1、ICS 67.060 X 04 中华人民共和国国家标准GB/T 23818-2009 大豆中眯瞠日林自同类除草剂残留量的测定Determination of imidazolinone herbicide residues in soybean 2009-05-25发布中华人民共和国国家质量监督检验检茂总局中国国家标准化管理委员会2009-09-01实施发布GB/T 23818-2009 目。吕本标准的附录A、附录B均为资料性附录。本标准由国家认证认可监督管理委员会提出并归口。本标准起草单位:中国检验检疫科学研究院、中华人民共和国江西出入境检验检疫局。本标准主要起草人:李晓娟、祁彦、张新忠、占
2、春瑞、陈冬东、代汉慧、彭涛、贾然、李建忠、杨强、李淑娟、储晓刚。I GB/T 23818-2009 大豆中咪瞠琳嗣类除草剂残留量的测定1 范围本标准规定了大豆籽粒中眯瞠烟酸、甲基眯草烟、咪草酸甲醋、眯瞠乙烟酸、咪瞠喳琳酸残留量的高效液相色谱和液相色谱-质谱/质谱测定方法。本标准适用于大豆籽粒中咪瞠烟酸、甲基眯草烟、咪草酸甲醋、咪瞠乙烟酸、咪哇哇琳酸残留量的测定。2 规范性引用文件下列文件中的条款通过本标准的引用而成为本标准的条款。凡是注日期的引用文件，其随后所有的修改单(不包括勘误的内容)或修订版均不适用于本标准，然而，鼓励根据本标准达成协议的各方研究是否可使用这些文件的最新版本。凡是不注日期
3、的引用文件，其最新版本适用于本标准。GB/T 6682 分析实验室用水规格和试验方法(GB/T6682二2008，ISO3696:1987 , MOD) 3 原理试样用二氯甲统提取，凝胶渗透色谱法和液液分配法净化，高效液相色谱法和液相色谱-质谱/质谱法测定，外标法定量。4 试剂和材料除非另有说明，所有试剂均为分析纯，水为GB/T6682规定的一级水。4. 1 乙睛:色谱纯。4.2 正己烧z色谱纯。4.3 二氯甲:皖。4.4 磷酸。4.5 滤膜:0.22m，有机相。4.6 标准物质4.6.1 咪瞠烟酸(imazapyr，CASNo. 81334-34-1):纯度大于等于99%。4.6.2 甲基咪
4、草烟(imazapic，CAS No. 104098-48-8):纯度大于等于99%。4.6.3 眯草酸甲醋(imazamethabenz-methyl，CAS No. 81405-85-8) :纯度大于等于99.5%。4.6.4 咪瞠乙烟酸(imazethapyr，CASNo. 81335-77-曰:纯度大于等于99%。4.6.5 眯哇哇琳酸(imazaquin，CASNo. 81335-37-7):纯度大于等于99.5%。4. 7 标准储备溶液:分别准确称取各标准物质10mg(精确至0.1mg)，用乙睛溶解并定容至100mL , 配制成浓度为100g/mL的标准储备溶液，各标准储备溶液于o
5、oC -4 oC避光保存。5 仪器和设备5. 1 高效液相色谱仪z配有紫外检测器。5.2 液相色谱-质谱/质谱仪=配有电喷雾电离源。5.3 粉碎机。5.4 样品筛z筛孔尺寸0.425mmo 5.5 分析天平:感量为0.1mg和1mg。1 G/T 23818-2009 5.6 涡旋混合器。5. 7 振荡器。5.8 旋转蒸发仪。5.9 离心机。5. 10 具塞离心管。5. 11 凝胶渗透色谱仪:填料BiobeadsS-X3 , 40 g;玻璃柱700mmX 25 mm;流动相二氯甲烧;流动相流速5.0mL/min;进样量5.0mL;检测波长250nmo 6 试样制备与保存6. 1 试样制备取代表性
6、试样500g，用粉碎机粉碎并使其全部通过0.425mm的样品筛，混和均匀，装入洁净的容器内，密封并标识。6.2 试样保存试样于ooC ,._, 4 oC避光保存。取样、制样及保存过程中应防止试样受到污染或者残留农药含量发生变化。7 分析步骤7. 1 提取准确称取5g试样精确至0.01g)于50mL具塞离心管中，向离心管中加入35mL二氯甲烧，涡旋混合2min后置于振荡器上振荡提取20min，以4000 r/min速度离心5min，取上层清液并经二氯甲炕润湿的滤纸过滤后，收集于100mL梨形瓶中。再向残余试样中加入35mL二氯甲;皖，重复上述操作。再用10mL二氯甲烧分3次，._.5次洗涤离心管
7、和滤纸，合并洗涤液于梨形瓶中，于400C水浴中减压浓缩至约3mL。将浓缩液用二氯甲烧定容至10mL，以4000 r/min速度离心5min，再将上层清液转移至GPC进样瓶中，待净化。7.2 净化样品提取液首先采用凝胶渗透色谱法净化，在5.11的仪器条件下，收集第13.80 min_ 22. 8 min 的馆分共45mL，于400C水浴中减压浓缩至近干，再用氮气吹干。用2mL乙腊溶解残渣，再加入2mL 乙腊饱和的正己烧，涡旋振荡2min，静置分层后弃去正己烧层，乙腊层用氮气吹干。再用乙腊定容至1. 0 mL，供HPLC和LC-MS/MS测定。7.3 高效液相色谱和液相色谱-质谱/质谱测定7.3.
