1、AFNL NF X4L-508 56 m LOL237Z 0382374 368 m NORME FRANAISE NF PROTECTION MTHODE RAPIDE POUR rechercher ainsi la dose de ce produit donnant les mmes rsultats dans le mm temps. Le rapport de cette dose avec celle du produit talon peut tre considr comme tant sensiblement celui existant entre les pouvoir
2、s insecticides propres des deux produits considrs. MATRIEL OPERATOIRE MATRIEL BIOLOGIQUE : Insectes utiliss : Calandra granaria L. (Charanon des grains) adultes, clos dlevage depuis une semaine au moins et un mois au plus. Nutiliser pour un mme essai que des insectes ayant peu prs le mme ge, prlevs
3、tous dans les botes contamines le mme jour. Elevage des insectes a) Cages : Botes mtalliques de I3 cm de diamtre sur I O cm de hauteur, fermes par un couvercle muni dune grande ouverture grillage avec une toile mtallique fine pour permettre une bonne aration. Une petite ouverture grillage dans le fo
4、nd de la bote serait galement re- commandable quoique non indispensable. II est ncessaire demployer une toile mtallique et non une mousseline, car celle-ci serait perce facilement par les charanons qui pourraient alors schapper. b) Milieu dlevage : Grains de bl. Eviter lemploi de bl de mauvaise qual
5、it, notamment de bls chauds qui ne permettent pas une bonne production, les larves ne se dveloppant pas dans les grains trop petits et mal forms. Avant emploi, le bl sera dsinsectis au sulfure de carbone: ainsi seront dtruites les larves des autres insectes des grains et notamment les larves de Cala
6、ndra granaria parasites qui pourraient se trouver dans le grain et apporteraient ainsi des parasites dans llevage. Chaque bote reoit environ 500 g de bl, rparti sur une paisseur de 5 cm qui assure une ara- tion satisfaisante de tout le milieu. I- - - - a u u.- AFNOR, /-% Homologue le 3 I octobre I9
7、56 J. O. d 15- 1-57 0; i- O .w I925 Hemmer16 Petit et W,- I 1-56 NF X 41-508 lTIRAGE 1-57 - AFN1 NF X41-508 56 1012372 0382175 2T4 W c) Contamination : Chaque bote est contamine avec environ 200 adultes de Calandra granaria prlevs dans un levage en dbut de production pour tre certain davoir des feme
8、lles nayant pas encore pondu. On vitera les individus anormaux et surtout les autres espces (Calandra oryzae notamment). La date de la conta- mination est alors porte sur la bote qui est place en un lieu peu clair et dans les conditions de temp- rat u re et d h u m id i t favorables. d) Conditions a
9、tmosphriques : Les conditions optima de dveloppement de Calandra granaria sont une temprature de I8 OC 22 OC et une humidit relative de 70 80 %. .Toutefois, lair seul doit tre humide et les grains ne doivent jamais tre mouills. e) Dure de dveloppement : Aux conditions ci-dessus, le dveloppement de l
10、insecte demande environ deux mois et demi. Chaque bote produit 3 O00 4 O00 Calandra f) Rcolte des insectes : Calandra granaria, tant nettement lucifuge, se chasse aisment du grain par la lumire. Pour cela, le contenu dune bote en production est vers sur une tle rebords spciale, en aiumi- nium poli (
11、pour empcher les insectes de schapper par les bords)et expos la lumire. Les insectes sortent du grain et se dirigent du ct oppos celui de lasource lumineuse o il est facile de les avec un pinceau plat et doux pour les faire tomber dans un rcipient quelconque. g) Note : Ce procd dlevage prsente de no
12、mbreux avantages. Le grain est utilis entirement par une seule gnration. On obtient ainsi au bout dun temps connu et invariable (en maintenant les conditions favorables) un grand nombre dinsectes tous du mme ge, quelques jours prs. Le fait dutiliser de petits rcipients hermtiques, empche galement le
13、 dveloppement des Hymnoptres parasites et des divers insectes commensaux qui ne peuvent pas sintroduire lintrieur, ni y tre intoduits, puisquon ne va contaminer les botes quavec des Calandra adultes et sur du bl dsinsectis. Pour avoir une production continue dinsectes, il suffit de contaminer une ou
