1、2011 年暨南大学(生物化学 A)考研真题及答案解析(总分:52.00,做题时间:90 分钟)一、填空题(总题数:9,分数:18.00)1.填空题请完成下列各题,在各题的空处填入恰当的答案。(分数:2.00)_2.蛋白质亚基之间存在界面。界面的大部分是由_组成。亚基之间主要的化学作用力是_。(分数:2.00)_3.脂肪酸的活化形式是_,而葡萄糖的活化形式是_。(分数:2.00)_4.在竞争性抑制的酶反应中,相对于无抑制剂的正常反应,V max _,而 K m _。(分数:2.00)_5.tRNA 分子 3末端的最后三个核苷酸为 5“_3。(分数:2.00)_6.DNA 的变性温度(T m )
2、的大小与_、_、_等因素有关。(分数:2.00)_7.在真核生物中,脂肪酸从头合成途径发生于_,在_、_两种细胞器中进行脂肪酸的延伸。脂肪酸去饱和的酶主要存在于_。(分数:2.00)_8.机体内物质的脱羧形成 CO 2 的反应一般有_种方式,一种是_,另一种是_。丙酮酸脱氢酶系催化丙酮酸形成乙酰辅酶 A 与 CO 2 的过程属于_睨羧。(分数:2.00)_9.氨基酸通过嘌呤核苷酸循环脱氨时,腺嘌呤核苷酸脱氨基的产物是_,其氨基的直接供体是_(填入具体氨基酸名称)。(分数:2.00)_二、名词解释题(总题数:10,分数:20.00)10.酶的别构调节(分数:2.00)_11.核苷酸(分数:2.0
3、0)_12.氧化磷酸化(分数:2.00)_13.DNA 拓扑异构酶(分数:2.00)_14.聚合酶链式反应(分数:2.00)_15.细胞色素(分数:2.00)_16.透析与超过滤(分数:2.00)_17.蛋白质结构域(分数:2.00)_18.增色效应(分数:2.00)_19.等电点与兼性离子(分数:2.00)_三、简答题(总题数:7,分数:14.00)20.生物氧化是指什么?其与体外的一般氧化反应如燃烧有什么异同?(分数:2.00)_21.什么叫限制性内切核酸酶?任举一例说明其应用。(分数:2.00)_22.酶及其辅助因子是指什么?简述它们之间的关系。(分数:2.00)_23.下面有两个 DN
4、A 分子,先变性然后再复性,复性是在同一温度下发生的,问哪一个,DNA 分子复性到原来的 DNA 结构可能性更大些?为什么?(1)ATATATATATTATATATATA(2)TAGCCGATGCATCGGCTACG(分数:2.00)_24.怎样通过紫外吸收法判断核酸的纯度以及对纯核酸进行定量?(分数:2.00)_25.试述蛋白质分子构象变化与其活力之间的关系。(分数:2.00)_26.为什么 tRNA 上会存在大量的修饰型的核苷酸?其生物学意义又是什么?(分数:2.00)_2011 年暨南大学(生物化学 A)考研真题答案解析(总分:52.00,做题时间:90 分钟)一、填空题(总题数:9,分
5、数:18.00)1.填空题请完成下列各题,在各题的空处填入恰当的答案。(分数:2.00)_解析:2.蛋白质亚基之间存在界面。界面的大部分是由_组成。亚基之间主要的化学作用力是_。(分数:2.00)_正确答案:(正确答案:非极性氨基酸残基 次级键)解析:3.脂肪酸的活化形式是_,而葡萄糖的活化形式是_。(分数:2.00)_正确答案:(正确答案:脂酰 CoA UDPG 和 ATPG)解析:4.在竞争性抑制的酶反应中,相对于无抑制剂的正常反应,V max _,而 K m _。(分数:2.00)_正确答案:(正确答案:不变 增加)解析:5.tRNA 分子 3末端的最后三个核苷酸为 5“_3。(分数:2
