1、Numro de rfrence ISO 15303:2001(F) ISO 2001 NORME INTERNATIONALE ISO 15303 Premire dition 2001-09-15 Corps gras dorigines animale et vgtale Dtection et identification dun contaminant organique volatil par CPG/SM Animal and vegetable fats and oils Detection and identification of a volatile organic co
2、ntaminant by GC/MSISO 15303:2001(F) PDF Exonration de responsabilit Le prsent fichier PDF peut contenir des polices de caractres intgres. Conformment aux conditions de licence dAdobe, ce fichier peut tre imprim ou visualis, mais ne doit pas tre modifimoins que lordinateur employcet effet ne bnficie
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5、t t prises pour garantir lexploitation de ce fichier par les comits membres de lISO. Dans le cas peu probable o surviendrait un problme dutilisation, veuillez en informer le Secrtariat central ladresse donne ci-dessous. ISO 2001 Droits de reproduction rservs. Sauf prescription diffrente, aucune part
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7、e postale 56 CH-1211 Geneva 20 Tel. + 41 22 749 01 11 Fax. + 41 22 749 09 47 E-mail copyrightiso.ch Web www.iso.ch Imprim en Suisse ii ISO 2001 Tous droits rservsISO 15303:2001(F) ISO 2001 Tous droits rservs iii Sommaire Page Avant-proposiv 1 Domaine dapplication.1 2R frence normative .1 3 Principe.
8、2 4R actifs .2 5 Appareillage .2 6 Mode opratoire.3 6.1 Prparation de ltalon et du blanc 3 6.2 Prparation des talons internes.3 6.3 Prparation de lchantillon pour analyse 3 6.4 Dosage par chromatographie en phase gazeuse et spectromtrie de masse (CPG/SM) 4 6.5 Identification.4 7 Calcul et expression
9、 des rsultats.4 7.1 Calcul 4 7.2 Expression des rsultats 5 8F i d lit 5 8.1 Essais interlaboratoires 5 8.2 Rptabilit.5 8.3 Reproductibilit5 Annexe A (informative) Rsultats des essais interlaboratoires .6 Bibliographie .10ISO 15303:2001(F) iv ISO 2001 Tous droits rservs Avant-propos LISO (Organisatio
10、n internationale de normalisation) est une fdration mondiale dorganismes nationaux de normalisation (comits membres de lISO). Llaboration des Normes internationales est en gnral confiea u x comits techniques de lISO. Chaque comit membre intress par une t u d eal ed r o i td ef a i r ep a r t i ed uc
11、 o m i t technique cr cet effet. Les organisations internationales, gouvernementales et non gouvernementales, en liaison avec lISO participent galement aux travaux. LISO collabore troitement avec la Commission lectrotechnique internationale (CEI) en ce qui concerne la normalisation lectrotechnique.
12、Les Normes internationales sont rdiges conformment aux rgles donnes dans les Directives ISO/CEI, Partie 3. Les projets de Normes internationales adopts par les comits techniques sont soumis aux comits membres pour vote. Leur publication comme Normes internationales requiert lapprobation de 75 % au m
13、oins des comits membres votants. Lattention est appele sur le fait que certains des lm e n t sd el ap r sente Norme internationale peuvent faire lobjet de droits de proprit intellectuelle ou de droits analogues. LISO ne saurait tre tenue pour responsable de ne pas avoir identifi de tels droits de pr
14、oprit et averti de leur existence. La Norme internationale ISO 15303 a t laborep a rl ec o m i t technique ISO/TC 34, Produits alimentaires, sous-comit SC 11, Corps gras dorigines animale et vgtale. Lannexe A de la prsente Norme internationale est donne uniquement titre dinformation.NORME INTERNATIO
15、NALE ISO 15303:2001(F) ISO 2001 Tous droits rservs 1 Corps gras dorigines animale et vgtale Dtection et identification dun contaminant organique volatil par CPG/SM 1 Domaine dapplication La prsente Norme internationale spcifie une mthode pour la dtection et lidentification dun contaminant organique
16、volatil dans les huiles comestibles. Elle est applicable lidentification des produits chimiques industriels volatils dans les huiles comestibles tant brutes que raffines suspectes dtre contamines. Elle permet galement la dtermination de la concentration du contaminant. La prsente Norme international
17、e nest pas applicable la dtermination de la concentration des produits chimiques qui peuvent ragir avec lhuile comestible ou avec lun de ses constituants naturels. Dans ce cas, il est quelquefois possible de dterminer la prsence du contaminant par une analyse qualitative. La prsente Norme internatio
18、nale nest pas non plus applicable aux produits chimiques non volatils. La prsente mthode a t reconnue comme pouvant sappliquer lidentification des composs appartenant aux classes suivantes: hydrocarbures satursh al o g ns; hydrocarbures non satursh al o g ns; esters; aldhydes; alcools; amines; ctone
