1、GB/T 19422-2003 前-=目本标准在参考了国内外企业标准的基础上，经实验室验证试验而制定。本标准由国家质量监督检验检疫总局提出。本标准由中国饲料工业标准化技术委员会归口。本标准起草单位g国家饲料质量监督检验中心(北京)、北京桑普生物化学技术有限公司。本标准主要起草人z索德成、施文娟、:XiJ万涵、杨曙明。GB/T 19422-2003 引言L抗坏血酸2磷酸醋是将L抗坏血酸中的不稳定基团(在烯醇上的委主基)与磷酸盐进行酶化反应，生成稳定的抗坏血酸衍生物。该产品作为饲料添加剂在饲料加工和储存过程中具有良好的稳定性，同时又具有很高的生物利用率，为饲料行业广泛接受应用。为了对L-抗坏血酸-
2、2-磷酸醋的质量实施有效控制，规范饲料市场，特制定本标准。GBjT 19422-2003 饲料添加弗tlL-抗坏血酸-2-磷酸醋1 范围本标准规定了饲料添加剂L抗坏血酸-2-磷酸酶的技术要求、试验方法(仲裁法和快速检测法)、检验规则及标签、包装、运输、贮存。本标准适用于以L抗坏血酸与磷酸盐反应所制得的L-抗坏血酸2磷酸醋。本产品可添加于饲料中作为补充L抗坏血酸的营养剂。2 规范性引用文件下列文件中的条款通过本标准的引用而成为本标准的条款。凡是注日期的引用文件，其随后所有的修改单(不包括勘误的内容)或修订版均不适用于本标准，然而，鼓励根据本标准达成协议的各方研究是否可使用这些文件的最新版本。凡是
3、不注目期的引用文件，其最新版本适用于本标准。GBjT 601 化学试剂滴定分析(容量分析)用标准溶液的制备GBjT 602 化学试剂杂质测定用标准溶液的制备GB/T 603 化学试剂试验方法中所用制剂及制品的制备GB/T 5009. 76-2003 食品添加剂中碑的测定GB/T 6435 饲料水分的测定方法GB/T 6682 分析实验室用水规格和试验方法GB 10648 饲料标签GB/T 13080 饲料中铅的测定方法GB/T 18634-2002饲用植酸酶活性的测定分光光度法3 要求3.1 性状本品为类白色或淡黄色的粉末，在光、热和空气中较稳定，易溶于酸中。3.2 技术指标表1技术指标项目L
4、抗坏血酸-2-磷酸醋吉量(以L-抗坏血酸计)干燥失重碑铅4 试验方法% 指标二日5.010.0 运0.0005 口003除非另有说明，在本分析中仅使用确认为分析纯的试剂;蒸馆水或去离子水或符合GB/T6682三级水相当纯度的水;按GB/T601603的要求制备标准溶液;仪器、设备为一般实验室仪器和设备。4.1 试剂和溶液4. 1. 1 硝酸溶液z体积分数为10%。4. 1. 2 氢氧化纳溶液:c(NaOH)=lmol/Lo GB/T 19422-2003 4. 1. 3 硝酸银溶液c(AgN03)0.1mol/L , 4. 1. 4 氨水溶液2体积分数为40%。4. 1. 5 盐酸溶液，c(H
5、Cl)二0.1mol/L , 4. 1. 6 碳酸纳溶液c(Na2C03)0.01mol/L。4. 1. 7 冰乙酸。4.1.8 乙酸溶液2体积分数为5%。4.1.9 2，6二氯能盼销溶液:称取295mg2，6二氯皖盼销溶于1000 mL水中，此溶液可保存l周。4. 1. 10 酸性植酸酶z活性单位1000 U以上，当酶活单位有疑问或长时间存放后需要测定时，按GB/T 18634-2002测定。4. 1. 11 酸性植酸酶溶液=称取1g酸性植酸酶溶于100mL乙酸溶液中。4. 1. 12 偏磷酸溶液z称取1g偏磷酸溶于100mL水中。4. 1. 13 L-抗坏血酸标准溶液z称取0.1g(精确至
