1、ICS 65. 020. 30 B 44 GB 中华人民共和国国家标准dEE 4llnHU 4lnunu nunuL nHUn/一ny一?-7AH户hv41t户。户hv户hu4l，nJ内/n/nuvnudnudnHdnHUanME A斗A斗nt叮lAEE,ABEt-JV 干中4E，nRUAAAA吁户hu户hunkuphunJn/nJnJ nudn叫JvnHdnwdAH.an-AAAAIda-aESEAt-,AEE TTTT JffJ/fJ/JIf BBBB GGGG 实验动物微生物学检测方法(2)Laboratory animal一-Microbiological examination -m
2、ethods 2001 - 08 -29发布2002 - 05 -01实施中华人民共和国国家质量监督检验检菇总局发布GB/ T 14926.49-2001 前本标准规定的猴空肠弯曲杆菌的检测方法，非等效参照国家标准GB4789.9-1994中空肠弯曲杆菌的检测方法以及医学检验中空肠弯曲杆菌的检测方法制定而成。90 本标准由中华人民共和国科学技术部提出并归口。本标准起草单位:中国实验动物学会。本标准主要起草人:范薇。1 范围中华人民共和国国家标准实验动物空肠弯曲杆菌检测方法Laboratory animal-Method for examination of Campylobacter jeju
3、ni 本标准规定了实验动物空肠弯曲杆菌的检测方法。本标准适用于猴空肠弯曲杆菌的检测。2 引用标准GB/ T 14926. 49- 2001 下列标准所包含的条文，通过在本标准中引用而构成为本标准的条文。本标准出版时，所示版本均为有效。所有标准都会被修订，使用本标准的各方应探讨使用下列标准最新版本的可能性。GB/ T 14926.422001实验动物细菌学检测标本采集GB/ T 14926.43-2001 实验动物细菌学检测染色法、培养基和试剂3 原理空肠弯曲杆菌在培养基上有特定的生长、形态和生理生化特征。4 主要设备和材料4. 1 厌氧罐。4.2 t昆合气体5%氧气、10%二氧化碳和85%氮气
4、。4.3 真空泵。5 培养基及试剂5. 1 Cary-Blair运送培养基。5.2 Skirrow琼脂平皿。5.3 改良Camp-BAP琼脂平皿。5.4 血琼脂平皿。5.5 TTC琼脂。5.6 二糖铁琼脂。5. 7 克氏双糖铁琼脂。5. 8 氧化酶试剂。5.9 过氧化氢酶试剂。5.10 甘氨酸培养基。5. 11 硝酸盐培养基。5.12 1%马尿酸铀溶液。中华人民共和国国家质量监督检验检疫总局2001-08-29批准2002- 05 -01实施91 G/ T 14926. 49- 2001 30g秦晓酣酸药敏纸片。5.13 检测程序6 本标改良Camp-BAP琼脂或Skirrow琼脂革兰染色氧化
5、酶显微镜动力观察过氧化氢酶马尿酸纳水解试验叶U试验荼咬酣酸试验问%甘酸耐受试验-mwa氯化纳试验硝酸盐还原试验肉同斗成叫同操作步骤7. 1 采样采取粪便或脏拭子。7. 2 分离培养将已接种的改良Camp-BAP琼脂或Skirrow琼脂尽快放入厌氧罐或玻璃干燥器内。如用厌氧罐，则先抽去罐内空气至负压7.3XIOPa(550mmHg) ，输入混合气使罐内压力恢复于零;再将罐内空气抽92 7 GB/ T 14926.49-2001 至负压7.3X 10 Pa(550 mmHg ) ，同样输入混合气使罐内压力恢复于霉，即可放置温箱培养。如用玻璃干燥器，则按烛缸法进行，待蜡烛熄灭后放入恒温培养箱，(42
6、土1)C培养48儿7.3 鉴定? 3. 1 菌落特征本菌在改良Camp-BAP琼脂或Skirrow琼脂平皿上(42士1)C 48 h可形成两型菌落。第一型菌落不溶血，灰色、扁平、湿润、有光泽，看上去呈水滴样，有从接种线上向外扩散的倾向;第二型菌落也不溶血，常呈分散凸起的单个菌落，直径为12mm，边缘完整、温润、有光泽。7. 3. 2 菌体特征本菌为革兰阴性菌，呈S形、螺旋型或纺锤形，在固体培养基上培养时间过久或条件不适宜的情况下常呈现球形菌。大小为(0.30. 4)mX (1. 53)m。在暗视野显微镜或相差显微镜下观察，动力明显。7. 3. 3 过氧化氢酶和氧化酶试验均为阳性。7. 3. 4
7、 本菌接种克氏双铁或三糖铁(42土1)oC微需氧环境下培养4872h，斜面和底层皆呈碱性反应;硫化氢纸条法显示阳性。7. 3. 5 甘氨酸耐受试验阳性本菌接种于1%甘氨酸培养基中，培养48h呈云雾状生长。? 3. 6 不耐受3.5%氯化铀接种于3.5%氯化纳肉汤培养基培养48h，不生长。? 3. 7 荼睫酣酸试验将本菌涂布血平血，贴上含30月荼呢酣酸药敏纸片，培养48h出现抑菌环。? 3. 8 TTC琼脂试验阳性。将本菌涂布TTC琼脂平皿，培养48h，生长出紫色菌苔井有光浑。7.3.9 马尿酸纳水解试验阳性。7.3.10 硝酸盐还原试验阳性。8 结果报告凡符合上述各项检测结果者作出阳性报告，不
8、符合者作出阴性报告。93 FCON-导.N叮!叮叮.Nm叮CON-5.N叮俨问筒。OONi止.N叮!.N叮FCON-.N白叮!二N叮俨同阁。同阁。同阁。华人民共和国家标准实验动物微生物学检测方法(2)GB/T 14926.1-14926.6-2001 GB/T 14926.8-14926.17 2001 国中GB/T 14926.41-2叫01GB/T 14926.44-14926.49 2001 中国标准出版社出版北京复兴门外三里洞北街16号邮政编码:100045电话:68523946中国标准出版社秦皇岛印刷厂印刷新华书店北京发行所发行各地新华书店经售68517548 普* 印张6字数180千字2002年2月第一次印刷开本880X12301/16 2002年2月第一版印数1-2000峰7巳定价45.00网址书号:155066 1-18097 也略595-547 版权专有侵权必究举报电话;(010)68533533科目GB/T 14926. 1-2001 H