19、s; thers; composs cycliques et aromatiques; compossaz ot s; acrylates; etc. La mthode a t teste pour des concentrations comprises entre 1 mg/kg et 10 mg/kg. 2R frence normative Le document normatif suivant contient des dispositions qui, par suite de la rfrence qui y est faite, constituent des dispos
20、itions valables pour la prsente Norme internationale. Pour les rfrences dates, les amendements ultrieurs ou les rvisions de ces publications ne sappliquent pas. Toutefois, les parties prenantes aux accords fonds sur la prsente Norme internationale sont invites rechercher la possibilit dappliquer ldi
21、tion la plus rcente du document normatif indiqu ci-aprs. Pour les rfrences non dates, la dernire dition du document normatif en rfrence sapplique. Les membres de lISO et de la CEI possdent le registre des Normes internationales en vigueur. ISO 661:1989, Corps gras dorigines animale et vgtale Prp a r
22、ati ondel chantillon pour essaiISO 15303:2001(F) 2 ISO 2001 Tous droits rservs 3P r i n c i p e Ajout dans lhuile dun compos de rfrence deutr dont le temps de rtention en chromatographie en phase gazeuse et la concentration sont voisins de ceux du contaminant suspect. Introduction dun chantillon de
23、lhuile dans le dsorbeur thermique coupllappareillage de CPG/SM. Dsorption des constituants volatils contenus dans lhuile et rtention de ces derniers dans le pige froid. Chauffage clair du pige 160 Ce td placement des produits chimiques par balayage du pige vers lappareil CPG/SM pour analyse. 4R acti
24、fs Sauf indication diffrente, utiliser uniquement des ractifs de qualit analytique reconnue et de leau distilleo u dminralise, ou de lea udepu re t au moins quivalente. 4.1 talon, correspondant au contaminant suspect (puret 99 %). 4.2 Mthanol, de qualit analytique. 4.3 talons internes totalement deu
25、trs pour le benzne, lthylbenzne et le naphtalne (puret 99 %). 4.4 Hlium, chimiquement pur. 4.5 Huile darachide raffine, blanchie et dsodorise (RBD),o uh u i l ev gtale de stabilit similaire, connue pour tre exempte de produits chimiques industriels apparents aux produits analyser. 5 Appareillage Mat
26、riel courant de laboratoire et, en particulier, ce qui suit. 5.1 Chromatographe, pour chromatographie en phase gazeuse colonne capillaire. 5.2 Spectromtre de masse. 5.3 Dispositif de pigeage froid et de dsorption thermique 1) . 5.4 Colonne capillaire, de 50 m de longueur, phase stationnaire de type
27、mthyl-polysiloxane OV101 (ou quivalent), film de 0,5 m dpaisseur et de diamtre intrieur de 0,32 mm. 5.5 Ensemble chromatographe en phase gazeuse/spectromtre de masse, fonctionnant sous les conditions suivantes. a) Programmation des tempratures pour le dispositif de pigeage froid et de dsorption ther
28、mique ( linjection): four du pige froid 160 C; temprature du pige froid infrieure 40 C. Maintenir le pige froid une temprature infrieure 40 C pendant 5 min puis le rchauffer par chauffage clair 160 C. Dmarrer la programmation de temprature du chromatographe en parallle avec celle du chauffage clair
29、du pige froid. Maintenir le pige 160 C pendant 3 min. 1) Le dispositif de pigeage f r o i de td ed sorption thermique Chrompack est un exemple de produit appropri disponible sur le march. Cette information est donne lintention des utilisateurs de la prsente Norme internationale et ne signifie nullem
30、ent que lISO approuve ou recommande lemploi exclusif du produit ainsi dsign.ISO 15303:2001(F) ISO 2001 Tous droits rservs 3 b) Programmation des tempratures pour le chromatographe en phase gazeuse: temprature initiale 50 C pendant 5 min; montee nte mp rature 7,5 C/min; temprature finale 250 C pendan
31、t 5 min. c) Conditions du spectromtred ema sse : balayage 1 balayage ou plus par seconde; source 70 eV, 200 C, 100 A, 4 kV. d) Dbits de gaz: colonne 1 ml/min dhlium; diviseur (durant le pigeage froid) 5 ml/min. 5.6 Homognisateur de type vortex. 6 Mode opratoire 6.1 Prparation de ltalon et du blanc 6
32、.1.1 Utiliser comme support et comme tmoin blanc une huile raffine, blanchie et dsodorise par exemple une huile darachide (4.5). 6.1.2 Prparer ltalon (4.1) (cest-dire un produit chimique pur de composition connue, correspondant celle du contaminant suspect) sous forme concentre (par exemple 100 mg/k
