1、GB 945588 1 主题内容与适用范围 本标准规定了饲料添加剂维生素A/D3微粒的产品规格、技术要求、试验方法、检验规则及其标志、包装、运输、贮存要求。 本标准适用于以维生素A乙酸酯原油与含量为130万IU/g以上的维生素D3原油为原料，配以一定 量BHT及乙氧喹啉作稳定剂，采用明胶和淀粉等辅料，经喷雾制 法制成的微粒，每克含维生素A乙酸 酯（C12H32O2）和维生素D3（C27H44O）之比为51，其含量应为标示量的85以上，本品在饲料工业中作为维生素类饲料添加剂。 2 引用标准 GB 7292 饲料添加剂维生素A乙酸酯微粒 中国人民共和国药典1985年版二部 3 产品规格（标示量）
2、3.1 VA 50万IU/g，V D310万IU/g；3.2 VA 40万IU/g，V D38万IU/g。4 技术要求 4.1 外观和性状 本品为黄色或棕色微粒，遇热，见光或吸潮后易分解、降解，使含量下降，在40水中，成乳化状。 4.2 项目和指标 5 试验方法 项 目 指 标含量，标示量的 85.0102.0颗粒重，通过2号筛 100.0干燥失度， 5.0页码，1/8GB 9455882006-3-30file:/C:InetpubwwwrootdatagbbB945500A.htm5.1 试剂和溶液 本标准所用试剂除另有规定外均为分析纯，水为蒸馏水或相应纯度的水。 5.1.1 无水乙醇（G
3、B 678）； 5.1.2 三氯甲烷（氯仿）（GB 682）； 5.1.3 三氯化锑（HG31061）； 5.1.4 三氯化锑氯仿溶液：取三氯化锑1g加氯仿4mL溶解即成。 5.1.5 乙酸酐（GB 677）； 5.1.6 硫酸（GB 625）； 5.1.7 95乙醇（GB 679）； 5.1.8 氢氧化钾（GB 2306）； 5.1.9 50（ W W）氢氧化钾溶液：取氢氧化钾与水11混合溶解摇匀即成； 5.1.10 0.5molL乙醇制氢氧化钾液：按中国药典1985年版二部附录128页制备； 5.1.11 抗坏血酸； 5.1.12 1molL氢氧化钠液：按中国药典1985年版二部附录130
4、页制备； 5.1.13 抗坏血酸钠溶液：取3.5g抗坏血酸，溶解于20mL1molL氢氧化钠液中即成； 5.1.14 乙醚（HG 31002）：不含过氧化物。按中国药典1985年版二部附录56页制备； 5.1.15 碱性洗涤液：取1份0.5molL乙醇制氢氧化钾溶液，8份水，1份95乙醇混匀即成；5.1.16 酚酞（HGB 3039）； 5.1.17 酚酞指示液：取酚酞1g，加95乙醇使成100mL即成； 5.1.18 异丙醇（HG 31167）：光学纯； 5.1.19 正戊醇； 5.1.20 正己烷：优级纯； 5.1.21 甲醇（GB 683）：色谱纯； 5.1.22 乙腈（HGB 3329
5、）：色谱纯； 5.1.23 BHT（2，6-叔丁基-4-甲基苯酚）； 5.1.24 维生素D3标准品（卫生部发布）；页码，2/8GB 9455882006-3-30file:/C:InetpubwwwrootdatagbbB945500A.htm5.1.25 对-二甲氨基苯甲醛（HGB 3486）（用做内标物）； 5.1.26 维生素D3标准贮备液：称取维生素D3标准品20mg，（称准至0.0002g）于100mL棕色量瓶中，加正己烷及数粒BHT溶解并稀释至刻度，摇匀； 5.1.27 内标贮备液：取内标物0.2g（称准至0.0002g）于100mL棕色量瓶中，加5mL无水乙醇溶解，并用正己烷稀
6、释至刻度，摇匀； 5.1.28 内标分析液：精密吸取2mL内标贮备液并用正己烷稀释至100mL，摇匀； 5.1.29 丙三醇（甘油）（GB 687）； 5.1.30 可溶性淀粉； 5.1.31 甘油淀粉润滑油：取甘油22g，加入可溶性淀粉9g，加热至140保持 30min，并不断搅拌，放冷即得。 5.2 仪器和设备 实验室一般仪器和设备 5.2.1 筛网：孔径85029 m（2号筛）； 5.2.2 旋转蒸发器； 5.2.3 紫外分光光度计； 5.2.4 高压液相色谱仪。 5.3 鉴别试验 5.3.1 称取本品100mg用无水乙醇湿润后，在研钵中研磨数分钟，加氯仿10mL搅拌、过滤，取溶液2mL
