1、Numro de rfrence ISO 4389:2000(F) ISO 2000 NORME INTERNATIONALE ISO 4389 Troisime dition 2000-12-15 Tabac et produits du tabac Dosage des rsidus de pesticides organochlors Mthode par chromatographie en phase gazeuse Tobacco and tobacco products Determination of organochlorine pesticide residues Gas
2、chromatographic methodISO 4389:2000(F) PDF Exonration de responsabilit Le prsent fichier PDF peut contenir des polices de caractres intgres. Conformment aux conditions de licence dAdobe, ce fichier peut tre imprim ou visualis, mais ne doit pas tre modifimoins que lordinateur employcet effet ne bnfic
3、ie dune licence autorisant lutilisation de ces polices et que celles-ci y soient installes. Lors du tlchargement de ce fichier, les parties concernes acceptent de fait la responsabilit de ne pas enfreindre les conditions de licence dAdobe. Le Secrtariat central de lISO dcline toute responsabilit en
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5、 ont t prises pour garantir lexploitation de ce fichier par les comits membres de lISO. Dans le cas peu probable o surviendrait un problme dutilisation, veuillez en informer le Secrtariat central ladresse donne ci-dessous. ISO 2000 Droits de reproduction rservs. Sauf prescription diffrente, aucune p
6、artie de cette publication ne peut tre reproduite ni utilise sous quelque forme que ce soit et par aucun procd, lectronique ou mcanique, y compris la photocopie et les microfilms, sans laccord crit de lISO ladresse ci-aprso ud uco m i t membre de lISO dans le pays du demandeur. ISO copyright office
7、Case postale 56 CH-1211 Geneva 20 Tel. + 41 22 749 01 11 Fax. + 41 22 749 09 47 E-mail copyrightiso.ch Web www.iso.ch Imprim en Suisse ii ISO 2000 Tous droits rservsISO 4389:2000(F) ISO 2000 Tous droits rservs iii Avant-propos LISO (Organisation internationale de normalisation) est une fdration mond
8、iale dorganismes nationaux de normalisation (comits membres de lISO). Llaboration des Normes internationales est en gnral confiea u x comits techniques de lISO. Chaque comit membre intress par une t u d eal ed r o i td ef a i r ep a r t i ed uc o m i t technique cr cet effet. Les organisations inter
9、nationales, gouvernementales et non gouvernementales, en liaison avec lISO participent galement aux travaux. LISO collabore troitement avec la Commission lectrotechnique internationale (CEI) en ce qui concerne la normalisation lectrotechnique. Les Normes internationales sont rdiges conformment aux r
10、gles donnes dans les Directives ISO/CEI, Partie 3. Les projets de Normes internationales adopts par les comits techniques sont soumis aux comits membres pour vote. Leur publication comme Normes internationales requiert lapprobation de 75 % au moins des comits membres votants. Lattention est appele s
11、ur le fait que certains des lm e n t sd el ap r sente Norme internationale peuvent faire lobjet de droits de proprit intellectuelle ou de droits analogues. LISO ne saurait tre tenue pour responsable de ne pas avoir identifi de tels droits de proprit et averti de leur existence. La Norme internationa
12、le ISO 4389 a t labore par le comit technique ISO/TC 126, Tabac et produits du tabac. Cette troisime dition annule et remplace la deuxime dition (ISO 4389:1997). la suite dun examen approfondi, le domaine dapplication de la troisime dition a t tendu aux produits du tabac. Le Rectificatif technique 1
13、:1998 a t inclus. Les annexes A et B de la prsente Norme internationale sont donnes uniquement titre dinformation.NORME INTERNATIONALE ISO 4389:2000(F) ISO 2000 Tous droits rservs 1 Tabac et produits du tabac Dosage des rsidus de pesticides organochlors Mthode par chromatographie en phase gazeuse 1
