1、ICS 65.020.30 B 40 GB 中华人民共和国国家标准GB/T 20365-2006 硫酸软骨素和盐酸氨基葡萄糖含量的测定液相色谱法Determination method for chondroitin sulfate and glucosamine hydrochloride一Liquid chromatography method 2006-05-25发布中华人民共和国国家质量监督检验检疫总局中国国家标准化管理委员会2006-09-01实施中华人民共和国国家标准硫酸软骨素和盐酸氨基葡萄糖含量的测定液捆色谱法GB/T 20365 -2006 9峰中国标准出版社出版发行北京复兴门
2、外三里河北街16号邮政编码:100045网址电话:6852394668517548 中国标准出版社秦皇岛印刷厂印刷各地新华书店经销9导开本880X1230 1/16 印张O.5 字数9千字2006年9月第一版2006年9月第一次印刷祷书号:155066. 1-28121 定价8.00元如有印装差错由本社发行中心调换版权专有侵权必究举报电话:(010)68533533G/T 20365-2006 前言本标准的附录A和附录B为资料性附录。本标准由中华人民共和国山东出入境检验检疫局提出。本标准由中华人民共和国山东出入境检验检疫局负责起草。本标准主要起草人:牛增元、王岩、孙忠松、袁玲玲、王境堂、纪雷。
3、1 范围硫酸软骨素和盐酸氨基葡萄糖含量的测定液相色谱法G/T 20365-2006 本标准规定了用液相色谱法测定硫酸软骨素和盐酸氨基葡萄糖含量的方法。本标准适用于从牛、猪和皇室鱼等动物软骨组织中提取的硫酸软骨素及其中的盐酸氨基葡萄糖的测定。2 规范性引用文件下列标准文件中的条款通过本标准的引用而成为本标准的条款。凡是注日期的引用文件，其随后所有的修改单(不包括勘误的内容)或修订版均不适用于本标准，然而，鼓励根据本标准达成协议的各方研究是否可使用这些文件的最新版本。凡是不注日期的引用文件，其最新版本适用于本标准。GB/T 6682 分析实验室用水规格和试验方法(GB/T6682-1992 , n
4、eq ISO 3696 :1 98 7) 3 原理用乙腊将硫酸软骨素样品分散均匀，以水榕解，经液相色谱分离后，在波长192nm测定，外标法定量。4 试剂和材料4.1 水:GB/T6682规定的一级水。4.2 乙睛:液相色i晋级。4. 3 戊炕磺酸铀:纯度二三99.5%。4.4 硫酸软骨素A标准品:纯度约70%，其余为硫酸软骨素C，结构式参见附录A。4.5 硫酸软骨素B标准品:纯度约90%，其余为硫酸软骨素A和C，结构式参见附录A。4.6 硫酸软骨素C标准品:纯度约90%，其余为硫酸软骨素A，结构式参见附录A。4. 7 盐酸氨基葡萄糖:纯度二三99.0%。4.8 标准溶液:称取25.0mg经10
5、50C干燥4h的硫酸软骨素标准品A(或B，或C)和25.0mg盐酸氨基葡萄糖于烧杯中，加入5.0mL乙睛，振荡使其分散均匀，再加入水，用超声波使其溶解，转移至50 mL容量瓶中，用水定容至刻度，硫酸软骨素放度约为0.5mg/mL，盐酸氨基葡萄糖浓度约为0.5 mg/mL。4.9 戊皖磺酸饷潜液:称取0.87g戊炕磺酸饷溶液用500mL水溶解，该溶液的浓度为10mmol/L。5 仪器和设备5.1 超声波发生器。5.2 分析天平:感量为0.1mg。5.3 高效液相色谱仪:配有二极管阵列检测器或紫外检测器。5.4 滤膜:聚四氟乙烯膜(PTFE)，0.2m。GB/T 20365:_2006 6 测定步
6、骤6.1 样品溶液的制备当样品是颗粒状态时，需要先将其在研钵中研细成粉末。将粉末状样品在1050C下干燥4h。称取25.0mg样品于50mL烧杯中，加入5.0mL乙脯，振荡使其分散均匀，再加入水，用超声波使其溶解，转移至50mL容量瓶中，用水定容至刻度，摇匀。用液相色谱仪测定前，样品洛液用O.2m滤膜过滤。6.2 色谱条件a) 流动相:乙腊+戊皖磺酸铀溶液(10+90); 准品，从皇室鱼软骨主见附录B。7 结果的计算被测物的含式中:Wi 样品Ai 样品加均值的0.5%;盐酸氨基葡萄糖值的1.5%。2 品健用硫酸软骨素B标准潜椒的典型色谱图参. ( 1 ) 于这两个测定值的算术平大于这两个测定值
7、的算术平均GB/T 20365一2006附录A(资料性附录)硫酸软骨素的化学结构式+ a N X (0 0川川川S川川OO H HO H 。-二CCH3 圄A.l硫酸软骨素A的结构式n + a N X (O OHHHHS川川川OO H HO R=C-O日H 图A.2碗酸软骨素B的结构式n CxNa+) H O OHUH川CHO HO 。二二二Cn 圈A.3碗酸软骨素C的结构式CON-m的ONH阁。GB/T 20365一2006附录(资料性附录)标准溶液的典型液相色谱图B 吸光度硫酸软骨素1. 00 0.80 0.60 哇1.tIli0.40 0.20 J飞-一一-0.00 6.00 t/min 5.00 4.00 3.00 2.00 1. 00 0.00 侵权必究并版权专有标准溶液的典型液相色谱图图B.l书号:155066. -28121 定价:几;8.00 GB/T 20365-2006