6、0.0002g)L抗坏血酸标准品溶于100mL乙酸溶液中，1陆用前配制。4.2 仪器4.2.1 恒温水浴g可控制温度在37C:I:2C。4.2.2 紫外分光光度计。4.3 鉴别试验4.3.1 称取试样2g于100mL烧杯中，加水30mL溶解，过滤。取滤液10mL，加硝酸溶液(4.1. 1) 20 mL，加热20min。取试液5mL，滴加氢氧化纳溶液(4.1.2)至中性，加硝酸银溶液(4.1.3)1 mL，即生成浅黄色沉淀，分离，沉淀在氨水溶液(4.1.4)或硝酸溶液中均易溶解。4.3.2 称取试样0.3g(精确至0.0002 g)于250mL的容量瓶中，加入50mL盐酸溶液(4.1.5)溶解，
7、用碳酸锅溶液(4.1.6)定容。吸取1.0 mL试液于50mL容量瓶中，用碳酸纳溶液定容至刻度。用紫外分光光度计扫描(200nm400 nm) ，L-抗坏血酸-2-磷酸醋在261nm265 nm处有最大吸收。4.3.3 称取试样O.3 gO. 5 g(精确至0.0002g)于100mL的容量瓶中，加人约60mL的乙酸溶液(4.1.剖，在超声水浴中超声10min，用乙酸溶液定容。精密吸取2.0mL试液于50mL小烧杯中，加入2，6二氯能盼销溶液(4.1.的至溶液为粉红色后，加人2mL酸性植酸酶溶液(4.1.11)，于37C水浴上保持30min，红色褪去。4.4 L-抗坏血酸-2-磷酸醋含量测定酶
8、解法(仲裁法)4.4.1 原理在酸性条件下，酸性植酸酶可将L抗坏血酸2磷酸醋水解为L抗坏血酸，用2，6二氯能盼销溶液滴定L-抗坏血酸含量。4.4.2 分析步骤4.4.2.1 称取试样O.3 gO. 5 g(精确至0.0002g)于100mL的容量瓶中，加入5mL冰乙酸(4.1.7)，加人约60mL的水，在超声水浴中保持10min，用水定容。4.4.2.2 吸取10.0mL的试液(4.4.2.1)于100mL具塞三角瓶中，加入5mL偏磷酸溶液(4.1. 1幻，用2，6二氯能盼锅溶液(4.1.的滴定至粉红色并保持30s即为终点。4.4.2.3 分别吸取2.0mL的试液(4.4.2.1)和L抗坏血酸
9、标准溶液(4.1.13)于50mL具塞三角瓶中，分别加人2.0mL的酸性植酸酶溶液(4.1.11)，于37C水浴上水解1h后，加入5mL偏磷酸溶液，用2.6二氯能盼销溶液滴定至粉红色并保持30s即为终点。同时做空白实验。4.4.3 结果计算试样中L-抗坏血酸-2-磷酸醋含量(以L抗坏血酸计)Xj以质量分数(%)表示，可按式(1)计算s(Vj-)X凡X j X 100 ( 1 ) (V, -V,) Xmj GB/T 19422-2003 式中zV , -滴定酶解后的试液所消耗的2，6二氯能酣销溶液的体积，单位为毫升(mL)，V，一一滴定未酶解的试液所消耗的2，6二氯自在盼纳溶液的体积，单位为毫升
10、(mL)，V, 滴定空白所消耗的2，6-二氯能盼纳溶液的体积，单位为毫升(mL)，m，-L抗坏血酸标准品的质量，单位为克(g), V 滴定L-抗坏血酸标准溶液所消耗的2，6-二氯能盼销溶液的体积，单位为毫升(mL)，m，一一-试样的质量，单位为克(g)。计算结果保留两位小数。4.4.4 允许差取两次平行测定结果的算术平均值为测定结果。两次平行测定结果之差不得大于0.5%。4.5 L-抗坏血酸-2-磺酸醋含量测定紫外分光光度法(快速检测法)4.5.1 原理在pH=10的条件下，L-抗坏血酸-2-磷酸酶在263nm处有最大吸收，且符合朗伯比尔定律。据此可测出试样溶液的吸光值，以摩尔吸收系数()计算