14、Domaine dapplication La prsente Norme internationale spcifie une mthode de dosage par chromatographie en phase gazeuse des rsidus de pesticides dans le tabac y compris le tabac en feuilles, le tabac manufactur et les produits du tabac. La mthode est applicable au dosage des pesticides organochlors d
15、ont la liste figure dans le Tableau 1. La mthode est particulirement recommande pour le dosage de ces substances dans les limites de dtection donnes dans le Tableau 1. NOTE 1 Il a t dmontr que cette mthode, lorsquelle est applique diffrentes sortes de tabac en feuilles, est exempte derreurs imputabl
16、es des pics de produits pesticides non organochlors interfrants sur le chromatogramme. Cependant, on ne peut pas supposer que cette affirmation stende toutes les formes et variantes du tabac et des produits du tabac, et il convient de prendre des prcautions dans linterprtation de rsultats inattendus
17、 et apparemment positifs. Certains chimistes sont partisans du recours la spectromtrie de masse pour confirmer, dans de telles circonstances, la structure chimique des compossd tects par chromatographie. NOTE 2 LISO 1750 contient les noms chimiques systmatiques et les structures correspondant aux no
18、ms communs donns dans le Tableau 1. 2R frences normatives Les documents normatifs suivants contiennent des dispositions qui, par suite de la rfrence qui y est faite, constituent des dispositions valables pour la prsente Norme internationale. Pour les rfrences dates, les amendements ultrieurs ou les
19、rvisions de ces publications ne sappliquent pas. Toutefois, les parties prenantes aux accords fonds sur la prsente Norme internationale sont invites rechercher la possibilit dappliquer les ditions les plus rcentes des documents normatifs indiqus ci-aprs. Pour les rfrences non dates, la dernire ditio
20、n du document normatif en rfrence sapplique. Les membres de lISO et de la CEI possdent le registre des Normes internationales en vigueur. ISO 648, Verrerie de laboratoire Pipettes un trait. ISO 1042, Verrerie de laboratoire Fioles jauges un trait. ISO 3696, Eau pour laboratoire usage analytique Spci
21、fication et mthodes dessai. ISO 4874, Tabac chantillonnage des lots de matires premires Principes gnraux. ISO 8243, Cigarettes chantillonnage.ISO 4389:2000(F) 2 ISO 2000 Tous droits rservs 3P r i n c i p e Dans un extracteur type Soxhlet spcial, extraction par le n-hexane des rsidus de pesticides du
22、n chantillon de tabac sch et broy,m lang avec du Florisil 1) . Dosage, sans autre purification, des rsidus de pesticides par chromatographie en phase gazeuse sur un appareil quip dun dtecteur capture dlectrons. 4R actifs Tous les ractifs doivent t r ed eq u a l i t approprie pour lanalyse des rsidus
23、 de pesticides. Vrifier la puret de tous les solvants avant lanalyse en ralisant un essai blanc dans les mmes conditions opratoires que celles utilises pour lchantillon pour essai (extraction et chromatographie en phase gazeuse) et sassurer que sur le chromatogramme obtenu, la ligne de base ne prsen
24、te pas de pics notables susceptibles dinterfrer avec ceux des rsidus de pesticides doser. 4.1 Eau,d gaze, rpondant au minimum au grade 2 de lISO 3696. 4.2 n-Hexane. 4.3 Tolune. 4.4 Substances de rfrence: talons certifis, dune puret minimale de 95 % (fraction massique), des substances numres dans le
25、Tableau 1. NOTE Le trans-chlordane est utilis comme indicateur pour le chlordane (mlange technique). Si de l -endosulfan est dtect par cette mthode, il est conseill de raliser le dosage des rsidus de la somme de l -endosulfan, du -endosulfan et du sulfate dendosulfan par une mthode approprie. 4.5 So
26、lution mre dtalon interne. Utiliser du Mirex 2) , un pesticide qui nest plus en usage actuellement (voir rfrence 2 dans la bibliographie). NOTE Mirex est le nom gnrique du dodcachloropentacyclo 5.2.1.0 2,6 .0 3,9 .0 5,8 d cane. Peser, 0 , 00 01gp r s, 0,02 g de Mirex dans une fiole jauge de 100 ml.
