1、ICS 67. 160 X 62 中华人民共和国农业行业标准2002-12-30发布绿色食tJ 日口Grecn food-Beer NY/T 273一2002代桥NYiT273 -1995 啤酒2003-03-01实施中华人民共和1国农业部发布NY /T 273-2002 前言本标准是对NY!T273-1995，用在1o mL.hn人0.4g氢氧化锁，贮存于棕色瓶内.精释至1000 n.此溶液每毫升约吉甲醒1rr驭。准确称取需用18mI.-20 mL硫代硫酸铀溶液滴定的基准吸取甲醒贮备榕液20.0时，于250mL腆量瓶重错酸仰已在130C-140C干燥3h - 4 h.标定中，加入0.05mo
2、l!L腆液50时.4%氮氧化俐溶0.05 mol!L溶液约需O.05g-0.06，世于腆量瓶中，榕液15mL.加塞，混匀放置15min。加3%硫酸于50mL水中.如2mI.浓硫酸及1g碳酸俐，轻轻摇动20 mL混匀。再放置15min 0以硫代硫酸纳溶|确量瓶使二氧化破逸出。再加Ig模化悍摇匀，于暗处放掖滴定重溶液呈淡黄色时，加0.2%淀盼溶液置10min.加水至100mI.用欲标定的硫代硫酸纳溶液滴1 mL.继续滴定至蓝色同w褪击，同时用4代替定，近终点溶液呈被黄绿色)时，加2.5时JO. 2%淀粉指甲醒溶液，以相同步骤傲空白试验，按下式r算|示剂，继续滴定至榕液由蓝色变为亮蓝色.同时作空白甲
3、酶的激度试验.(V, -V)飞MX15XI000在20.0 G M (V，-V.)X0.04903X2 式中2标定式中.f 甲lIf.标准贮备溶掖中的甲酸浓度，单G 重错酸仰的质量，单位为克(g);位为毫克每毫1Hmg/I.)，V ,. .-硫代硫酸销攘液的用量，单位为毫丹(mL)I V , 空白消轻硫代硫酸纳溶掖的体m.单V, 空白试验硫代硫醺铀溶液的用量，单位为毫位为毫升(mL); 升(mL)I V, 标定甲lIf.消艇的硫代硫酸铀溶液体M-一硫代硫酸铺癖液的实际浓度，单位为摩尔每积，单位为毫升(mL)I 升(mol!L)I M 硫代硫酸俐潜液的标准浓度，单位为0.049 03白一一与1.
4、00 mL硫代硫酸铺溶液C(Na2S23)=摩尔每升(moI/L), 1. 000 mol!LJ相当的以克表示的重错酸僻的15 甲隘的换算值。质量，z 硫代硫酸俐的换算票数.A.3 仪栅与设备A. 3. 1 10 mL具塞比色管数支.A. 3. 2 分光光度计g具550nm波长，并配有10mm光程的比色皿。A.4 撮作方法A. 4. 1 标准曲线的绘制将甲隆标准贮备液稀释至1mg/L左右，分别吸取omL. 0.5时_，1. 0 mL, . 5时_，2.0mL.2.5 mL.3. 0 mL的甲隆稀释液于10mL具塞比色管中，用纯水定容至5mL(相当于含Iflll!0g/I川114g/L.229g
5、/L.343g/L.458g/L.573g/L.687g/L) .再加入2.0 mL 5 mol/L氮氧化饵EDTA溶液.1.5 mL 5 g/L AHMT溶液.t下颠倒5次混匀，于室温(20U下放置20mino再加入O. 5mL 15 g/L高楝酸御溶液，上下颠倒30次混匀，准确放置5min，使显色反应完全。然后用10mmtl 色皿，以零管为参比调零，于波长550nm处测量吸光度，绘制标准曲线。A. 4. 2 样品的预处理因为不同的啤酒有不同的色度，要经过蒸馆去除色度的影响。取经过除气的啤酒50mL.置于全玻璃蒸馆器中，加入10时，水.O. 5时.10 %硫酸溶液，1mL 100 g/L乙酸
6、铸溶液以及数粒玻璃珠。以6mL/min10 mL/min馈速蒸惰，收集馆出液45mL并用蒸馈水定容于50mL容量瓶中。93 NY/T 273-2002 A. 4. 3 样晶的测定取馆出液2.5mL(视样品中甲隆含量而定)于10mL比色管中，加水定容至5mL.再加入2.0mL 5 mol/L氢氧化饵-EDTA溶液.1.5 mL 5 g/L AHMT溶液.上下颠倒5次使混匀，于室温(20.C)下放置20min。加入0.5mL 15 g/L离破酸御自5液，上下颠倒30次使混匀，准确放置5min使显色反应完全。用10mm比色皿，以零管为参比调零，于波长550nm处测量吸光度(注意上下颠倒的次数及显色反
