的菌株，需先配制合适的培养基，配制好的培养基要先调整pH 再灭菌，常用的灭菌方法是高压蒸汽灭菌。(2)接种以前进行的一系列稀释操作，表明该接种方法为稀释涂布平板法，目的是在培养基表面形成单个菌落。根据土壤样品的稀释倍数和接种稀释液的体积，统计平板上的菌落数就能大致推测出样品中的活菌数；如果按题中处理后，统计的平板上平均有 3 个菌落，则 1 g 土壤中大致的活菌数量30.110 5310
31、 6(个)。(3)分析题图可知，菌落 E 周围的透明圈最大，是产植酸酶的理想菌株。(4)植酸酶的活力可用单位时间单位体积内底物消耗的量或产物产生的量来表示。答案：(1)调整 pH 高压蒸汽灭菌法 (2)单个菌落 稀释涂布平板法 菌落数 3106 (3)E (4)单位时间单位体积内底物消耗(或产物产生)4葡萄种类较多，为了满足不同人群对葡萄的需求，可以将葡萄加工制作成果汁、果酒、果醋等。下面是简单的生产果汁、果酒、果醋的流程。结合所学知识，回答下列问题：(1)葡萄的皮、籽中含有原花青素和大量具有葡萄风味的物质等，这些物质易溶于乙醇14和乙酸乙酯，因此，常采用_的方法来分离提取。(2)生产果汁的时
32、候，果汁出现浑浊的主要原因是果汁中含有_，该物质还会影响水果的_。为了提高果汁的产量，节约成本，生产果汁时需要控制好_。(3)在葡萄酒的自然发酵过程中，起主要作用的微生物是_。若想对初步筛选得到的酵母菌进行纯化并计数，可采用的接种方法是_。(4)若葡萄汁中含有醋酸菌，在葡萄酒发酵旺盛时，醋酸菌能否将酒精转变成醋酸？_，原因是_。解析：(1)根据题意分析可知，题述物质易溶于乙醇和乙酸乙酯，因此常采用萃取的方法来分离提取。(2)果胶是植物细胞壁以及胞间层的主要组成成分之一，在果汁加工中，果胶不仅会影响出汁率，还会使果汁浑浊。果胶酶能分解果胶，瓦解植物的细胞壁及胞间层，使榨取果汁变得更容易，在生产果
33、汁时，为了提高果汁的产量，节约成本，需要控制好果胶酶的使用量。(3)在葡萄酒的自然发酵过程中，起主要作用的微生物是附着在葡萄皮上的野生型酵母菌。若想对初步筛选得到的酵母菌进行纯化并计数，可采用的接种方法是稀释涂布平板法。(4)在葡萄酒发酵旺盛时是无氧条件，而醋酸菌是好氧菌，该时期的无氧条件会抑制醋酸菌的生长，所以醋酸菌不能将酒精转变成醋酸。答案：(1)萃取 (2)果胶 出汁率 果胶酶的用量(3)(附着在葡萄皮上的野生型)酵母菌 稀释涂布平板法 (4)不能 醋酸菌是好氧菌，葡萄酒发酵旺盛时的无氧条件会抑制醋酸菌的生长5某大学的科研人员选用新疆伊犁地区野生薄荷为原料，研究薄荷精油的提取方法。如图为
34、提取流程简图，请分析回答下列问题：(1)薄荷精油主要分布在薄荷的_(填“花” “叶”或“种子”)中。(2)提取过程中，选择阴干的方式及控制粉碎时温度都是为了防止薄荷精油在高温条件下氧化和_。(3)选择萃取剂时，应主要考虑萃取剂的_和_。萃取的最佳时间可通过设置_来摸索。用于萃取的有机溶剂必须事先精制，除去_，否则会影响薄荷精油的质量。萃取完成后，将过滤得到的滤液进行低温(40 )蒸馏并收集浓缩液，为了除去浓缩液中的水分，常需向浓缩液中加入_。(4)除了上述用到的方法外，提取植物芳香油的方法还有_。解析：(1)薄荷精油主要分布在薄荷的叶中。(2)薄荷精油在高温条件下易挥发，故提15取过程中应选择