27、Ajuster au trait repre avec du n-hexane (4.2). 4.6 Solution dtalon interne. laide dune pipette, prlever 5 ml de la solution mre dtalon interne (4.5) et les placer dans une fiole jauged e 200 ml. Ajuster au trait avec du n-hexane (4.2), pour obtenir une solution contenant environ 5 g/ml de Mirex. Con
28、server cette solution entre 0 Ce t+ 4 Ce t labri de la lumire. Dans ces conditions, la solution dtalon interne est stable pour une dure dau moins 6 mois. 1) Florisil est un exemple de produit appropri disponible sur le march. Cette information est donne lintention des utilisateurs de la prsente Norm
29、e internationale et ne signifie nullement que lISO approuve ou recommande lemploi exclusif du produit ainsi dsign. 2) Mirex est un exemple de produit appropri disponible sur le march. Cette information est donne lintention des utilisateurs de la prsente Norme internationale et ne signifie nullement
30、que lISO approuve ou recommande lemploi exclusif du produit ainsi dsign.ISO 4389:2000(F) ISO 2000 Tous droits rservs 3 Tableau 1 Liste des substances de rfrence et limites de dtection Substance Nom commun (ISO 1750) Limite de dtection g/g Aldrine aldrine 0,02 trans-Chlordane chlordane 0,02 p,p-DDE 0
31、,02 o,p-DDT 0,04 p,p-DDT DDT 0,06 Dieldrine dieldrine 0,02 -Endosulfan endosulfan 0,03 HCB hexachlorobenzne 0,02 -HCH ou -BHC HCH ou BHC 0,02 -HCH ou -BHC HCH ou BHC 0,02 -HCH ou -BHC gamma-HCH (lindane) ou gamma-BHC 0,01 -HCH ou -BHC HCH ou BHC 0,02 Heptachlore heptachlore 0,02 Heptachlore poxyde 0
32、,02 o,p-TDE ou o,p-DDD 0,03 p,p-TDE ou p,p-DDD TDE 0,02 o,p-DDE 0,03 4.7 Solutions talons de pesticides. Conserver toutes les solutions de pesticides entre 0 Ce t+ 4C labri de la lumire. Dans ces conditions, ces solutions sont stables pour une dure dau moins 6 mois. 4.7.1 Solutions mres de chacun de
33、s talons de pesticides. Peser 0,000 1 g prs, 0,02 g de chacune des substances de rfrence (4.4) dans des fioles jauges individuelles de 100 ml. Ajuster chacune des fioles au trait avec du n-hexane (4.2) afin dobtenir des solutions mres talons ayant une concentration approximative en pesticide de 200
34、g/ml. Dans le cas dutilisation de -HCH, il convient de prparer la solution mre en diluant le pesticide dans du tolune (4.3) en raison de la solubilit rduite dans du n-hexane.ISO 4389:2000(F) 4 ISO 2000 Tous droits rservs 4.7.2 Solution mre mlangeA . laide dune pipette, prlever 5 ml de chacune des so
35、lutions mres de chacun des talons de pesticides (4.7.1) et les introduire dans une fiole jauge de 200 ml. Ajuster au trait avec du n-hexane (4.2) ou du tolune (4.3) dans le cas dutilisation de -HCH pour obtenir une solution contenant approximativement 5 g/ml de chacun des pesticides. 4.7.3 Solution
36、mre mlangeB . laide dune pipette, prlever 1 ml de la solution mre mlange A (4.7.2) et lintroduire dans une fiole jauged e 10 ml. Ajuster au trait repre avec du n-hexane (4.2) pour obtenir une solution contenant approximativement 0,5 g/ml de chacun des pesticides. 4.7.4 Solution dtalonnage. laide dun
37、e pipette, prlever 1 ml de la solution mre mlange A (4.7.2) et 1 ml de la solution dtalon interne (4.6) et les placer dans une fiole jauge de 100 ml. Ajuster au trait repre avec du n-hexane (4.2) pour obtenir une solution contenant approximativement 0,05 g/ml de chacun des pesticides et dtalon inter