33、g) dans lhuile support (6.1.1). Cela constitue la solution mre. Diluer cette solution mre avec de lhuile support la concentration requise (gnralement de lordre de 1 mg/kg 10 mg/kg). Il convient que la solution talon soit de concentration similaire celle du contaminant dans lchantillon. 6.1.3 Si nces
34、saire, diluer lhuile suspecte laide dhuile support (4.5) de faon que la concentration probable en contaminant suspect soit comprise entre 1 mg/kg et 10 mg/kg, cest-dire dans la plage linaire acceptep o u r une analyse quantitative selon la prsente mthode. 6.2 Prparation des talons internes Prparer u
35、ne solution deutred eb e n z ne, dthylbenzne ou de naphtalne (4.3) dans du mthanol (4.2) une concentration de 0,1 g/l (0,1 g/l) selon les besoins. Il est recommand que ltalon interne choisi soit celui qui a le temps de rt e n ti o nl ep lu sp ro ch ed ecel uiduco mp o s analyser. 6.3 Prparation de l
36、chantillon pour analyse Peser exactement 1,00 g de lhuile analyser. Ajouter 5,0 l de solution mthanolique dtalon interne, choisie conformment 6.2. Homogniser laide de lappareil de type vortex (5.6). Rpter la mme opration avec tous les chantillons, talons et blancs. Pour garantir les meilleurs rsulta
37、ts, laisser reposer toute une nuit pour atteindre lquilibre.ISO 15303:2001(F) 4 ISO 2001 Tous droits rservs 6.4 Dosage par chromatographie en phase gazeuse et spectromtrie de masse (CPG/SM) Les conditions suivantes ont t trouves satisfaisantes. Garnir de laine de verre propre un tube vide du disposi
38、tif de dsorption thermique sur une longueur de 3 cm 4cm.Pr lever environ 10 mg dchantillon et le placer dans le tube. Si la concentration observe de contaminant dpasse 10 mg/kg la suite dune analyse dune prise dessai dhuile de 10 mg, rpter le dosage avec un chantillon de 2,5 mg. Si la concentration
39、est encore trop forte, il est recommand de diluer lchantillon avec prcision avec lhuile tmoin blanc (6.1.1) jusqu ce que la concentration soit comprise entre 1 mg/kg et 10 mg/kg (voir 6.1.3). Refroidir pralablement le pige une temprature infrieure 20 C puis progressivement jusqu une temprature infri
40、eure 40 C. Placer le tube contenant lhuile dans le four de dsorption thermique et dmarrer les programmes de la dsorption et de la CPG/SM. 6.5 Identification Comparer le temps de rtention chromatographique et le spectre de masse du composanalyser ceux de ltalon. Lidentification demande une bonne corr
41、espondance des deux spectres et des deux temps de rtention. Effectuer lanalyse quantitative en utilisant les chromatogrammes gnrs par les courants ioniques des ions spcifiques du composanalyser et de ltalon interne en intgrant les aires correspondantes. Cette mthode permet de rduire le plus possible
42、 les interfrences dues aux coluants. 7 Calcul et expression des rsultats 7.1 Calcul Laire de pic de lion molculaire du compos analys divise par laire de pic de lion molculaire de ltalon interne donne le quotient de rponse, R: R K C C is o K est une constante; C est la concentration de lion du compos
43、 analys; C is e stl acon sta n tedel talon interne. R K C C SAM SAM is o R SAM est la valeur de R pour lchantillon; C SAM est la concentration de lion du compos analys dans lchantillon.ISO 15303:2001(F) ISO 2001 Tous droits rservs 5 tant donn que C is est une constante par dfinition: SAM SAM RF C o
44、le facteur F est is K F C De la mme manire, la valeur de R pour ltalon est: RF C STD STD o C STD est la concentration de lion du compos analys dans ltalon. Par consquent: C F CF R R SAM STD SAM STD C R C R SAM SAM STD STD 7.2 Expression des rsultats Effectuer les dterminations en double. Indiquer da
45、ns le rapport le nom du contaminant ainsi que la moyenne des valeurs en double obtenues pour la concentration, dans la mesure o la limite de rptabilit indiquee n8 . 2e s t respecte. Dans le cas contraire, rpter les dterminations sur deux autres prises dessai. Si la diffrence dpasse de nouveau 0,6 mg
46、/kg, prendre comme rsultat la moyenne arithmtique des quatre dterminations, dans la mesure o la diffrence maximale entre les rsultats individuels ne dpasse pas 1,0 mg par kilogramme dhuile. Indiquer les rsultats une dcimale prs. 8F i d lit 8.1 Essais interlaboratoires Les dtails dessais interlaborat
47、oires relatifs la fidlit de la mthode sont rsums dans lannexe A. Les valeurs drives de ces essais peuvent ne pas sappliquer aux plages de concentrations ou matrices autres que celles donnes. 8.2 Rptabilit La diffrence absolue entre deux rsultats dessais individuels indpendants, obtenus laide de la mme mthode sur un matriau identique soumis lessai dans le mme l
