1、ICS 71.040 Z 22 备案号： DB21 辽 宁 省 地 方 标 准 DB21/T 3304 2020 畜禽粪便中西玛津残留量的测定 气相色谱 -质谱法 Determination of simazine residue in livestock manure Gas chromatography-mass spectrometry method 2020 - 09 - 30 发布 2020 - 10 - 30 实施 辽宁省市场监督管理局 发布 DB21/T 3304 2020 I 前 言 本标准按照 GB/T 1.1-2009标准化工作导则给出的规则 编写 。 本标准由 辽宁省农业
2、农村厅 提出并归口 管理 。 本标准起草单位：沈阳海关技术中心 、沈阳农业大学、辽宁省农业科学院 。 本标准主要起草人： 徐宜宏， 付海滨 ， 李晓东 ，姜玲玲， 金雁 ，胡姝，张敏，李丽娜 。 本标准发 布实施后，任何单位和个人如有问题和意见建议 ， 均可以通过来电和来函等方式进行反馈， 我们将及时答复并认真处理，根据实际情况依法进行评估及复审。 归口管理部门通讯地址：辽宁省农业农村厅（沈阳市和平区太原北街 2号），联系电话： 024-23447862 标准起草单位通讯地址： 辽宁省 沈阳市沈河区东滨河路 106号，联系电话： 024-24808859 DB21/T 3304 2020 1
3、畜禽粪便中西玛津残留量的测定 气相色谱 -质谱法 1 范围 本标准规定了畜禽粪便中西玛津 残留量的气相色谱 -质谱检测方法 。 本标准适用于 畜禽粪便中 西玛津 残留量的检测。 2 规范性引用 文件 下列文件对于本文件的应用是必不可少的。凡是注日期的引用文件，仅注日期的版本适用于文本件。 凡是不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有修改单）适用于本文件。 GB/T 6682 分析实验室用水规格和试验方法 3 方法提要 试样经乙酸乙酯 -乙腈混合溶液提取，通过弗罗里硅土固相萃取柱或中性氧化铝固相萃取柱净化， 气相色谱 -质谱 法 （ GC-MS） 测定 与 确证 ，外标法定量。 4 试剂和材料
4、除另有规定外，所用试剂均为分析纯， 水为 GB/T 6682 规定的一级水 。 4.1 正己烷：色谱纯； 4.2 石油醚： 分析纯， 30 -60； 4.3 乙腈：色 谱纯； 4.4 丙酮：色谱纯； 4.5 乙酸乙酯 -乙腈 （ 1+1， V+V） ：量取 50 mL乙酸乙酯和 50 mL乙腈，混合均匀； 4.6 石油醚 -丙酮（ 1+1， V+V）：量取 50 mL石油醚和 50 mL丙酮，混合均匀； 4.7 正己烷 -石油醚（ 1+1， V+V）：量取 50 mL正己烷和 50 mL石油醚，混合均匀； 4.8 无水硫酸钠：于 650灼烧 4h，用前于 105烘 4h，冷却后贮于密闭容器中，
5、备用； 4.9 西玛津标准品 (CAS： 122-34-9)：纯度 98%； 4.10 西玛津标准储备溶液：准确称取适量的西玛津标准品，用丙酮配制成浓度为 100 g /mL 的 标准储 备溶液；该溶液在 0 4 条件下 保存 （有效期为 6个月） ； 4.11 西玛津基质标准工作溶液：根据需要吸取一定体积的标准储备液（ 4.10），用空白样品提取 液配成所需浓度的基质标准工作溶液； DB21/T 3304 2020 2 4.12 弗罗里硅土固相萃取柱： 500 mg， 6 mL或相当者； 4.13 中性氧化铝固相萃取柱： 1 g， 3 mL或相当者。 5 仪器和设备 5.1 气相色谱 -质谱
6、仪（ GC-MS）：配有电子轰击源（ EI）； 5.2 分析天平：感量 0.1 mg和 0.1 g； 5.3 氮吹仪：可控温； 5.4 均质器 ： 转速不低于 10000 r/min； ； 5.5 离心机：转速不低于 4000 r/min； 5.6 涡旋混匀 机。 6 试样制备与保存 将采集的新鲜畜禽粪样品 ,置于洁净的塑料袋中 , 混匀，使固液均匀分布后，洁净容器内作为试样 。 密封并标明标记 。 -18以下冷冻干燥保存。 在抽样及制样的操作过程中，应防止样品受到污染或发生残留物含量的变化。 7 测定步骤 7.1 提取 称取试样 2g（精确至 0.01g），转入 100 mL离心管中。加入