6、.00)_正确答案:(正确答案:CCA)解析:6.DNA 的变性温度(T m )的大小与_、_、_等因素有关。(分数:2.00)_正确答案:(正确答案:DNA 的均一性 DNA 分子中(G+C)的含量 溶剂的性质)解析:7.在真核生物中,脂肪酸从头合成途径发生于_,在_、_两种细胞器中进行脂肪酸的延伸。脂肪酸去饱和的酶主要存在于_。(分数:2.00)_正确答案:(正确答案:乙酰 CoA 的转运 内质网 线粒体 滑面内质网)解析:8.机体内物质的脱羧形成 CO 2 的反应一般有_种方式,一种是_,另一种是_。丙酮酸脱氢酶系催化丙酮酸形成乙酰辅酶 A 与 CO 2 的过程属于_睨羧。(分数:2.0
7、0)_正确答案:(正确答案:2 单纯脱羧 氧化脱羧 氧化脱羧)解析:9.氨基酸通过嘌呤核苷酸循环脱氨时,腺嘌呤核苷酸脱氨基的产物是_,其氨基的直接供体是_(填入具体氨基酸名称)。(分数:2.00)_正确答案:(正确答案:次黄嘌呤 谷氨酸)解析:二、名词解释题(总题数:10,分数:20.00)10.酶的别构调节(分数:2.00)_正确答案:(正确答案:某些代谢物能与变构酶分子上的变构部位特异性结合,使酶的分子构象发生改变,从而改变酶的催化活性以及代谢反应的速度,这种调节作用就称为酶的别构调节,也称为变构调节。)解析:11.核苷酸(分数:2.00)_正确答案:(正确答案:核苷酸是核酸的基本结构单位
8、,一类由嘌呤碱或嘧啶碱、核糖或脱氧核糖以及磷酸三种物质组成的化合物。它具有多种生物学功能:是 DNA 和 RNA 合成的前体;其衍生物是许多生物合成的活化的中间物;ATP 是生物系统最通用的能量、GTP 赋予大分子例如新生肽链在核糖体上的移位运动的动力及信号偶联蛋白的活化;腺苷酸是三种主要辅酶 NAD + 、FAD + 和 CoA 的组分;核苷酸也是代谢调节物,例如 cAMP、cGMP 是许多激素行使调节作用的细胞内信使。)解析:12.氧化磷酸化(分数:2.00)_正确答案:(正确答案:电子传递过程的氢以质子形式脱下,电子沿呼吸链转移到分子氧,形成粒子型氧,再与质子结合生成水。放出的能量则使
9、ADP 和磷酸生成 ATP。电子传递和 ATP 形成的偶联机制称为氧化磷酸化。)解析:13.DNA 拓扑异构酶(分数:2.00)_正确答案:(正确答案:DNA 拓扑异构酶是存在于细胞核内,能够催化 DNA 链的断裂和结合,从而控制 DNA拓扑状态的一类酶。DNA 拓扑异构酶可以分两类:拓扑异构酶 I,主要催化 DNA 链的断裂和重新连接,每次只作用于一条链,即催化瞬时的单链的断裂和连接,它们不需要能量辅因子如 ATP 或 NAD;拓扑异构酶 II,其能同时断裂并连接双股 DNA 链,它们通常需要能量辅因子 ATP。)解析:14.聚合酶链式反应(分数:2.00)_正确答案:(正确答案:聚合酶链式
10、反应(PCR)是一种选择性体外扩增 DNA 或 RNA 的方法,其基本步骤是:变性。目的双链 DNA 片段在 94下解链;退火。两种寡核苷酸引物在适当温度(50左右)下与模板上的目的序列通过氢键配对;延伸。在 Taq DNA 聚合酶合成 DNA 的最适温度下,以目的 DNA 为模板进行合成。由这三个基本步骤组成一轮循环,理论上每一轮循环将使目的 DNA 扩增一倍,这些经合成产生的DNA 又可作为下一轮循环的模板,一般样品经过 30 次循环,最终使基因放大了数百万倍,扩增了特异区段的 DNA 带。)解析:15.细胞色素(分数:2.00)_正确答案:(正确答案:细胞色素是一种以铁卟啉复合体为辅基的