7、于试管中，加三氯化锑氯仿溶液0.5mL，即显蓝色，并立即褪色（VA）。 5.3.2 称取本品100mg，加氯仿10mL研磨数分钟过滤，取滤液5mL，加乙酸酐0.3mL，硫酸0.1mL，振摇，初显黄色，渐变红色，迅即变为紫色，最后呈绿色，（VD3）。 5.4 颗粒度检查 取本品适量倾入筛网中，适当振摇，应100通过。 5.5 干燥失重 5.5.1 测试方法 称取本品1g，（称准至0.0002g）置于已干燥至恒重的称量瓶中，置电热恒温箱中，保持105干燥至恒重，减失重量，不得超过5.0。 5.5.2 计算和结果的表示 样品干燥失重按式（1）计算： 页码，3/8GB 9455882006-3-30f
8、ile:/C:InetpubwwwrootdatagbbB945500A.htm5.6 含量测定 5.6.1 样品前处理 a. 称取样品适量，使含维生素A乙酸酯10万国际单位（称准至0.0002g），置皂化瓶中；b. 加95乙醇20mL，20抗坏血酸钠溶液（临用新配）5mL，50氢氧化钾溶液（临用新配）3mL，置90水浴回流30min，迅速冷却； c. 自冷凝管顶端加水25mL，冲洗冷凝管的内壁，将皂化液移至500mL（甲）分液漏斗中（分液漏斗活塞涂以甘油淀粉润滑剂）； d. 皂化瓶用215mL水，210mL乙醇清洗，皂化瓶洗液并入（甲）分液漏斗中； e. （甲）分液漏斗用不含过氧化物的乙醚2
9、50mL振摇30s，静置，分层，把水层转移至250mL（乙）分液漏斗中； f. 水层用10mL乙醇，50mL乙醚，振摇30s静置，分层。把水层转移至皂化瓶中，把乙醚层转移至（甲）分液漏斗中，用210mL乙醚洗涤（乙）分液漏斗，洗液合并在（甲）分液漏斗中； g. 把水层再转移到（乙）分液漏斗中，用50mL乙醚提取一次，弃去水层，乙醚层再并入（甲）分液漏斗中； h. 合并后的乙醚液用250mL碱性洗涤液洗涤，振摇，静置分层，弃去水层； i. 乙醚液用每次50mL水洗涤，直至洗涤液遇酚酞液不显红色为止； j. 将乙醚层放入250mL量瓶中，用适量乙醚洗涤（甲）分液漏斗，洗液并入量瓶，用乙醚稀至刻度并
10、摇匀。 5.6.2 维生素A乙酸酯含量测定 5.6.2.1 测定方法 精密量取2mL乙醚液于100mL量瓶中，迅速加入异丙醇溶解，并稀释至刻度，使成每毫升中含维生素A乙酸酯1015国际单位，摇匀。用紫外分光光度计测定，以1cm石英比色皿，在300nm、310nm、325nm、334nm四个波长处测定其吸收度，并测定吸收峰的波长。最大吸收峰的波长应在323327nm之间，且300nm波长处的吸收度与325nm波长处的吸收度的比值应不超过0.73。 5.6.2.2 计算和结果的表示 X（）（ G1 G2） G100（1）式中： X样品干燥失重率，；G1干燥前的样品加称量瓶重量，g；G2干燥后的样品
11、加称量瓶重量，g；G样品的重量，g。页码，4/8GB 9455882006-3-30file:/C:InetpubwwwrootdatagbbB945500A.htm 按GB 7292第3.4项表示。 5.6.3 维生素D3含量测定5.6.3.1 高压液相色谱分离VA、VD35.6.3.1.1 测试条件 a. 高压液相色谱仪； b. 紫外检测器：波长254nm； c. 分离柱：C8硅胶柱；UBONDAPAK C810m；d. 流动相：甲醇乙腈水=20020035（水量可适当调节，使VD3的 Rf约7min）；e. 流速：1.5mLmin； f. 灵敏度：1.0 AUFS； 5.6.3.1.2
12、分离方法 a.试液的制备：吸取5.6.1j项下的乙醚液50mL于100mL皂化瓶中，加1mL内标贮备液，数粒抗氧剂（BHT），置于旋转蒸发器上，保持60真空蒸发至干，冷却。精密加入甲醇：乙腈=11的溶液5mL溶解残留物； b. 操作：进a项供试液500mL于分离柱，收集59min（可根据具体情况而定）流出液，于50 L皂化瓶中，加数粒抗氧剂（BHT），装于旋转蒸发器上60真空蒸发至干，冷却。精密加内标分析液5mL，溶解待测。 5.6.3.2 测定方法 5.6.3.2.1 测试条件 a. 高压液相色谱仪； b. 紫外检测器：波长254nm； c. 分析柱：硅胶柱 Lichrosorb Sibo
