1、ICS 67.120.30 B 50 DB37 山东省地方标准 DB37/T 20952012 水产品中乙酰甲喹残留量的测定 液相色谱法 Detemination of Mequindox Residues in Fishery Products by HPLC 2012-03-21 发布 2012-05-01 实施 山东省质量技术监督局 发布 DB37/T 20952012 I 前 言 本标准按照GB/T 1.12009给出的规则起草。 本标准由山东省海洋与渔业厅提出。 本标准由山东省海洋渔业标准化专业技术委员会归口。 本标准起草单位：山东省海洋水产研究所、山东省水产品质量检验中心 。 本标
2、准主要起草人：宫向红、邹荣婕、徐英江、张世娟、李佳蔚、任传博、张华威。 DB37/T 20952012 1 水产品中乙酰甲喹残留量的测定 液相色谱法 1 范围 本标准规定了水产品中乙酰甲喹残留量的高效液相色谱测定方法。 本标准适用于水产品中乙酰甲喹残留量的测定。 2 规范性引用文件 下列文件对于本文件的应用是必不可少的。凡是注日期的引用文件，仅所注日期的版本适用于本文 件。凡是不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适用于本文件。 GB/T 6682 分析实验室用水规格和试验方法 3 原理 样品用二氯甲烷和乙酸乙酯混合溶液提取， 正己烷去脂， 用高效液相色谱仪进行测定， 外标法定量。
3、 4 试剂和材料 4.1 所用试剂除另有规定外，均为分析纯。 4.2 试剂和材料主要包括： 试验用水：应符合 GB/T 6682 中一级水的规定； 二氯甲烷； 乙酸乙酯； 甲醇：色谱纯； 正己烷； 二氯甲烷-乙酸乙酯混合提取液：二氯甲烷体积分数为 75 %； 乙酰甲喹标准品：纯度99 %； 乙酰甲喹标准贮备溶液：准确称取 0.01 g（精确至 0.000 1 g）乙酰甲喹，用甲醇溶解并定容 至 100 mL，配成浓度为 100 g/mL 的标准贮备液，置 4冰箱保存，保存期不超过 3 个月； 乙酰甲喹标准工作液：取乙酰甲喹标准贮备液，用流动相稀释成浓度范围为 0.05 g/mL1 g/mL 的
4、标准工作液。 5 仪器和设备 主要包括： 高效液相色谱仪，配有紫外检测器； 旋转蒸发仪； 离心机：7000 r/min； DB37/T 20952012 2 分析天平：感量 0.000 01 g； 天平：感量 0.01 g； 超声波清洗器； 旋涡混合器； 具塞玻璃离心管：10 mL； 100 mL 梨形瓶； 50 mL 塑料离心管； 微孔滤膜：有机系，0.45 m。 6 试样测定 6.1 样品的制备 虾类去头、壳、肠线，贝类、蟹类去壳，鱼类去骨、内脏。取可食部分用高速分散匀质机匀浆，备 用。如不能及时检测，-18 以下冷冻保存备用。 6.2 样品的提取 称取匀浆后的样品5 g（精确至0.01
5、g）于50 mL塑料离心管中，加20mL二氯甲烷-乙酸乙酯混合提 取液，振摇混匀，超声提取15 min，4 000 r/m in离心10 min，将提取液移至100 mL梨形瓶中，残渣用 15 mL二氯甲烷-乙酸乙酯混合提取液重复提取1次， 合并上清液于上述梨形瓶中， 40 旋转蒸发至近干。 6.3 样品的净化 向蒸发至近干的梨形瓶中加入1.00 mL流动相，漩涡溶解残渣，转移至10 mL具塞离心管中，加入5 mL 正己烷，漩涡混合1min，4 000 r/min离心1 0 min，弃去上层正己烷，下层溶液过0.45 m微孔滤膜后， 供液相色谱分析。 6.4 测定 6.4.1 色谱条件 主要包
6、括以下几项： a) 色谱柱：MG C18 柱, 250 mm4.6 mm（i.d.），5 m；或性能相当者； b) 流动相：甲醇-水（甲醇体积分数为 50 %）； c) 流速：0.8 mL/min； d) 检测波长：373 nm； e) 柱温：30 ； f) 进样量：20 L。 6.4.2 标准曲线绘制 取乙酰甲喹标准贮备液，用流动相稀释成适当浓度的系列标准工作液。分别取20 L进样，以峰面积 为纵坐标，浓度为横坐标，绘制标准曲线，计算线性方程。 6.4.3 液相色谱测定 在6.4.1色谱条件下对样品溶液进行测定，响应值应在仪器检测线性范围内。标准品保留时间参考 值为：5.632 min (见
7、附录A)。 DB37/T 20952012 3 7 空白试验 除不加试样外，均按 6进行测定。 8 结果计算 试样中乙酰甲喹残留量按公式（1）计算，计算结果需扣除空白值，结果保留三位有效数字。 1000 = m VC X . (1) 式中： X 试样中乙酰甲喹残留量， g/kg； C 试样溶液中乙酰甲喹的浓度， g/mL； V 试样溶液最终体积，mL； M 试样质量，g。 9 灵敏度 本方法检出限为10g/kg；定量限为20 g/kg。 10 准确度 本方法添加浓度为20g/kg200g/kg时，回收率为70 %90 %。 11 精密度 批内相对标准偏差10 %，批间相对标准偏差15 %。 1
8、2 方法的线性范围 本方法的线性范围为50 g/L1 000 g/L。 DB37/T 20952012 4 A A 附 录 A （资料性附录） 色谱图 5. 632 AU 0.0000 0.0005 0.0010 0.0015 0.0020 0.0025 0.0030 分分 0.50 1.00 1.50 2.00 2.50 3.00 3.50 4.00 4.50 5.00 5.50 6.00 6.50 7.00 7.50 8.00 8.50 9.00 9.50 10.00 图A.1 200 g/L 乙酰甲喹标准溶液色谱图 AU -0.0010 -0.0005 0.0000 0.0005 0.0
9、010 0.0015 0.0020 分分 0.50 1.00 1.50 2.00 2.50 3.00 3.50 4.00 4.50 5.00 5.50 6.00 6.50 7.00 7.50 8.00 8.50 9.00 9.50 10.00 图A.2 鲤鱼空白色谱图 乙乙乙乙 - 5. 6 2 2 AU -0.0002 0.0000 0.0002 0.0004 0.0006 0.0008 0.0010 0.0012 0.0014 0.0016 0.0018 0.0020 0.0022 0.0024 分分 0.50 1.00 1.50 2.00 2.50 3.00 3.50 4.00 4.50 5.00 5.50 6.00 6.50 7.00 7.50 8.00 8.50 9.00 9.50 10.00 图A.3 鲤鱼加标色谱图（添加量为 20 g/kg） _