38、ne. 4.8 Florisil ,d e15 0m 250 m. NOTE Florisil est une varit particulire de silicate de magnsium. La gamme nominale douvertures de maille de 150 m 250 m correspond une granulomtrie indiquede60me s h 100 mesh. 4.8.1 La qualit du Florisil est un des points les plus critiques de la mthode dessai. Lact
39、ivit du Florisil doit tre suffisante pour retenir les impuretsp r sentes dans lextrait de lchantillon tout en permettant llution des rsidus de pesticides. Il est donc ncessaire de procder un traitement pralable du Florisil comme indiqu en 4.8.2 et de nutiliser que du Florisil ayant satisfait lessai
40、de vrification dcrit en 4.8.3. 4.8.2 Placer une quantit suffisante de Florisil pour lessai de vrification dans une coupelle en quartz et chauffer dans un four moufle 550 C pendant au moins 5 h. Laisser le Florisil refroidir dans un dessiccateur ne contenant pas de dshydratant, et transfrer dans un b
41、allon fond rond. Ajouter 5 ml deau (4.1) par 100 g de Florisil .M langer soigneusement dans une fiole place en rotation pendant environ 1 h. Laisser le Florisil atteindre lquilibre en le conservant dans un rcipient en verre ferm tanche pendant au moins 48 h avant de procder comme dcrit en 4.8.3. 4.8
42、.3 Vrifier le niveau dactivit du Florisil p a rl e x t r a c t i o nd el ad i e l d r i n e partir de la solution de n-hexane. La solution doit avoir une concentration quivalente celle dun extrait de tabac contenant 1,0 g/g de ce pesticide. Le niveau dactivit du Florisil prtrait est correct lorsque
43、le taux de rcupration de la dieldrine est suprieur 95 %. Lactivit du Florisil doit tre vrifie chaque fois quune nouvelle portion est prpare. 5 Appareillage Il est essentiel de nettoyer parfaitement toute la verrerie avant utilisation et dviter dutiliser des rcipients en plastique et de la graisse su
44、r les robinets darrt, faute de quoi des impurets pourraient sintroduire dans les solvants. Toutes les fioles jauges et les pipettes doivent satisfaire aux spcifications de la classe A de lISO 1042 et de la classe A de lISO 648 respectivement. Matriel courant de laboratoire et, en particulier, ce qui
45、 suit. 5.1 vaporateur rotatif. 5.2 Broyeur tabac, avec maille de 2 mm. 5.3 Four, avec ventilation.ISO 4389:2000(F) ISO 2000 Tous droits rservs 5 5.4 Four moufle. 5.5 Chauffe-ballons. 5.6 Extracteur Soxhlet, pour extraction en continu (voir Figure 1). Lgende 1 Tabac Florisil 2F l o r i s i l 3 Disque
46、 filtrant porosit 1 NOTE Dbit de distillation: 200 ml/h. Figure 1 Appareil utilis pour lextraction du tabacISO 4389:2000(F) 6 ISO 2000 Tous droits rservs 5.7 Rfrigrant reflux. 5.8 Dessiccateur. 5.9 Coupelle en quartz. 5.10 Chromatographe en phase gazeuse. Utiliser le chromatographe en phase gazeuse
47、en suivant les instructions donnes par le fabricant. Le bloc dinjection, le four et le dtecteur doivent tre quips chacun dune unit de chauffe spare. Les conditions suivantes ont t estimes appropries avec un type dinstrument particulier et sont donnes titre indicatif. Si dautres conditions sont utilises, elles doivent tre valides au pralable. a) Tempratures La temprature de linjecteur doit tre comprise entre 180