14、 plusieurs botes chaque semaine. Aprs la rcolte des insectes qui peut se faire pendant un mois, la bote est vide et nettoye. APPAREILLAGE : - Botes de Ptri, NF B 35-204 Dans le cas dessais de produits prsentant une forte tension de vapeur, le couvercle des botes de Ptri doit tre perc dun trou dau mo
15、ins 3 cm de diamtre: ce trou est recouvert dun tissu blutant afin de prvenir les vasions dinsectes. - Tour de pulvrisation : Cette tour est compose essentiellement dun cylindre vertical en verre ou matire plastique transparente pouvant recevoir sa partie infrieure une demi-bote de Ptri, et portant l
16、a partie suprieure une buse datcmisation qui est branche sur une bouteille dair comprim munie dun dtendeur et dun manomtre. ou : cloche poudrages, dans laquelle les produits pulvrulents sont disperss par un jet dair comprim. La tour de pulvrisation ou la cloche poudrages doit tre talonne pour connat
17、re la quantit de produit - Pipette deux traits de I ml ou de 5 ml dpose sur chaque bote de Ptri. ou balance sensible 0,001 g, selon le cas. PRISES DESSAIS Produits solubles : par bote de Ptri, 5 ml de solution mesurs la pipette deux traits. Produits mulsionnables et poudres mouillables : par bote de
18、 Ptri, I ml dmulsion ou de suspension mesur la pipette deux traits. Produits pulvrulents employer sec : par bote de Ptri, O, I g f 0,OO I g de poudre. MODE OPRATOIRE Ralisation des dpts insecticides : Prparer des solutions, mulsions, suspensions ou poudres selon le cas, contenant des concentrations
19、croissantes du produit comparer linsecticide talon. Pour chaque concentration, appliquer une couche uniforme de produit sur deux botes de Ptri. Pour cela, pulvriser dans la.tour de pulvrisation ou disperser dans la cloche poudrages une prise dessai (voir ci-dessus) pour chacune des deux botes. - - _
20、 - AFNL NF X4L-508 56 LO12372 038217b 130 W -3- NF X 41-508 e Laisser ensuite les botes ouvertes lair libre pendant trois heures de faon permettre le schage des dpts. Noter, avec un crayon gras spcial, sur chaque bote lindication du produit et de la dose. Effectuer de la mme faon un dpt sur deux bot
21、es de Ptri avec le produit tmoin. Introduction des insectes : On introduit I O0 charanons dans chaque bote. Ces insectes, obtenus par la mthode dlevage dcrite ci-dessus, sont choisis parmi ceux clos depuis une semaine au moins et un mois au plus. II est indispensable de nutiliser, dans un mme essai,
22、 que des charanons peu prs de mme ge, donc prlevs tous dans la ou les botes contamines le mme jour. Pour des essais de (petit tube en verre emmanch) jauge I O0 charanons vivants, en oprant comme sil sagissait de graines ou dune poudre. Avec un peu dhabitude, on arrive rapidement introduire rgulireme
23、nt une centaine dinsectes par bote avec une erreur ne dpassant pas 5 yo. Lorsquon emploie cette mthode, il ne faut pas tenir compte, dans les relevs, de diffrences de mortalit entre produits inf- rieures I O yo. Les botes contenant les insectes sont alors places lobscurit, dans un local dont la temp
24、rature est constante et de lordre de 20 OC. Cas dun produit forte tension de vapeur : Dans ce cas les botes de Ptri utilises doivent avoir leur couvercle perc dun trou recouvert dun tissu blutant. Relev des rsultats : Les rsultats les plus significatifs sont obtenus lorsque le produit talon donne en
25、tre 25 % et 75 % dinsectes morts aprs vingt-quatre heures (choisir les doses en consquence). On compte dans chaque bote : lo les insectes normaux, 20 les insectes intoxiqus (insectes incapables de se dplacer mais encore sensibles et capables de 30 les insectes morts (sont considrs comme tels les ins
