1、湖南省地方标准DB43湖南省市场监督管理局 发 布DB43/T169 2020 92020-12-29发布 2021-03-29实施穗状狐尾藻实验室培养技术规程Myriophyllum Verticillatum L.Laboratory Culture Technology ProceduresICS 65.020CCS B 16DB43/T 19692020 I 目 次 前言 1 范围 1 2 规 范性 引用 文件 1 3 术 语和 定义 1 3.1 枝条 1 3.2 侧枝 1 3.3 节点 1 3.4 接种 1 4 环 境要 求 1 4.1 温度 1 4.2 光照 1 5 培 养基 用水
2、 2 6 设 备与 器具 2 7 培 养方 法 2 7.1 取样 2 7.2 剪切 2 7.3 漂洗 2 7.4 培养 2 7.5 注意 事项 2 8 观 察记 录 2 附录A（资 料性）狐尾 藻的概 述图 3 附录B（资 料性）狐尾 藻的接 种效 果图 4 附录C（资 料性）ANDREWS 培 养基 配制 方法 5 DB43/T 19692020 II DB43/T 19692020 III 前 言 本文件 按 照GB/T 1.1 2020 给 出的 规则 起草。本文件 某些 内容 可能 涉及 专利。本文 件发 布机 构不 承担识 别这 些专 利的 责任。本文件 由湖 南省 农业 农村 厅提
3、出。本文件 由湖 南省 农业 标准 化技术 委员 会归 口。本文件 起草 单位：湖 南省 植物保 护研 究所，长 沙艾 格里生 物科 技有 限公 司。本文件 主要 起草 人：陈昂、刘勇、张 德咏、张 战泓、蒋桂 芳、罗杰、罗 香文、陈武 瑛、熊浩。DB43/T 19692020 IV DB43/T 19692020 1 穗状狐尾 藻室内 培养技术 规程 1 范围 本文件 规定 了穗 状狐 尾藻 实验室 培养 的环 境要 求、仪 器设 备、水质、培 养方 法等。本文件 适用 于湖 南省 试验 用穗状 狐尾 藻的 室内 培养。2 规 范性 引用 文件 下列文 件中 的内 容通 过文 中的规 范性
4、引用 而构 成本 文件必 不可 少的 条款。其 中，注日 期的 引用 文件，仅该日 期对 应的 版本 适用 于本文 件；不注 日期 的引 用文件，其 最新 版本（包 括所有 的修 改单）适 用 于 本文件。3 术 语和 定义 下列术 语和 定义 适用 于本 文件。3.1 枝条 Stem 维管植 物地 上部 分的 骨干，上面 着生 叶、花和 果实。它具有 输导 营养 物质 和水 分以及 支持 叶、花和果实在 一定 空间 的作 用。3.2 侧枝 Branch 从主枝 或 副 主枝 上生 长出 的小枝。又 叫单 位枝。由 植物的 芽原 基发 育而 来。3.3 节点 Node 植物茎 上的 节点，为
5、植物 茎中间 的横 隔。3.4 接种 Inoculation 按无菌 操作 技术 要求 将目 的生物 进行 一定 处理 之后 移接到 培养 基质 中的 过程 4 环 境要 求 4.1 温度 18 22。4.2 光照 冷荧光 灯源。将 光源 固定 在距水 面 30 50 cm 的上 方，可 预防 热损 伤，且保 证光合 作用 和生 长充 足的光照。光 照强 度 约8000 Lux（水表 面）。每 天光 照 时间16h。DB43/T 19692020 2 5 培 养基 用水 满足 pH 为 7.0 8.0。溶 解 氧3.0 mg/L。培 养用 水 为去离 子水，ANDREWS 培 养基的 配制 方
6、法 参见附录 C 的C.1。6 设 备与 器具 光源、培养 架，标本 瓶，超净工 作台，酒 精灯，镊 子，剪 刀等。7 培 养方 法 7.1 取样 选取长 势良 好，未被 异种 侵染过 的枝 条。7.2 剪切 将主枝 放入 无菌 水中，用 灭菌后 的剪 刀剪 主枝 上靠 近顶端 的枝 条。于两 个节 点间剪 切，即保 留 2个节点。（如果 是侧 枝较 长，也可 剪切）7.3 漂洗 使用塑 料镊 子辅 助，在无 菌水中 轻轻 漂洗 狐尾 藻新 枝，漂 洗 3 次。7.4 培养 分装培 养时，每 个培 养瓶 约 1000 mL 培养 基，液面 高度维 持在 约 10-15 cm。将新剪 切的 狐尾
7、 藻枝条约 20 根 放入1000mL 装有 ANDREWS 培养 基的 培养 瓶，放 在上 述要 求的 环境 下培养。穗 状狐 尾藻 的 保 种34 周接 种一 次。健康 强 壮没被 侵染 的藻 株可 用于 试验。狐尾 藻的 接种 效果 图参见 附 录 B 的 B.1。7.5 注意 事项 野外采 集的 穗状 狐尾 藻，一定要 进行 无菌 化处 理后 再用培 养基 培养，否 则藻 类的爆 发会 是依 附在 狐尾藻上 的藻 类增 多，增加 无菌化 的难 度，可以 先用 采集的 水暂 养。标本瓶 等器 皿使 用前 应进 行清洗 及杀 菌消 毒。8 观察 记录 记录培 养过 程中 的环 境条 件监测
8、 数据，观 察并 记录 狐尾藻 生长 的参 数等 数据。DB43/T 19692020 3 附 录 A（资料 性）狐尾藻 的概 述图 图 A.1 穗 状狐 尾藻 概述 图 DB43/T 19692020 4 附 录 B（资料 性）狐尾藻 的接 种效 果图 图 B.1 穗 状狐 尾藻 的接 种效果 图 DB43/T 19692020 5 附 录 C（资料 性）ANDREWS 培 养基 配制 方法 C.1 ANDREWS 培养 基的 制 备 表 C.1 ANDREWS 培 养基 制备表 成分 浓度 KCl 3.73 mg/L KNO3 80.8 mg/L Ca(NO3)2 4H2O 188.8 mg/L MgSO4 7H2O 98.6 mg/L MnSO4 H2O 0.169 mg/L ZnSO4 7H2O 0.15 mg/L H3BO3 0.155 mg/L CuSO4 5H2O 0.012 mg/L(NH4)6Mo7O24 4H2O 0.0037 mg/L KH2PO4 27.2 mg/L FeSO4 7H2O 2.78 mg/L Na2EDTA 3.72 mg/L 蔗糖 30 g/L*注：将配好培养基高压灭菌（120，15 min），4 避光冷藏 保存。
