1、ICS 65020B 04中华人民 共禾口 国国家标准农业部953号公告一932007转基因植物及其产品环境安全检测抗病水稻第3部分：外源基因漂移Evaluation of environmental impact of genetically modifiedplants and its derived productsDisease-resistant ricePart 3：Gene flow20071218发布 20080301实施中华人民共和国农业部发布前 言农业部953号公告-9 32007本标准由中华人民共和国农业部提出。本标准由全国农业转基因生物安全管理标准化技术委员会归1：3。
2、本标准起草单位：中国农业科学院生物技术研究所、农业部科技发展中心、中国农业科学院植物保护研究所、中国水稻研究所。本标准主要起草人：金芜军、宋贵文、傅强、黄世文、彭于发、王锡锋、张永军、宛煜嵩、沈平。农业部953号公告一9 32007转基因植物及其产品环境安全检测抗病水稻第3部分：外源基因漂移1范围本标准规定了转基因抗细菌病害白叶枯病水稻外源基因漂移的检测方法。本标准适用于转基因抗白叶枯病水稻与普通栽培水稻、野生稻、杂草稻的异交率以及外源基因漂移距离和频率的检测。2规范性引用文件下列文件中的条款通过本标准的引用而成为本标准的条款。凡是注日期的引用文件，其随后所有的修改单(不包括勘误的内容)或修订
3、版均不适用于本标准。然而，鼓励根据本标准达成协议的各研究和检测单位使用这些文件的最新版本。凡是不注日期的引用文件，其最新版本适用于本标准。GB 44041粮食作物种子禾谷类农业部953号公告912007转基因植物及其产品环境安全检测抗病水稻第1部分：对靶标病害的抗性3术语和定义下列术语和定义适用于本标准。31基因漂移gene flow转基因抗病水稻中的外源基因向普通栽培水稻、杂草稻或相关野生稻自然转移的行为。3 2异交率outcrossing rate转基因抗病水稻与普通栽培水稻、杂草稻或相关野生稻发生自然杂交的比率。4要求4 1试验材料转基因抗病水稻品种(系)、生育期相当的普通栽培水稻、杂草
4、稻和普通野生稻。上述材料的质量应达到GB 44041中不低于二级水稻种子的要求。4 2其他要求按农业部953号公告一912007中“4要求”执行。5试验方法5 1 与普通野生稻、杂草稻及常规栽培水稻不同基因型异交率5 11试验设计接当地常规种植密度单行相问种植，按对比法顺序排列。试验小区面积不少于10“f，3次重复。5 1 2播种转基因抗病水稻宜分期播种，应使之与受体材料花期相遇。按常规播种量播种、常规栽培方式管1农业部953号公告一932007理。5 1 3检测和记录将收获的非转基因材料种子(每处理不少于l 000粒，少于1 000粒需要全部检测)在温室或田问种植，出苗后进行生物学测定或分子
5、生物学方法检测，记录含有外源基因的植株数。51 4结果表述异交率接下列公式计算。P一=N100式中：P异交率，单位为百分率()；N检测的含有外源基因的植株数，单位为株；T播种后出苗总数，单位为株。5 1 5结果分析采用方差分析方法比较转基因抗病水稻与普通野生稻、杂草稻及常规栽培水稻不同基因型异交率的差异。5 2基因漂移距离和漂移频率52 1试验设计试验地面积不小于10 000 m2(i00 mXl00 m)，在其中央划出一个25 m2(5 mX 5 m)小区种植转基因抗病水稻，周围种植非转基因水稻。5 2 2播种转基因抗病水稻宜分期播种，应使之与非转基因水稻花期相遇。按常规播种量播种。秧龄25
6、 d30 d(或转基因抗病水稻品种推荐秧龄)移栽，密度z5万株30万株hm2。5 2 3调查方法沿试验地对角线的4个方向，分别用A、B、C、D标记，距转基因抗病水稻种植区1 ITI、2 112、5 In、10m、20m和50m，每点随机收获10株水稻并分别标记为AI、A2、A3，晒干后用于进一步检测。记录每点收获的籽粒总数。5 2 4检测方法(5 2 4 1和5 2 4 2任选其一)52 4 1生物学检测收获后的种子当年在温室条件下或次年田间种植，根据转基因抗病水稻中筛选标记的生化特性(如抗生素抗性、除草剂抗性或显色反应等)对水稻幼苗进行检测，确定是否含有外源基因。5 2 4 2分子检测采用分子生物学方法对水稻幼苗中DNA或蛋白质进行检测、验证，确定是否含外源基因。5 2 5结果分析与表述按异交率计算公式计算不同距离的漂移频率。用方差分析方法比较转基因抗病水稻中外源基因的漂移距离和不同距离的漂移频率。