26、ectes sans raction). mouvements), EXPRESSION DES RESULTATS Effectuer pour chaque concentration la somme (nombre dinsectes morts + nombre dinsectes intoxiqus). Rechercher la plus faible concentration pour laquelle cette somme est gale ou suprieure la mme somme Soient A cette concentration et B celle
27、du produit tmoin. Le rapport - peut tre considr comme tant sensiblementfle rapport existant entre les pouvoirs insec- . effectue pour le produit tmoin. A B ticides propres des deux produits. III - RECHERCHE DE LA DOSE LETHALE so PRINCIPE Rechercher la dose de produit provoquant la mort den moyenne c
28、inquante charanons par bote de Ptri. MATE RI EL OPRATOI RE MATERIEL BIOLOGIQUE : Voir page I, 20 Ptes alimentaires. APPAREILLAGE : I O Voir page 2. PRISES DESSAIS Voir ci-dessus page 2. AFNL NF X41-508 56 = 1012372 0382177 077 NF X 41-508 -4- MODE OPRATOIRE Ralisation des dpts insecticides : Etablir
29、 de la mme faon que ci-dessus une chelle de concentrations avec le produit essayer. Pour chaque concentration, effectuer de la mme faon que ci-dessus des dpts sur cinq botes de Ptri. Lapplication des produits est toujours effectue par pulvrisation de solutions. Le produit ltude est pris des doses pr
30、oportionnellement beaucoup plus faibles que prcdemment et le maximum de soins est apport au nettoyage de la verrerie et la rgularit des pulvrisations. On effectue 4 ou 5 rptitions par dose. Introduction des insectes : Voir ci-dessus. Ne pas utiliser lintroduction avec une mesure . Les charanons sont
31、 toujours introduits raison de I O0 par bote. Dans chaque bote est plac un fragment de pte alimentaire permettant aux insectes non intoxiqus de se nourrir. Des botes tmoins non traites doivent tre prvues dans chaque srie dessais. Conduite des essais;: 2 OC et lobscurit pendant une semaine. Aprs ce t
32、emps, on ne doit encore avoir aucune mortalit dans les lots tmoins o les insectes ont cribl de trous les ptes alimentaires. On effectue alors le comptage des insectes morts ou nette- ment intoxiqus et incapables de se dplacer, dans les botes traites. Les botes contenant les insectes sont conserves t
33、emprature constante de 20 OC EXPRESSION DES RSULTATS Tracer la courbe de mortalit (pour chaque bote de Ptri, nombre dinsectes morts ou incapables de se En dduire la masse de produit actif provoquant la mort ou une importante intoxication de 50% des dplacer) en fonction de la masse de produit actif d
34、pos. charanons. IV - RECHERCHE DE LINDICE DE TOXICIT Rechercher en mme temps la dose lthale 50 de linsecticide essayer et dun insecticide talon. Lindice de toxicit de linsecticide essay par rapport linsecticide talon est : Dose lthale 50 de linsecticide talon Dose lthale 50 de linsecticide essay I O
35、0 Connaissant lindice de toxicit dun produit A par rapport un talon B, son indice de toxicit par rapport un autre talon C est : Indice de toxicit de A par rapport B x indice de toxicit de B par rapport C I O0 V - PROCS-VERBAL DESSAIS Le procs-verbal dessais doit indiquer les rsultats obtenus pour le
36、ssai effectu. Dans le cas de la compa- raison de deux produits, il doit indiquer avec prcision le produit tmoin (nature, concentration, masse de produit actif par bote de Ptri), ainsi que pour chaque bote de Ptri dune part le nombre dinsectes morts, dautre part le nombre dinsectes intoxiqus. Dans le
37、 cas de la recherche de la dose lthale 50, il doit tre fait mention du rsultat obtenu sur les botes de Ptri servant de tmoins. Le procs-verbal dessais doit indiquer en outre tous les dtail du mode opratoire, facultatifs (mode de ralisation des dpts sur les botes de Ptri, masse de produit actif sur chaque bote de Ptri, ge des adultes utiliss.), ou non prvus dans la norme, ainsi que tous les incidents ventuels survenus au cours des essais et pouvant avoir eu une action sur les rsultats.