7、应时间准确控制儿A.5 计算A. 5. 1 标准曲线的绘制以甲酶的浓度为横坐标，以吸光值为纵坐标，绘制标准曲线。A. 5. 2 樨晶甲踵含量的计算根据样品的吸光值从标准曲线中查出甲隆含量，再乘以稀释倍数。A.6 干扰因素乙醒、丙霞、正丁障、丙烯醋、丁烯醒、乙二腔、苯(甲应、甲醇、乙醇、正丙醇、正丁醇、仲丁蹲、异丁醇、异戊醇、乙酸乙酶对本法无影响。A.7 检测限最低检出浓度为35g/LoA.8 加标圄收率加标回收率范围为97%-101%。26 NY /T 273-2002 附录B(规范性附景啤酒中游离二氧化葡的测定-一-慎滴定法B. 1 原理试样用硫酸酸化，淀粉作指示剂，腆标准溶液滴定，测定游离
8、二氧化硫的含量.滴定反应可表示为gSO，+I，+2H，O一-SO，-+2r+4H+B.2 试剂B. 2. 1 髓自滚滚(25%)。B. 2. 2 确标准溶液。01mol/L) 首先配制0.05rnol/L的模标准溶液.称取比理论量稍多的破(配和0.05 rnol/L模标准溶液约13 g)以每13g破加25g腆化仰的比例加入融化饵，溶于100rnL水中，稀释至1000 rnL.摇匀.然后用0.05rnol/L确标准榕液稀释5倍，并进行标定.B. 2. 2. 1 0.01 mol/L标准溶灌标定用碱式满定管准确量取40.00rnL待标定的模液，置于孩童瓶中，加150rnL水.用相近浓度的标准硫代硫
9、酸铺榕液滴定至近终点溶液呈很浅的曾是黄色)时，加5mL 0.2%的淀粉指示液，继续滴定至溶液蓝色消失，同时用等量的水加0.05mL硕液和5rnL O. 2%淀粉指示液作空白试验，用硫代硫酸铺溶液滴定至溶液蓝色消失.B. 2. 2. 2 计算M川r，-V，、XM=一一一-一一-.HH-.( B. 1 ) V -0.05 式中aM一一碗标准溶液的实际浓度，单位为摩尔每升(mol/L), V，一就代硫酸铺标准液用量，单位为毫升(rnLJI V，一一空白试验硫代硫酸锅标准液用量，单位为毫升(mL), M，一-硫代硫酸销标准液的实际浓度，单位为摩尔每舟(mol/L), V一一硕浓用量，单位为毫升(rnL
10、), 0.05一一空白试验帧液用量，单位为毫升(时_)0 B.2.3 磁代硫11锦标准溶最B. 2. 3. 1 葡代硫醺销标准溶液的配制称取比理论量多的硫代硫酸铀配制0.05mol/L溶液约需26g五水硫代硫酸销或16g硫代硫酸俐).溶于1000 rnL水中。缓缓煮沸10min，冷却，加入0.2g碳酸销.将溶液移人试剂瓶此试剂瓶需用锚酸洗液洗涤，再用煮沸冷却的水充分冲洗).于暗处放置两周后过滤备用.B.2.3.2 辘代硫戳锦标准熔溃的标定用碱式滴定管准确量取40mL硫代硫酸纳溶液，将滴定用基准重错酸惆(已在130C140C干燥3 h4 h.标定0.05mol/L溶液约需O.20 gO. 23
11、g)置于确量瓶中，溶于100曲L水中。加4mL硫酸及2g硫代硫酸销轻轻摇动穰量瓶使二氧化碳逸出。再加2giA化饵，摇匀，于暗处放置10min，加水至200mL.用欲标定的硫代硫酸销溶液满定，近终点溶液呈浅黄绿色)时，加5mL O. 2%淀精指示液，继续滴定至溶液由蓝色变为亮绿色.同时做空白试验。27 NY IT 273-2002 B.2. 3. 3 计算式中sM! = t(V1 G一一重错酸仰的质量，单位为克(g); G V,) X O. 049 03 X 2 v, 标定用硫代硫酸锅溶液的用量，单位为毫升(mL), v2空白试验硫代硫酸销溶液的用量，单位为毫升(mL), M，一一硫代硫酸钩溶液
12、的实际浓度，单位为摩尔每升(mol/L), . ( H. 2) O. 049 03与1.00 mL硫代硫酸例溶液c(Na，S23)=1.000 mol/LJ相当的以克表示的重错酸御的质量，2一硫代硫酸俐的换算系数。B.2.4 淀粉揭示液(0.2%)1.0g可溶性淀粉，加少量水调成糊状，在不断搅拌下注人400时，沸水中，微沸2min，冷却，加水稀释成500mL.为0.2%溶液。在溶液中加入0.5g百里盼或5mg硕化隶可防腐.B.3 操作吸取50时，试样于250mL腆量瓶中，加入5mL硫酸和5mL淀粉指示液，迅速用0.01mol/L破标准溶液滴定至溶液呈浅蓝色，并保持1min-2 min不褪.同时