35、阴干的方式及控制粉碎时温度。(3)选择萃取剂时，应主要考虑萃取剂的性质和使用量。萃取的最佳时间可通过设置对照实验来摸索。用于萃取的有机溶剂必须事先精制，除去杂质，否则会影响薄荷精油的质量。萃取完成后，将过滤得到的滤液进行低温(40 )蒸馏并收集浓缩液，为了除去浓缩液中的水分，常需向浓缩液中加入无水硫酸钠，再过滤除去。(4)提取植物芳香油的方法还有蒸馏法和压榨法。答案：(1)叶 (2)挥发(蒸发) (3)性质 使用量 对照实验 杂质 无水硫酸钠 (4)蒸馏法和压榨法6茶饮料主打“健康牌” ，极少添加人工合成的色素、香精等添加剂，更多利用从植物中提取的天然成分。请回答下列问题：(1)红茶菌液是一种
36、传统的活菌饮料，由酵母菌、醋酸菌和乳酸菌共同发酵产生。纯化菌种时，在样品稀释和涂布平板步骤中，下列选项不需要的是_(填序号：酒精灯 培养皿 显微镜 无菌水)。稀释的目的是_。(2)茶饮料所用的胡萝卜素，通常采用_法从胡萝卜中提取；提取后常用_法对提取物中的胡萝卜素进行鉴定。(3)茶饮料所用的植物芳香油，如茉莉油的提取流程如下：茉莉花水过程 A油水混合物油层分离与粗提取过程 B过滤茉莉油。过程 A 表示_，过程 B 表示向粗提精油中加入_，目的是_。(4)若生产过程中一批茶饮料被大肠杆菌污染，可以通过滤膜法测定饮料中大肠杆菌的数目，涉及的试剂和显色反应分别为_。A酚红、红 B伊红美蓝、黑C对氨基
37、苯磺酸、玫瑰红 D刚果红、红解析：(1)纯化菌种时，在样品稀释和涂布平板步骤中，用不到显微镜。稀释的目的是便于微生物的分离与计数。(2)通常采用萃取法提取胡萝卜素，采用纸层析法对胡萝卜素进行鉴定。(3)茉莉油的提取采用的是水蒸气蒸馏法，过程 A 为水蒸气蒸馏，过程 B 需加入无水硫酸钠以去除水分。(4)鉴别大肠杆菌常用的试剂为伊红美蓝，用加入这两种试剂的培养基培养大肠杆菌，会出现黑色的菌落。答案：(1) 便于微生物的分离与计数 (2)萃取 纸层析 (3)水蒸气蒸馏 无水硫酸钠 去除水分 (4)B课下检测过关1(2019 届高三北京海淀模拟)某校课外兴趣小组对某种品牌的酸奶中乳酸菌的数量进行了测
38、定。取 6 支灭菌的试管，分别加入 9 mL 灭菌的生理盐水，编号为B1、 B2、B 3、B 4、B 5、B 6；吸取 1 mL 酸奶样液加入试管 B1中，混合均匀；然后另取一支吸管从 B1中吸取 1 mL 溶液，加入 B2中，依次类推，最后从试管 B6中取 0.1 mL 样液进行涂布16计数，涂布三个平板，其菌落数分别为 251、265、276 个。请回答下列问题：(1)乳酸是乳酸菌_呼吸的产物，进行的场所是_。(2)制备乳酸菌的培养基过程中，对培养皿灭菌的常用方法是_。平板冷凝后，倒置的目的是_。(3)该兴趣小组对乳酸菌接种所采用的方法是_。根据三个平板中的菌落数，可推测原酸奶中乳酸菌的浓
39、度为_个/mL，该方法测定的乳酸菌的含量和实际值相比，一般_(填“偏大”或“偏小”)。(4)为了使测量的结果更加准确，对照组的设置应该是_。解析：(1)乳酸是乳酸菌进行无氧呼吸的产物，无氧呼吸的场所是乳酸菌细胞的细胞质基质。(2)制备培养基过程中，对培养皿灭菌的常用方法是干热灭菌法，对培养基常用的灭菌方法是高压蒸汽灭菌法。平板冷凝后，将平板倒置的目的是防止培养皿盖上凝结的水珠落入培养基中造成污染，同时也可以避免培养基中的水分过快地挥发。(3)根据题干的操作步骤可推知，得到的是 101、10 2、10 3、10 4、10 5、10 6倍的稀释液。从试管 B6中取 0.1 mL样液进行涂布计数，三个平板中菌落数分别为 251、265、276 个，可推测原酸奶中乳酸菌的浓度为(251265276)31010 6