7、20 mL乙酸乙酯 -乙腈混合溶剂（ 4.5）， 均质提取 40 s， 4000 r/min 离心 5 min，提取液经 10 g无水硫酸钠柱 (4.8)过滤至浓缩管，残渣再加入 20 mL乙酸乙酯 -乙腈混合溶剂（ 4.5） ， 重复 上述操作。合并滤液于同一浓缩管中，于 40减压蒸发至 近干 ,待净化。 7.2 净化 7.2.1 禽 类粪便样品：用 2 mL 正己烷（ 4.1）将上述残渣涡旋混合溶解，注入预先用 5 mL正己烷 淋洗的弗罗里硅土固相萃取柱（ 4.12）中净化。分别用 10 mL正己烷， 10 mL石油醚淋洗，弃掉淋洗液。 用 10 mL石油醚 -丙酮（ 4.6）的混合溶剂洗
8、脱，控制流速 2 3 mL/min。收集全部洗脱液于浓缩管中， 于 40减压蒸发至近干，用正己烷（ 4.1）定容至 1.0 mL，涡旋混合溶解残渣，供 GC-MS测定。 7.2.2 畜 类粪便样品：用 2 mL正己烷将上述残渣涡旋混合溶解，注入预先用 5 mL正己烷预淋洗 的中性氧化铝柱（ 4.13）中净化。分别用 10 mL用正己烷， 10 mL 正己烷 -石油醚（ 4.7），弃掉淋洗液。 用 10 mL石油醚 -丙酮（ 4.6）的混合溶剂洗脱，控制流速 2 3 mL/min，收集全部洗脱液于浓缩管中， 于 40减压蒸发至近干，用正己烷（ 4.1）定容至 1.0 mL，涡旋混合溶解残渣，供
9、GC-MS测定。 7.3 测定 7.3.1 气相色谱 -质谱条件 a) 色谱柱： DB-35 MS柱（ 30 m0 .25 mm 0.25 m），或相当者 ； DB21/T 3304 2020 3 b) 色谱柱温度： ； c) 进样口温度： 280； d) 接口温度： 300； e) 电离方式：电子轰击源电离（ EI） ， 定量离子为 201 m/z，定性离子为 186、 173、 203 m/z； f) 离子源温度： 230； g) 四级杆温度： 150 h) 载气：氦气，纯度 99.999%，流速 2.0 mL/min； i) 进样方式：无分流， 0.75 min后开启分流阀。 j) 进样
10、量： 1 L； k) 测定方式：选择离子监测（ SIM）； l) 溶剂延迟时间： 7.0 min。 7.3.2 定性测定 根据样液中西玛津残留量情况，选定浓度相近的标准工作溶液，标准工作溶液和待测样液中 西玛津 的响应值均应在仪器检测的线性范围内。标准工作溶液和样液等体积 交替 进样测定。在上述 GC-MS条件 （ 7.3.1）下，西玛津的参考保留时间为 9.40-9.50 min，标准品色谱图参见附录 A中图 A.1。 进行气相色谱 -质谱测定时，若被测物质色谱峰保留时间与标准比较，偏差在 2.5%之内，并且在 扣除背景后的样品谱图中，所选择的西玛津的特征 离子（ m/z，定性离子）均出现，
11、同时所选择离子的 丰度比与标准物质离子丰度比相一致，或相似度在允许偏差之内（见表 1），被确证的样品可判定为阳 性检出。 表 1 定性确证时相对离子丰度的最大允许偏差 相对离子丰度 /% 50 20 50 10 20 10 允许的相对偏差 /% 10 15 20 50 7.3.3 定量测定 根据样液中西玛津残留量的情况，选定浓度相近的基质标准工作溶液，基质标准工作溶液和待测样 液中西玛津的响应值均应在仪器检测的线性范围内，对标准工作溶液与样液等体积进样测定，外标法定 量。 7.4 空白试验 除不称取试 样外，其余均按上述步骤进行。 7.5 结果计算和表述 15 /min 240 (3min)
12、100 300 (15min) 8 /min DB21/T 3304 2020 4 用色谱数据处理机或按式 （ 1） 计算试样中西玛津残留量： 10001000 mA VcAX s (1) 式中： X 试样中西玛津残留量，单位为毫克每千克， mg/kg； A 样液中西玛津的峰面积； c 基质标准工作溶液中西玛津的浓度，单位为微克每毫升， g/mL； V 样液最终定容体积，单位为毫升， mL； As 基质标准工作溶液中西玛津的峰面积； m 最终样液所代表的试样量，单位为克 ， g。 注： 计算结果应扣除空白值。 8 定量 限和回收率 8.1 定量限 本方法的定量限为 0.01 mg/kg。 8.
13、2 添加浓度范围 、 回收率 及精密度 表 2 样品的添加浓度、回收率及精密度的实验数据 样品 添加浓度 /（ mg/kg） 回收率范围 /（ %） 相对标准偏差 (RSD)(n=6)/% 畜类粪便样品 0.01 74.3-96.1 7.1 0.02 91.0-112.5 5.4 0.1 91.6-102.2 3.5 禽类粪便样品 0.01 90.0-104.7 4.7 0.02 92.0-102.7 2.1 0.1 93.5-104.2 3.1 DB21/T 3304 2020 5 附 录 A （资料性附录） 西玛津标准品的色谱图 图 A.1 西玛津标准品的总离子流色谱图 图 A.2 西玛津标准品的 全扫描（ EI）质谱 图 _ 9.40