11、血红素蛋白。在氧化还原过程中,血红素基团的铁原子可以传递单个的电子而不必成对传递,其中的铁通过 Fe 3+ 和 Fe 2+ 两种状态的变化传递电子。主要有细胞色素 a、细胞色素 b、细胞色素 c 和细胞色素 d 四类。)解析:16.透析与超过滤(分数:2.00)_正确答案:(正确答案:透析和超过滤是利用蛋白质分子不能通过半透膜的性质,使蛋白质和其他小分子物质如无机盐、单糖、水等分开的两种蛋白质纯化方法,其中: (1)透析只需要使用专用的半透膜即可完成,通常是将半透膜制成袋状,将生物大分子样品溶液置入袋内,将此透析袋浸入水或缓冲液中,样品溶液中的大分子量的生物大分子被截留在袋内,而盐和小分子物质
12、不断扩散透析到袋外,直到袋内外两边的浓度达到平衡为止。透析的动力是扩散压,扩散压是由横跨膜两边的浓度梯度形成的。 (2)超过滤也称超滤,是一种加压膜分离技术,即在一定的压力下,使小分子溶质和溶剂穿过一定孔径的特制的薄膜,而使大分子溶质不能透过,留在膜的一边,从而使大分子物质得到了部分的纯化。超滤根据所加的操作压力和所用膜的平均孔径的不同,可分为微孔过滤、超滤和反渗透三种。)解析:17.蛋白质结构域(分数:2.00)_正确答案:(正确答案:蛋白质结构域是介于二级和三级结构之间的另一种结构层次,具体指蛋白质亚基结构中明显分开的紧密球状结构区域,又称为辖区。多肽链首先是在某些区域相邻的氨基酸残基形成
13、有规则的二级结构,然后,又由相邻的二级结构片段集装在一起形成超二级结构,在此基础上多肽链折叠成近似于球状的二级结构。对于较大的蛋白质分子或亚基,多肽链往往由两个或多个在空间上可明显区分的、相对独立的区域性结构缔合而成三级结构,这种相对独立的区域性结构就称为结构域。)解析:18.增色效应(分数:2.00)_正确答案:(正确答案:增色效应是指由于 DNA 变性引起的光吸收增加现象,也就是变性后 DNA 溶液的紫外吸收作用增强的效应。DNA 分子具有吸收 250280nm 波长的紫外光的特性,其吸收峰值在 260nm。DNA分子中碱基间电子的相互作用是紫外吸收的结构基础,但双螺旋结构有序堆积的碱基又
14、“束缚”了这种作用。变性 DNA 的双链解开,碱基中电子的相互作用更有利于紫外吸收,故而产生增色敬应。)解析:19.等电点与兼性离子(分数:2.00)_正确答案:(正确答案:当溶液在某一定 pH 值时,使某特定蛋白质分子上所带正负电荷相等,成为两性离子,在电场中即不向阳极移动也不向阴极移动,此时溶液的 pH 值即为该蛋白质的等电点(pI)。在等电点时,蛋白质的溶解度最小,在电场中不移动。蛋白质在溶液中的游离状态受溶液 pH 值的影响,在酸性环境中蛋白质分子电离成阳离子,在碱性环境中则电离成阴离子,蛋白质在某一 pH 值的溶液中所带正、负电荷的量相等时,则称为兼性离子(两性离子)。)解析:三、简
15、答题(总题数:7,分数:14.00)20.生物氧化是指什么?其与体外的一般氧化反应如燃烧有什么异同?(分数:2.00)_正确答案:(正确答案:(1)生物细胞将糖、脂、蛋白质等燃料分子氧化分解,最终生成 CO 2 和 H 2 O 并释放出能量的作用称为生物氧化。 (2)有机物在生物体内的氧化与非生物氧化(燃烧)在化学本质上并无差别,都是将有机物氧化,释放出 CO 2 和 H 2 O 以及能量的过程。根据热力学原理,有机物氧化时释放的能量只取决于反应的始态和终态,不受反应途径的影响。因此,同种有机物无论是生物氧化或燃烧,当终产物相同时,释放的能量相等。 然而,生物氧化与体外的一般氧化反应如燃烧又有
