1、ICS 67.080.20CCSB 31DB36江 西 省 地 方 标 准 化 指 导 性 技 术 文 件DB36/Z 0012022蔬菜水果中克百威的检测量子点微球荧光免疫层析法Determination of carbofuran in fruits and vegetablesQuantum dot microsphere lateral flow immunoassay2022-12-06 发布2022-12-06 实施江西省市场监督管理局发 布DB36/Z 0012022I 目次前言.II1范围.12规范性引用文件.13术语和定义.14原理.15试剂和材料.16仪器和设备.17试样制
2、备.28检测步骤.29结果表述.210 其他.2DB36/Z 0012022II前 言本文件按照GB/T 1.1-2020标准化工作导则 第1部分：标准化文件的结构和起草规则的规定起草。请注意本文件的某些内容可能涉及专利。本文件的发布机构不承担识别专利的责任。本文件由江西省市场监督管理局提出并归口。本文件起草单位：南昌大学、江西省市场监督管理局、江西省检验检测认证总院、江西维邦生物科技有限公司。本文件主要起草人：赖卫华、郭丹、余颐、陈媛、熊勇华、彭娟、张威、郭平、熊华亮、刘文娟、罗凯、李响敏、黄小林、唐丽君、殷佳琦、薛广健、陈珍珍、汪健健、路芸。DB36/Z 00120221蔬菜水果中克百威的
3、检测 量子点微球荧光免疫层析法1范围本文件规定了蔬菜水果中克百威的量子点微球荧光免疫层析快速检测方法。本文件适用于辣椒、青菜、豇豆、芹菜、韭菜、黄瓜、苹果、柑橘和梨中克百威的快速检测。本方法检测克百威的检出限为 0.004 mg/kg，定量限为 0.008 mg/kg。2规范性引用文件下列文件对于本文件的应用是必不可少的。凡是注日期的引用文件，仅所注日期的版本适用于本文件。凡是不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适用于本文件。GB 2763食品安全国家标准 食品中农药最大残留限量GB/T 6682分析实验室用水规格和试验方法GB 23200.112食品安全国家标准 植物源性食品中
4、9种氨基甲酸酯类农药及其代谢物残留量的测定 液相色谱-柱后衍生法3术语和定义本文件没有需要界定的术语和定义。4原理本方法以量子点微球为荧光标记物，基于竞争抑制免疫层析技术原理，通过荧光免疫分析仪进行数据读取和分析，根据已设定的标准曲线计算样品中待测物质的含量，对蔬菜水果中的克百威进行定量检测。5试剂和材料除另有说明外，本方法所用试剂均为分析纯，水为GB/T 6682规定的二级水。5.1乙腈（C2H3N）。5.2磷酸氢二钾（K2HPO4）。5.3磷酸二氢钾（KH2PO4）。5.4试样提取液：准确称取 5.6 g 磷酸氢二钾（5.2）、0.41 g 磷酸二氢钾（5.3），乙腈（5.1）100 mL
5、用水溶解并定容至 1 L。5.5试样稀释液（0.01 mol/L 磷酸盐缓冲液）：准确称取 5.6 g 磷酸氢二钾（5.2）、0.41 g 磷酸二氢钾（5.3），用水溶解并定容至 1 L。6仪器和设备DB36/Z 001202226.1分析天平：感量为 0.01 g。6.2微量移液器：20L200 L、100L1000 L 和 1 mL10 mL。6.3旋涡振荡器：转速2500 r/min。6.4恒温孵育器：设定温度为 37，误差不超过1。6.5荧光免疫分析仪：激发波长为 365nm5nm，发射波长为 610nm5nm。6.6离心机：转速4000 r/min。6.7均质机：转速5000 r/m
6、in。6.8离心管：1.5 mL 和 50 mL。6.9克百威量子点微球免疫层析包装盒：含量子点微球免疫层析试纸条和标准曲线内置卡（ID 卡），ID 卡内设对应批次标准曲线。7试样制备7.1分样和粉碎取不少于 100 g 具有代表性的蔬菜水果样品，充分均质混匀，均分成两份分别装入洁净容器作为试样和留样，密封，标记，留样置于-20 C 避光保存。蔬菜水果测定部位按照 GB 2763 的规定执行。7.2试样前处理7.2.1准确称取 2 g 0.1 g 试样于 50 mL 离心管中。7.2.2向上述离心管中加入试样提取剂 3 mL（5.4），封盖漩涡混匀 2 min。7.2.3取 1 mL 提取后上
7、清液，4000 rpm 离心 2 min。7.2.4取 50 L 离心后上清液加入 700 L 克百威试样稀释液（5.5），混匀后用于检测。注：不同厂家检测卡所用的样品前处理方法可能不同，应按照产品使用说明中规定方法进行操作。8测定步骤8.1测试前打开荧光免疫分析仪（6.5），确认包装盒中的 ID 卡与产品批号是否匹配，插入 ID 卡，在仪器测试界面点击“读卡/读项目”，界面出现“读取完成”，点击“确认”即可使用。8.2将恒温孵育器（6.4）开机，待温度升至 37即可使用。8.3从密封包装袋中取出克百威量子点微球免疫层析试纸条，在 30 min 内使用。8.4将克百威量子点微球免疫层析试纸条平
8、放，用微量移液器吸取 90 L 稀释后的待测液于克百威量子点微球免疫层析试纸条的加样孔（S）中，在恒温孵育器中 37孵育反应 10 min。8.5反应时间结束后立即将克百威量子点微球免疫层析试纸条插入荧光免疫分析仪中，点击仪器界面的“测试”，仪器会自动给出定量测试结果，15 min 内测试，结果有效。注：不同厂家荧光免疫分析仪所用仪器界面设置可能不同，应按照仪器使用说明中规定方法进行。9结果表述样品中克百威的含量由荧光分析仪自动计算并显示，单位为毫克/千克（mg/kg）。10其他DB36/Z 0012022310.1注意事项：使用前请仔细阅读说明书，仪器的具体操作详见仪器操作说明书；检测卡为一次性使用，检测时请勿触摸检测卡结果显示区，并避免阳光直射和电风扇直吹；请勿使用自来水、蒸馏水或去离子水作为阴性对照；结果的确证需要使用国家规定的参比标准方法进行。10.2本方法参比标准方法按照 GB 23200.112 的规定执行。