8、 1 高效液相色谱法参考条件a) 色谱柱:C18柱，250mmX4. 6 mm(内径)，5m，或相当者zb) 柱温:30oC; c) 流动相及梯度洗脱程序参见附录A;d) 流速:1. 0 mL/min; e) 进样量:10L; f) 检测波长:250nmo 7.3.2 液相色谱-质谱/质谱法参考条件a) 色谱柱:C18柱，150mmX 2.1 mm(内径), 3. 5m，或相当者;b) 柱温:30oC; c) 流动相及梯度洗脱程序参见附录A;d) 流速:0.2mL/min; e) 进样量:10L;2 GB/T 23818-2009 f) 质谱/质谱参考条件参见附录A。7.3.3 定量测定7.3
9、.3.1 HPLC法:根据样液中眯哇琳酣类除草剂的含量，选取浓度相近的标准工作溶液，待测样液中眯瞠琳酣类除草剂的响应值应在仪器检测的线性范围内。对标准工作溶液及样液等体积交替进样测定。在7.3.1的仪器条件下，保留时间约为咪瞠烟酸8.60min，甲基咪草烟11.50 min，咪草酸甲醋13.73 min，咪瞠乙烟酸15.98min，眯瞠哇琳酸20.38min，色谱图参见附录B中图B.10 7.3.3.2 LC-MS/MS法:根据样液中咪瞠琳酣类除草剂的含量，选取浓度相近的标准工作溶液，待测样液中咪瞠琳酣类除草剂的响应值应在仪器检测的线性范围内。对标准工作溶液及样液等体积交替进样测定。在7.3.
10、2的仪器条件下，保留时间约为咪瞠烟酸5.21min，甲基咪草烟6.63min，眯草酸甲酶7.03 min，咪瞠乙烟酸7.29min，咪瞠喳琳酸7.78min，多反应监视l质量色谱图参见附录B中图B.20 7.3.4 定性测定按照上述条件测定试样和标准溶液，如果试样中化合物质量色谱峰的保留时间与标准溶液相比在士2.5%的允许偏差之内;样品中待测组分的两个子离子的相对丰度与浓度相当的标准溶液相比，相对丰度偏差不超过表1的规定，则可判断试样中存在相应的目标化合物。表1定性离子相对丰度的最大允许偏差相对离子丰度/%允许的最大偏差/%7.4 空白试验50 士202050 士25除不称取试样外，均按上述条
11、件和步骤进行。8 结果计算与表达试样中待测化合物的残留量可采用数据处理软件或按式(1)计算:式中zX; = Ci X V ?1020 :1: 30 C;-一从标准曲线中得到的待测化合物的浓度，单位为微克每毫升(g/mL); V一一一样液最终定容体积，单位为毫升(mL);m一一最终样液所代表的试样质量，单位为克(g)。9 测定低限和回收率9. 1 测定低限10 士50. ( 1 ) 本标准液相色谱法对各待测物的测定低限为0.05mg/kg;液相色谱-质谱/质谱法对各待测物的测定低限为0.02mg/kg。9.2 回收率本标准高效液相色谱法在添加浓度O.05 mg/kg- 1. 00 mg/kg范围
12、内，回收率在88.2 % - 105. 9 % 之间;本标准液相色谱一质谱/质谱法在添加浓度O.02 mg/kg.-._, 1. 00 mg/kg范围内，回收率在81.8%-.，103.9%之间。3 GB/T 23818-2009 4 附录A(资料性附录)高效液相色谱法和液相色谱-质谱/质谱法测定参数1)表A.1HPLC流动相梯度洗脱条件洗脱时间/min磷酸水溶液(pH2.5)/ % 乙腊/%0.00 90 10 1. 75 80 20 14.00 68 32 20.00 62 38 23.00 54 46 23.01 10 90 28.00 。100 28.01 90 10 35.00 90
13、 10 表A.2LC-MS/MS流动相梯度洗脱程序洗脱时间/min0.1%甲酸水溶液/%乙腊/%0.00 90 10 5.00 30 70 10.00 10 90 18.00 90 10 表A.3LC-MS/MS质谱条件电离方式ESI+ 毛细管电压3.0 kV 源温度120 c 去溶剂温度350 .C 锥孔气流氮气，100L/h 去溶剂气流氮气，600L/h 碰撞气压氧气，2.50X 10-5 Pa 监测模式多反应监测(MRM)1) 非商业性声明:附录A所列参数是在WatersQuattro Ultima Pt质谱仪上完成的，此处列出试验用仪器型号仅是为了提供参考，并不涉及商业目的，鼓励标准使