16、明显差异: (a)生物氧化是在活细胞内,氧化条件温和(在生物体温、pH 接近中性、一个大气压和有水存在)的内环境中进行的;燃烧是在体外、高温干燥的条件下进行的。 (b)生物氧化是分阶段,经系列反应才完成的,能量逐步缓慢释放;燃烧无阶段可分,是一次性的剧烈氧化,能量爆发式的释放。 (c)生物氧化的能量利用效率远比燃烧高,生物氧化释放的能量除以热能形式散失掉一部分外,尚有相当多的能量可重新以化学能的形式(主要以 ATP 形式)贮存利用;燃烧时化学能全部以热能形式释放。 (d)水是燃烧的猝灭剂,生物氧化中水是不可缺少的,由于水的参与,不仅为生物氧化提供了必要的条件,而且还直接参加反应,增加了代谢物脱
17、氢的机会,从中可获得更多的能量。生物体普遍存在一种代谢物先加水后脱氢的氧化方式,可将这种反应称为“预制脱氢反应”。)解析:21.什么叫限制性内切核酸酶?任举一例说明其应用。(分数:2.00)_正确答案:(正确答案:(1)基因工程上把那些具有识别双链 DNA 分子中的某种特定核苷酸序列,并由此切割 DNA 双链结构的核酸内切酶统称为限制性内切核酸酶。 根据限制性内切核酸酶的作用特点,将它们分为三大类:I 类限制性内切核酸酶。I 类限制性内切核酸酶的分子量较大,一般在 30 万道尔顿以上,通常由三个不同的亚基所组成;II 类限制性内切核酸酶。这类酶的分子量较小,一般在 24 万道尔顿,通常由 24
18、 个相同的亚基所组成。它们的作用底物为双链 DNA,极少数 II 类酶也可作用于单链 DNA,或DNARNA 杂种双链。这类酶的专一性强,它不仅对酶切点邻近的两个碱基有严格要求,而且对更远的碱基也有要求,因此,II 类酶既具有切割位点的专一性,也具有识别位点的专一性,一般在识别序列内切割;类限制性内切核酸酶。类限制性内切核酸酶是基因工程中不常用的酶,分子量和亚基组成类似于 I 类酶,作用方式基本同 II 类酶。 (2)举例说明其应用:可以识别。DNA 特定序列,切割 DNA 片段和载体,产生互补的黏性末端,用于定向克隆;通过单一或两种限制性内切核酸酶酶切插入了外源片段的载体,判断外源片段是正向
19、插入还是反向插入;每种细菌和质粒都有特异的限制性内切核酸酶酶切图谱,可用于粗略判断细菌或质粒的种类;切割染色体 DNA,用于构建基因文库;限制性片段长度多态性(RFLP)。检测 DNA 在限制性内切酶酶切后形成的特定 DNA 片段的大小。因此凡是可以引起酶切位点变异的突变如点突变(新产生和去除酶切位点)和一段 DNA 的重新组织(如插入和缺失造成酶切位点间的长度发生变化)等均可导致 RFLP 的产生。)解析:22.酶及其辅助因子是指什么?简述它们之间的关系。(分数:2.00)_正确答案:(正确答案:(1)酶(enzyme)是生物体活细胞产生的具有特殊催化活性和特定空间构象的生物大分子,包括蛋白
20、质及核酸,又称为生物催化剂。绝大多数酶是蛋白质,少数是核酸 RNA,后者称为核酶。酶按其分子组成分类如下: )解析:23.下面有两个 DNA 分子,先变性然后再复性,复性是在同一温度下发生的,问哪一个,DNA 分子复性到原来的 DNA 结构可能性更大些?为什么?(1)ATATATATATTATATATATA(2)TAGCCGATGCATCGGCTACG(分数:2.00)_正确答案:(正确答案:DNA 分子(1)复性到原来的 DNA 结构可能性更大些。因为 DNA 复性率与核苷酸对的复杂性成正比,DNA 分子(1)是单一重复序列“而 DNA 分子(2)分子结构较为复杂,所以 DNA 分子(1)复
21、性到原来的 DNA 结构比 DNA 分子(2)更容易实现。)解析:24.怎样通过紫外吸收法判断核酸的纯度以及对纯核酸进行定量?(分数:2.00)_正确答案:(正确答案:(1)原理。核苷、核苷酸、核酸的组成成分中都有嘌呤、嘧啶碱基,这些碱基都具有共轭双键(-C-C=C-C=C-),在紫外光区的 250 一 280nm 处有强烈的光吸收作用,最大吸收值在 260nm 左右。常利用核酸的紫外吸收性进行核酸的定量测定。核酸的摩尔消光系数(或称吸收系数)用来表示,为每升溶液中含有 1 克原子核酸磷的光吸收值(即 A)。从 A 260 A 280 的比值可判断样品的纯度。纯 RNA 的 A 260 /A