13、做空白试验-B.4 计算(V-Vo)x品1X64 由于离二氧化硫502，mWUz w IOOO HH-HH-(B.3) 式中=V一试样滴定标准湾液用量，单位为毫升(mL), V。一空白试验标准榕液用量，单位为毫升(mL), M一腆标准溶液的实际浓度，单位为摩尔每升(mol/L), v, 取梓体积，单位为毫升(mL)，64-二氧化硫的换算系数。B.5说明B. 5. 1 试样耍避免与空气接触，只有在滴定时才打开棋量瓶瓶塞，以免二氧化硫逸出和被氧化。B.5.2 漓定温度应保持在20C以下。在离温季节，可先向试液中加入数块冰块，然后再加硫酸酸化。B.5.3 在接近滴定终点时，溶液开始变暗，继而转变为蓝
14、色。2 NY/T 273-2002 附录C(规范性附景)啤酒申硝11根含量的测定一一离子色谱法C. 1 概述C. 1. 1 方法原理本法利用离子交换的原理，对N03离子进行定性和定量分析。水样注入碳酸盐碳酸氢盐溶液并流经一系列的离子交换树脂，基于待测阴离子对低容量强碱性阴离子树脂分离柱)的相对亲和力不同而彼此分开。被分离的阴离子，在流经强酸性阳离子树脂(抑制柱时，被转换为高电导的酸型，碳酸盐碳酸氢盐则转变成弱电导的碳酸(清除背景电导)。用电导检测揣测量被转变为相应酸型的阴离子，与标准进行比较，根据保留时间定性，峰高或峰面积定量。c. 1. 2 干扰及消除任何与待测阴离子保留时间相同的物质均干扰
15、测定。待测离子的浓度在同一数量级可以准确定量。淋洗位置相近的离子浓度相差不大，不能准确测定。当Br和N03离子彼此间浓度相差10倍以上不能定量。采用适当稀释或加入标准的方法等方法可以达到定量的目的。高浓度的有机酸对测定有干扰。水能形成负峰或使峰高降低或倾斜，在F-和Cl间经常出现，采用淋洗液配制标准和稀释样品可以消除水负峰的干扰。C. 2 仪帽C. 2. 1 离子色谱仪Dionex-2010.(具分离柱、抑制柱)。C. 2. 2 检测器(抑制型电导).记录仪。C. 23 微量进样器。C. 2. 4 淋洗器及再生液储罐。C. 3 试剂实验用水均为电导率小于0.5S/cm的二次去离子水。并经0.4
16、5m的微孔滤膜过滤。所用试剂均为优级纯试剂。C. 3. 1 淋洗贮备液分别称取25.44 g碳酸销和26.04 g碳酸氢纳(均已在105C烘干2h.于干燥器中放冷).溶解于水中，移人1000时，容量瓶中，用水稀释到标线，摇匀。贮存于聚乙烯瓶中、在冰箱中保存。碳酸销浓度为0.24mol/L，碳酸氢纳为0.31mol/L. C. 3. 2 琳洗使用渡取20.00 g淋洗贮备液置于2000mL容量瓶中，用水稀释到标线，摇匀。此溶液碳酸氢饷浓度为0.002 4 mol/I斗碳酸氢销为0.003mol/L。C. 3. 3 硝醺根标准贮备液称1.3703g(干燥器中干燥24h).溶于水，移入1000mL容
17、量瓶中，加入10.00mL淋洗贮备液.用水稀释到标线。贮于聚乙烯瓶中，置于冰箱。此榕液相当于含硝酸根为1.00 mg/mL. C. 3. 4 再生液取硫酸1.39 mL于2000时，容量瓶中(瓶中装有少量水).用水稀释到标线。C.4 步骤仪器操作按仪器的使用说明书进行。NY/T 273-2002 C. 4. 1 样晶保存及前处理样品采集后均经0.45m徽孔滤膜，保存于聚乙烯瓶中，置于冰箱中。使用前将样品和淋洗贮备液按99十1体积混合，以除去负峰干扰。C. 4. 2 枝准曲钱分别取2.00、5.00、10.00、50.00mL混合标准溶液与100mL容量瓶中，在分别加1.00 mL淋洗贮备液，用水稀静到标线，摇匀。用测定样品相同的条件进行测定，绘制校准曲线。C. 4. 3 梓晶测定C. 4. 3. 1 色谱条件2淋洗液流速为2.0mL/min.进样量为1L.柱为HPIC-AS3型，电导检测糟灵敏度，根据仪梅情况选择.C.4.3.2 定性分析z根据各离子的出峰保留时间确定离子种类.C. 4. 3. 3 定量分析g测定未知样的峰高.从校准曲线查得其浓度.30