14、用者尝试采用不同厂家或型号的仪器。GB/T 23818-2009 表A.4 LC-MS/MS多反应监测j条件农药名称母离子子离子驻留时间/s锥孔电压/V碰撞能量/eVCm/z) Cm/z) 2178 0.2 17 眯瞠烟酸262 40 234 0.2 15 2348 0.2 18 甲基眯草烟276 40 248 0.2 22 229 0.2 18 咪草酸甲醋289 40 257 0.2 23 230. 0.2 18 眯瞠乙烟酸290 40 247.8 0.2 23 270 0.2 19 眯哇哇琳酸312 40 252 0.2 26 a为定量离子。5 GB/T 23818-2009 附录B(资料
15、性附录)咪睡时非翻类农药标准物质液相色谱固和多反应监测离子流色谱图6 mAU 6 5 4 3 。一1-2 8 1一一咪瞠烟酸;2二甲基眯草烟;3一一咪瞠乙烟酸;4一一一眯草酸甲醋;5 咪哇哇琳酸。1一-咪瞠烟酸;2二二甲基眯草烟;3 眯瞠乙烟酸;4二一一咪草酸甲醋;5 咪哇哇琳酸。10 2.00 2.00 2.00 2 3 4 12 14 16 图B.1 标准物质液相色谱图7.78 4.00 6.00 8.00 10.00 7.78 E 町, I . , I , I 4.00 6.00 8.00 10.00 7.29 4.00 6.00 8.00 10.00 18 12.00 5 A 20 t
16、lmin 312270 ,.-.- tlmin 14.00 312252 -1 .r- tlmin 12.00 14.00 290230 甘mm12.00 14.00 图B.2标准物质多反应监测离子流色谱图14t唱444-4414%0 -A 444444444%0 唱-A111 %0 L zdJJE唱4444Anu-onu nuo/ ti 2.00 4.00 丁10.00 10.00 10.00 TTY-r-T 10.00 10.00 r-r-r GB/T 23818-2009 290248 E，tJmin 12.00 14.00 289229 12.00 T.。-。-一_tJmin14 28
17、9257 tJmin 14.00 276234 2.00 4.00 6.00 nunu nunu-83J8qdFOE-anHH川., 哼4TTTTT 12.00 E . 11 I 1.的mn12.00 14.00 276248 12.00 tJmin V叮2.0。7.03 13 4.00 6.00 8.00 6.63 12 4.00 6.00 8.00 6.63 2 1 4.00 6.00 8.00 14.00 5.21 262217 100 :1 _. 1 %3j飞o 1 i i i i i i i i i i i i i I i II i i i i i i i f i i、n-，.i i
18、 . j I i , i j i i i i i , i i i i i , i i i i i , .t/min 2.00 4.00 6.00 8.00 10.00 12.00 14.00 iL 丁2.00 2.00 5.21 八12.00 4.00 6.00 8.00 图B.2(续)262234 1. I i I i I I i i i I i i i i tJmin 10.00 12.00 14.00 goNiE的NH阁。华人民共和国家标准大豆中眯瞠琳固类除草剂残留量的测定GB/T 23818-2009 国中赞中国标准出版社出版发行北京复兴门外三里河北街16号邮政编码:100045网址电话:6852394668517548 中国标准出版社秦皇岛印刷厂印刷各地新华书店经销导印张O.75 字数15千字2009年8月第一次印刷开本880X12301/16 2009年8月第一版9导定价16.00元如有印装差错由本社发行中心调换版权专有侵权必究举报电话:(010)68533533书号:155066 1-38304 GB/T 23818-2009 打印f=J期:2009年11月16日