13、5 m； d. 流动相：正己烷：正戊醇=1000：3； e. 流速：2.0mL/min； f. 灵敏度：0.05 AUFS。 5.6.3.2.2 测试方法：用微量注射器，精密吸取上述试液500 L注进分析柱，记录所得色谱峰。 5.6.3.2.3 计算和结果的表示如附录A所示。 页码，5/8GB 9455882006-3-30file:/C:InetpubwwwrootdatagbbB945500A.htm6 检验规则 6.1 本产品应由生产厂的质量检验部门进行检验，生产厂保证所有出厂的产品均符合标准的要求，每批出厂的产品，都应附有质量检验合格证明书。 6.2 使用单位可按照本标准规定的检验规则
14、、技术要求和测试方法，验收本产品。 6.3 取样方法 取样需备有清洁、干燥、密闭、避光性的样品瓶，并贴有标签，注明生产厂名称、产品名称、批号及取样日期。抽样时，应用不锈钢抽样针，每桶抽样适量，盛于样品盘中，充分均匀后，取出2030g，装入样品瓶中，送化验室分析和留样。 6.4 如果在检验中有一项指标不符合标准时，应重新抽样，进行复核，产品重新检验，检验结果即使只有一项指标不符合标准时，则整批不能验收。 6.5 如供需双方对产品质量发生异议时，可由双方协商选定仲裁单位，按本标准的检验规则和检验方法进行仲裁检验。 7 标志、包装、运输和贮存 7.1 标志 7.1.1 采用鲜明标签，贴于桶的23处。
15、 7.1.2 标签内容 生产厂名、产品名称、注册商标、批准文号、批号、净重、规格。 7.2 包装 内衬二层聚乙烯袋，密封，盛于外包装容器内。 7.3 运输 运输必须有遮盖物，避免日晒，雨淋，受热及撞击，搬运装卸小心轻放，不得倒置，不得与有毒物质混装、混运。 7.4 贮存 应保存于阴凉干燥的仓库中，避免受潮进水和受热，本品不得与有毒、有害或有酸味物质一起堆放。原包装负责期为一年。 附 录 A 维生素D3含量测定中计算和结果的表示（补充件） A1 样品中VD3含量按A1式计算页码，6/8GB 9455882006-3-30file:/C:InetpubwwwrootdatagbbB945500A.
16、htmA2 FD（校正因子）的测定与计算分别准确吸取VD3标准贮备液5mL和内标贮备液5mL，放入50ml 棕色量瓶中，加正己烷稀释至刻度，混匀，过滤，取100 L过滤液注入分析柱。 计算： A3 Fpre（预VD3）校正因子测定与计算精确吸取5mLVD3标准贮备液，于100mL皂化瓶中，加数粒BHT，置90水浴，避光回流45min，冷却，转移至50mL棕色量瓶中，加5mL内标贮备液，用正己烷稀释至刻度，混匀，取100L注入分析柱。 A3.1 Fpre（预VD3）校正因子计算：（A1）式中： PD 供试品中VD3峰的响应值；Ppre 预VD3峰响应值；F预VD3的转换因子；Fp校正因子；Win
17、内标物称量，g；Vs供试品的稀释倍数；Pin内标物峰的响应值；Vin内标物稀释倍数；Ws供试品称量，g。FD Pin Wr Vin Pr Win Vr（A2）式中： Pin内标峰响应值；WrVD3标准品称量，g；Vin内标稀释倍数；PrVD3标准品峰响应值；Win内标物称量，g；VrVD3标准品稀释倍数。Fpre P% Pin Wr Vin Ppre Win Vpre100（A3）式中： P 转化的预VD3百分含量；Pin内标峰响应值；页码，7/8GB 9455882006-3-30file:/C:InetpubwwwrootdatagbbB945500A.htmA3.2 q（未转化VD3含量）的计算：A3.3 P转化的预VD3含量计算：A4 F（P-VD3转化成VD3）-预VD3转化因子的计算Wr VD3标准品称量，g；Vin内标稀释倍数；Ppre 预VD3峰的响应值；Win内标物称量，g；Vpre VD3标准品稀释倍数。（A4）式中： FD校正因子；PD标准品中未转化的VD3响应值；Win内标物称量，g；VrVD3标准品稀释倍数；Pin内标峰响应值；WrVD3标准品称量，g；Vin内标稀释倍数。P%100 q（A5）F Fpre FD（A6）页码，8/8GB 9455882006-3-30file:/C:InetpubwwwrootdatagbbB945500A.htm