11、百分含量。4.5.2 分析步骤4.5.2.1 称取试样约0.3g(准确至0.0002g)，置于250mL棕色容量瓶中，加50mL盐酸溶液(4.1.日，在超声水裕中超声10min，用碳酸纳溶液(4.1.的定容。4.5.2.2 精密吸取1.0 mL试液(4.5. 2. 1)置于50mL棕色容量瓶中，用碳酸纳溶液稀释至刻度，摇匀。4.5.2.3 放置20min后，将试液(4.5.2.2)置于1cm石英比色皿中，用紫外分光光度计于263nm土1nm 处测定吸收值。以碳酸纳溶液为空白。4.5.3 结果计算试样中L抗坏血酸2-磷酸酶含量(以L抗坏血酸计)X2以质量分数(%)表示，可按式(2)计算:A唱X1
12、2. 5 X儿f2=一一一一一一:_:_c:X 100 ( 2 ) 16000 X m, 式中zA，一一试样溶液(4.5.2.2)的吸收度;m2一一试样的质量，单位为克(g), 12.5 试样的稀释倍数gM-L抗坏血酸的摩尔质量，M(L抗坏血酸)=176.13g/mol, 16000-L抗坏血酸2磷酸醋的摩尔吸收系数()。计算结果保留两位小数。4.5.4 允许差取两次平行测定结果的算术平均值为测定结果。两次平行测定结果之差不得大于0.5%。4.6 干燥失重的测定称取试样约1g(准确至0.0002 g)，按照GB/T6435测定。4.7 呻的测定称取试样约1g(准确至0.0002g)，按照GB/
13、T5009. 76-2003中碑斑法测定。4.8 铅的测定称取试样约1g(准确至0.0002 g)，按照GB/T13080测定。5 检验规则5.1 本产品应由生产厂的质量检验部门进行检验，生产厂应保证所有出厂的产品均符合本标准的要GB/T 19422-2003 求，并附有一定格式的质量证明书。5.2 在规定限度内具有同一性质和质量，并在同一连续生产周期中生产出来的一定数量的产品为一批。5.3 使用单位或饲料质检法定机构可按照本标准规定的检验规则和试验方法对所收到的产品进行质量检验，检验其是否符合本标准的要求。5.4 取样方法z抽样需备有清洁、干燥、具有密闭性和避光性的样品瓶，瓶上贴有标签并注明
14、生产厂家、产品名称、批号、取样日期。抽样时，用清洁适用的取样工具插入料层深度3/4处，将所取样品充分混匀，以四分法缩分，每批样品分两份，每份样量应为检验所需试样的3倍量，装入样品瓶中，一瓶供检验用，一瓶密封保存备查。5.5 如果在检验中有一项指标不符合标准要求时，应重新抽样检验。产品重新检验仍有一项不符合标准时，即为整批不能验收。5.6 如果供需双方对产品质量发生异议时，由仲裁单位按本标准的验收规定和检验方法进行仲裁。6 标签、包装、运输、贮存6.1 本产品包装上标签应符合GB10648规定。6.2 本产品应装于防潮的硬纸板桶(箱)中，内衬食品用聚乙烯塑料袋。也可根据用户要求进行包装。6.3 本产品不得与有毒、有害或其他有污染的物品及具有氧化性的物质混装、合运。6.4 本产品应贮存在阴凉、干燥、清洁的室内仓库中，不得与有毒物品混存。6.5 按规定包装，原包装在规定的贮存条件下保质期为24个月(开封后尽快使用，以免受潮)。