22、280 20;DNA 的 A 260 A 280 1.8。当样品中蛋白质含量较高时,则比值下降。RNA 和 DNA 的比值分别低于 20 和 18 时,表示此样品不纯。蛋白质也有紫外吸收,通常蛋白质的吸收高峰在 280nm波长处,在 260nm 处的吸收值仅为核酸的 110 或更低,因此对于含有微量蛋白质的核酸样品,测定误差较小。若待测的核酸制品中混有大量的具有紫外吸收的杂质,则测定误差较大,应设法除去。不纯的样品不能用紫外吸收值作定量测定。测得未知浓度核酸溶液的 A 260 nm 值,即可以计算出其中 RNA 或 DNA 的含量。 (2)试剂和器材。试剂包括:钼酸铵过氯酸沉淀剂:取 36mL
23、 70过氯酸和 025g 钼酸铵溶于 964mL 蒸馏水中,即成 025钼酸铵-25过氯酸溶液;56氨水:用 2530氨水稀释 5 倍。材料:酵母 RNA 干粉。 (3)步骤: 准确称取待测核酸样品 05g,加:少量 00lmolL NaOH 调成糊状,再加适量水,用 56氨水调至 pH 70,定容至 50mL;取两支离心管,甲管加入2mL 样品溶液和 2mL 蒸馏水,乙管加入 2mL 样品溶液和 2mL 钼酸铵一过氯酸沉淀剂。混匀,在冰浴上放置30min;在 3000 rmin 下离心 10min。从甲、乙两管中分别吸取 05 mL 上清液,用蒸馏水定容至50mL。选择厚度为 1cm 的石英
24、比色杯,在 260nm 波长处测定 A 值;测定 A 280 的值。求出 A 260 A 280 ,判断核酸的纯度:纯 RNA 的 A 260 A 280 20;DNA 的 A 260 A 280 18。 式中,A 260 为甲管稀释液在 260nm 波长处 A 值减去乙管稀释液在 260nm 波长处 A 值;L 为比色杯的厚度,cm;N 为稀释倍数;0024 表示每毫升溶液内含 1gRNA 的 A 值;0020 表示每毫升溶液内含 1gDNA 的 A 值。 )解析:25.试述蛋白质分子构象变化与其活力之间的关系。(分数:2.00)_正确答案:(正确答案:蛋白质多种多样的功能与各种蛋白质特定的
25、空间构象密切相关,蛋白质的空间构象是其功能活性的基础,构象发生变化,其功能活性也随之改变。蛋白质变性时,由于其空间构象被破坏,故引起功能活性丧失,变性蛋白质在复性后,构象复原,活性即能恢复。 在生物体内,当某种物质特异地与蛋白质分子的某个部位结合,触发该蛋白质的构象发生一定变化,从而导致其功能活性的变化,这种现象称为蛋白质的别构效应。蛋白质(或酶)的别构效应,在生物体内普遍存在,这对物质代谢的调节和某些生理功能的变化都十分重要。)解析:26.为什么 tRNA 上会存在大量的修饰型的核苷酸?其生物学意义又是什么?(分数:2.00)_正确答案:(正确答案:tRNA 存在大量修饰型的核苷酸,即存在除合成所有 RNA 所用的 A、G、C 和 u 碱基以外的核苷酸,是因为多数分布在非配对区,特别是在反密码子 3端邻近部位出现的频率最高,且大多为嘌呤核苷酸。这对于维持反密码子环的稳定性及密码子、反密码子之间的配对是很重要的。 这些修饰型的核苷酸的生物学意义:扩展或者限制碱基配对的能力;提高密码子和反密码子结合的稳定性;影响翻译的起始,维持阅读框;其他还有一些调控细胞内部代谢方面的作用。)解析: