1、ICS 65.020.01 B 16 GB 中华人民主K/、和国国家标准GB/T 28069-20门根蜻检疫鉴定方法Detection and identification of bulb mites CRhizoglyphus spp.) 2011-12-30发布2012-06-01实施数码防伪中华人民共和国国家质量监督检验检痊总局中国国家标准化管理委员会发布前言本标准按照GB/T1. 1-2009给出的规则起草。本标准由全国植物检疫标准化技术委员会CSAC/TC271)提出并归口。本标准起草单位:福建农林大学、中华人民共和国福建出入境检验检疫局。本标准主要起草人:范青海、陈艳、林阳武、苏秀
2、霞。GB/T 28069-2011 I GB/T 28069-20门根蜻检疫鉴定方法1 范围本标准规定了根蜻属蜻类(Rhizoglyphusspp. )的检疫鉴定以雌、雄成瞒的形态特征为鉴定依据;明确了根蠕属蜡类现场检疫、实验室分离与饲养、标本制作、样品保存的方法。本标准适用于蔬菜、花卉、中药材等根蜻寄主植物球根、球茎、鳞茎及块茎中根瞒的检疫鉴定。2 术语和定义下列术语和定义适用于本文件。2. 1 额体gnathosoma 位于身体前端或前端腹面，由顿基和两对附肢即整肢和须肢组成。2.2 躯体idiosoma 蝉蜡顿体后方的体段，常以围颗沟与颗体分开，占身体的大部分，多呈囊状。2.3 段体的a
3、生回着阳足d41 。可AF叩二严第和体对足一前第2.4 后足体metapodosoma 第三对和第四对足着生的体段。2.5 格氏器Grandjeans organ 粉蜡前足体前侧缘形成的一环绕顿体基部的薄骨板，为指状或叉状等多种形状。2.6 生殖吸盘genital papillae 生殖区内小型杯状或盘状结构，偶尔具柄，位于生殖板上、生殖孔或散布于生殖孔两侧的体壁上。2. 7 旺吸盘anal suckers 粉蜻等蠕类的雄蜻交配器，位于胚门两侧的一对大型吸盘。2.8 酣节眼盘tarsal suckers 雄成蜻特有特征。位于跚节凹，由蹄节毛(d，。特化而成的构造。2.9 生殖槽genital
4、fold 元气门蠕类遮盖生殖孔的分叉形的裙。1 GB/T 28069一20门2.10 克氏器Claparede S organ 仅发现于前幼蜡和幼蜡期的一种器官，位于前、中两足基节之间，具柄和半球形的端部，或呈凹陷状结构。3 根蜻基本信息根蜡学名:Rhizoglyhusspp.。英文名:bulb mites o 属蝉蠕亚纲Acari、真蜻总目Acariformes、挤蠕目Sarcoptiformes、粉蠕科Acaridae。根瞒各发育蜻态都可随货物、土壤、包装材料以及运输工具远距离传播;近距离传播主要以休眠体(第二若蜻)附在昆虫等动作上或随真菌抱子等扩散。此外根蜡本身可做小范围移动。根蜻寄主植
5、物的相关资料参见附录A。4 方法原理显微镜观察检测获得的样本卵、幼蜡、第一若蜻、第二若蠕(休眠体)或第三若蜡和成蜡等，依据形态特征进行鉴定。5 仪器、试剂5. 1 仪器与用具放大镜、体视显微镜、生物显微镜(具油镜、解剖刀、摄子、挑针、环形针、指形管、小培养皿、吸管、小号驼毛笔、载玻片、盖玻片、电热板、干燥箱、贝氏漏斗CBerlesefunnel)、标签、铅笔、油漆笔。5.2 试剂除另有规定外，所有试剂均为分析纯。5.2.1 奥氏液COudemans fl uid) :液浸标本保存液。配方:70%乙薛87mL、冰醋酸8mL、甘油5mL。5.2.2 内民液CNesbitts fluid) :标本清
6、洗、软化液，经过清洗的标本透明、舒展。配方:水合氯醒40g、浓盐酸2.5mL、蒸锢水25mL。5.2.3 霍氏液CHoyer s medium):玻片标本封固液。配方:水合氯醒100g、阿拉伯肢15g、甘油10 mL、蒸锢水25mL。5.2.4 中性树胶CNeutralBalsam) :玻片标本封片液。6 现场检验检查蔬菜、花卉、中药材等植物鳞茎、球茎、块茎、根茎和块根等表面有元腐烂、裂缝、伤口以及土壤，肉眼或放大镜下若发现有乳白色囊状物，即有可能是根蜻或粉蜻科其他属的蠕类，需要带回实验室做进一步检查鉴定。2 GB/T 28069-2011 7 实验室检测7. 1 检测方法7. 1. 1 表面
7、检测在放大镜或体视显微镜下检查植物体表面，重点检查有病菌发生的腐烂组织以及有裂缝或伤口的组织，借助解剖刀和挑针仔细检查，若有乳白色囊状物活动，需要调整显微镜放大倍数检查，确认是蜻类后，用挑针或驼毛笔挑入盛有奥氏液的指形管中，同时放入采集标签，并登记采集地点、时间、输出国家或地区、寄主、采集人等内容。7. 1. 2 贝氏漏斗分离取待检植物活体、残片、土屑等放置于贝氏漏斗网上，漏斗下放置承接器皿，器皿内放少量清水，以防蜻逃逸或干死。用40W灯泡为热源，烘烽干燥24h，然后将承接器皿放在体视显微镜下检查，发现蜻类后，挑入盛有奥氏液的指形管，并做好标签和记录。7.2 根瞒的饲养对元法确定种类的卵、幼蜡
8、、若蜻，可将其放置在盛有酵母片的培养皿或指形管里，然后放于温度为25 oC30 oC、相对湿度90%以上的黑暗培养箱里饲养，同时做好饲养记录。数天至十多天后发育为成蜡，在体视显微镜下进行初步观察，制作成玻片标本，再进行鉴定。7.3 标本制作7.3.1 清洗在体视显微镜下，用环形针将蜡移入盛有内氏液的小培养皿中，浸泡24h。7.3.2 制片在载玻片上滴1滴2滴的霍氏液。从内氏液中挑出根蜻，触碰滤纸去除多余液体，然后放入霍氏液，整姿后，盖上盖玻片，放在60W白炽灯或500W电热板上加热至气泡排出，用油漆笔在载玻片下方标出蜗体位置，并写明采集标签(见图1)。在低倍显微镜下检查、调整瞒体位置，用40倍
9、以下物镜进行初步鉴定。粉鳞科ACARIDAE标本馆名称中名:寄主z寸P也 A4口:采集地点z鉴定人z采集时间z鉴定日期z采集人z鉴定编号g标本编号z图1玻片标本标签标注方法图示7.3.3 玻片标本保藏将玻片标本放在500C左右干燥箱中干燥，1周后即可用于油镜(100倍)观察。干燥约3个月后，在盖玻片周围封中性树肢，继续干燥1d2 d即可在常温下保存，也可置于干燥器中长期保存。3 GB/T 28069一20门7.4 镜检在生物显微镜下观察玻片标本，种类鉴定需要在100倍油镜下观察、测量，必要时需要对关键特征照相。8 鉴定特征8.1 成蜻(参见图B.1-圄B.4)躯体长500m900m，半透明，乳
10、白色至浅褐色，足深褐色。前足体着生4对背毛和1对足I基节上毛，外顶毛(ve)微小，位于内顶毛(vi)后方、背板外缘。内肝毛(sci)显著短于外脾毛(sce)。基节上毛(scx)光滑。后半体着生12对毛。生殖禧(genitalfolds)发达。E时节I和附节E上近基毛(ba)粗壮，靠近感棒(1)。跚节I末端具4根长毛和1根长感棒(3)。甜节H末端具4根长毛，附节田末端具3根长毛;雌蜡甜节凹末端具2根长毛，雄瞒跚节目末端具1根长毛。足毛序(1 ，._，凹):基节1，0，2，1，转节1，1，1，0，股节1，1，0，1，膝节2+句，2+1，1+1，0，腔节2十忡，2+忡，1+忡，1+1伊酣节8c+4t
11、+3十1e，8c十4t十l，7c+3t，8c+2to注:膝节感棒;甲:腔节感棒;:附节感棒;C:锥状毛;t:触毛。雄蜗生殖孔内有阳茎，胚孔后侧有1对虹吸盘，甜节目具2个甜节吸盘。异型雄蜻一侧或两侧的足E异常膨大，末端钩状参见图B.4b) 。根蜻属各发育期蜻态鉴定可参照附录C。中国根蜡属雌、雄成蜡分类鉴定可参照附录D和附录E。8.2 第三若蜗参见图B.5a)丁躯体囊状，有两对生殖吸盘，足毛序与雌成蜗相同。但元生殖裙，缸毛短g8.3 休眠体(亦称第二若蜻)参见图B.5d)，图B.5e)丁躯体扁平，深褐色，强骨化。颗体微小，萤脏完全退化。除vi和hz外，其他背毛均微小。基节上毛scx位于腹面。无生殖
12、槽，有两对生殖吸盘，旺区有4对吸盘。酣节I感棒3缺如，近基毛ba棒状。膝节感棒11缺如。足毛序(IN):基节1，0，2，1，转节1，1，1，0，股节1，1，0，1，膝节2+10-，2+1，1，0，腔节2+忡，2十1伊，1+1伊，1+忡，附节1c十8t+2+le，lc十8t+1，8t，lc+7t。8.4 第-若蜡参见圄B.5b)J 躯体囊状，乳白色，足褐色。腹毛3a和4a缺如。无生殖裙，有一对生殖吸盘。跚节I感棒3缺如，转节凹和腔节目元毛。足毛序(1凹):基节1，0，1，0，转节0，0，0，0，股节1，1，0，0，膝节2+2，2十1，1+1，0，腔节2+与，2+1，1+忡，1+与，跚节8c十4t
13、十2+le，8c+4t+1，7c十缸，7c+1to8.5 幼蜻参见图B.5c)J 躯体囊状，乳白色，足颜色随着发育逐渐加深。背毛fz和h3缺如，腹毛3a和4a缺如。基节I和E间有克氏器(Clapardeorgan)。无生殖孔、生殖毛、生殖吸盘、旺毛。只有三对足，踹节I感棒2和3缺如。足毛序(1 N):基节0，0，0，转节0，0，0，股节1，1，0，膝节2+2，2+1，1十1，腔节2+1，2十与，1+1口，甜节8c+4t+1十le，8c十4t十1，7c+3to9 结果判定以成蠕的形态特征为依据。外顶毛(ve)极小并且位于内顶毛(vi)后方、前足体背板外缘，内脾毛4 G/T 28069-20门(s
14、ci)显著短于外肝毛(sce)，后半体着生12对毛，酣节I和附节E上近基毛(ba)粗壮，靠近感棒(1)，甜节I末端具4根长毛和l根长感棒(3)，跚节E未端具4根长毛。符合上述形态的可鉴定为根蜡。10 样晶保存危害状样品以及根蜻应妥善保存。放入盛有奥氏液或70%75%乙酶的指形管中制成浸渍标本，并插入标签;再将指形管放入盛有70%75%乙醇的广口瓶中，密封保存。5 GB/T 28069-2011 附录A(资料性附录)根瞒寄主植物寄主植物类群有:葱科Alliace町、石蒜科Amaryllidaceae、夹竹桃科Apocynace挝、天南星科Araceae、菊科Asteraceae、山毛棒科Betu
15、lace町、木棉科Bombacace町、凤梨科Bromeliaceae、铃兰科Con vallariace町、旋花科Convolvulace町、十字花科Crucifer挝、葫芦科Cucurbitace挝、苏铁科Cycadace挝、薯苗科Dioscoreace町、大就科Euphorbiace挝、龙胆科Gentianace挝、苦宦苔科Gesneriace挝、禾本科Gramine挝、莺尾科lridace町、豆科Leguminosae、百合科Liliace町、兰科Orchidace町、苟药科Paeoniace町、棕榈科Palmae、露兜树科Pandanaceae、寥科Polygonaceae、毛在科R
16、an unculaceae、蔷薇科Rosaceae、茄科Solanace挝、泥炭薛科Sphagnaceae、梧桐科Sterculiace町、延龄草科Trilliace町、伞形科Um belliferae、姜科Zingiberaceaeo6 常见寄主有:a) 蔬菜类:洋葱Alliumcepa、高头Alliumchinense、大蒜Alliumsativum、韭菜Alliumtuberosum、海芋Alocasiamacrorrhiza、野芋Colocasiaantiquorum、芋Colocasiaesculenta、山芋Colocasia sp.、姜黄Curcumalonga、胡萝卡Daucu
17、scarota、番薯Iomoeabatatas，鹿葱Lycoris squamigera、马铃薯Solanumtuberosum、白鹤芋Spathiphyllumkochii和生姜Zingiber 0万lcinale等;b) 花卉类:唐言蒲Gladiolushybrida、风信子Hyacinthussp.、百合Liliumsp.、水仙Narcissussp.、苟药Paeoniasp.和郁金香TuliPasp.等;c) 中药材类:半夏Pinelliaternata、天麻Gastrodiaelata和何首乌Polygonummultiflorum等。, 4j 、.飞、。_. j 、飞附录B(资料性
18、附录)根蜻图例1 dl 大斗l足ET C2 h2 足体前GB/T 28069-20门领体I I I /,1 后是II军1 1 1 I I I 后主末体图B.1 根瞒CRhizoglyphus sp. )雌成蜻背面观7 GB/T 28069-20门图B.2根蠕CRhiz.oglyphussp. )雌成瞒腹面观8 须肢转节I转节E生殖裙生殖吸盘虹孔受精褒交配孔咂归、飞pR a) 雌蜻足I伊b) 雌蟠足Ec) 雌蜻足E图B.3根蜻CRhizoglyphussp. )雌成蜻足背面观GB/T 28069-2011 f d d 9 GB/T 28069-2011 10 d) 雌蜻足N图B.3(续)a) 同
19、型雄蜻足Eb) 同型雄蜻足N图B.4根蜻(Rhizoglyphssp. )雄蜡足背面现d r R a) 第三若蜻腹面c) 异型雄蜻足Ed) 异型雄蜻足N图B.4(续)b) 第一若蠕腹面图B.5根蜡(Rhiz.oglyphussp. )未成熟期蜻态GB/T 28069-20门c) 幼瞒腹面11 GB/T 28069-2011 d) 休眠体(第二若蜻)背面e) 休眠体(第二若蜻)腹面图B.5(续)12 GB/T 28069-2011 附录C(资料性附录)根蜻属各发育期蜻态检索表1.具4对足，后半体有12对毛;元克氏器，具1对-2对生殖吸盘.2 -.具3对足，后半体有10对毛;有克氏器，无生殖吸盘幼
20、蜡2.躯体囊状，乳白色，整股钳状，多数背毛长，无旺板，膝节I具2感棒.3 -.躯体扁平，褐色，整肢退化，多数背毛微小，具虹板，膝节I具1感棒休眠体(第二若蜻)3.具2对生殖吸盘，有腹毛3a和4a;跚节I端具感棒帆，足凹股节、膝节和腔节具毛或感棒 4 -.具1对生殖吸盘，腹毛3a和也缺如;附节I元感棒3，足N股节、膝节和腔节元毛或感棒第一若瞒4.具生殖槽，有受精囊或阳茎.成蜗5-.元生殖槽，元受精囊或阳茎.第三若蜻5.具阳茎和旺吸盘，元受精囊，附节N具2个吸盘.雄成瞒6-无阳茎和旺吸盘，有受精囊，踹节凹元吸盘.雌蜻6.足田正常，不异常膨大，附节爪小.同型雄蜻-.足E异常膨大，附节爪发达.异型雄蜻
21、13 G/T 28069-20门附录D(资料性附录)中国根蜻属(Rhizoglyphusspp. )雌成蜻分种检索表1)1.输卵管两侧的小骨片接近，间距小于45m;基节上毛SCX细长或微小-.输卵管两侧的小骨片远离，间距大于60m;基节上毛SCX粗壮.6 2缸毛微小，若长则呈鞭状;假旺毛S2微小，不长于SI和PS3;附节I锥状毛ba长，超出1长度的三分之二3-.脏毛粗壮，皆长于30m;假旺毛S2明显长于SI和户S3;甜节I锥状毛ba短，约为1的一半.花叶芋根蜡R.caladii Manson, 1972 3.背毛d2远离末体腺开口(gla)，两者间距大于30m. 5 -.背毛d2接近末体腺开口
22、(gla)，两者间距小于20m44.脏毛3对，PSI明显长于户S2和PS3附和长于d2的2倍.单列根蜻R.singularis Manson, 1972 -.旺毛6对，均微小;cI，dl和d2均微小大蒜根瞒R.allii Bu &. Wang , 1995 5.虹侧毛adl和ad2以及假缸毛SI微小，不长于假虹毛S3 罗宾根蠕R.robini Claparde, 1869 -. )I侧毛adl和ad2长于PS3或ad3的3倍;假旺毛SI长于户S3长毛根蜻R.setosus Manson , 1972 6.格式器分叉显著，分叉点接近基部;基节上毛scx末端分叉和j足根蠕R.echinopus (
23、Fumouze &. Rohin, 1868) -.格式器分叉短，分叉点位于端部四分之一处;基节上毛scx末端不分叉77.须肢基节上毛elcp长30m35m，背毛SCl长48m60m，cI长72m98m，el长84m108m .水仙根蜻R.narcissi Lin &. Di吨，1990飞须肢基节上毛elcp长19m25m，背毛巾长17m28m，cI长38m55m州长60m73m 澳登根蜡R.ogdeniFan &. Zhang , 2004 1) 不含狲猴桃根蜻Rhizoglyhusactinidia Zhang , 1994和淮南根蜻R.huainanensis Zhang &. Li，2
24、000。该两种原描述缺少定种依据，据查模式标本己遗失。14 GB/T 28069一2011附录E(资料性附录)中国根蜻属(Rhizoglyphusspp. )雄成蜻分种检索表2)1.假虹毛Sj短，不长于PS2 2 飞假胚毛扣1长，至少达PS2的3倍42.假旺毛Sj接近旺吸盘，与旺吸盘之间的距离小于其长度;假旺毛扣2位于胚吸盘侧面;虹盘大，并有发达的放射状网纹.花叶芋根蜻R.caladii Manson, 1972 飞假胆毛PSj远离胆吸盘，与旺吸盘之间的距离大于其长度的4倍;假E毛户S2位于旺吸盘的后方;旺盘较小，元放射状网纹或仅有数个小孔33.旺盘小，其直径不及胚吸盘直径的四分之-;背毛Cj
25、长25m38m，dj长35m45m，d2长27m33m.长毛根蜡R.setosus Manson, 1972 -.旺盘较大，其直径约为旺吸盘直径的三分之-;背毛Cj、dj和d2均微小，约为10ml1m大蒜根蜻R.allii Bu &- Wang, 1995 4.背毛d2远离末体腺开口(gla);旺盘微小，元放射状网纹;阳茎内壁不呈波浪状弯曲51背毛d2接近末体腺开口(gla);旺盘发达，有发达放射状网纹;阳茎内壁呈波浪状弯曲单列根蜻. R. singularis岛1anson，1972 5.格氏器分叉;阳茎粗短，末端平截.6 .格氏器不分叉;阳茎末端尖罗宾根蠕R.robini Claparde
26、, 1869 6.格氏器分叉显著，分叉点位于基半部;基节上毛SCX末端分叉 JlfIJ足根蜡R.echino户us(Fumouze &- Rohin,1868) .格氏器分叉短，分叉点位于端部四分之一处;基节上毛SCX末端不分叉77.须肢基节上毛elcp长27m30m，背毛Cj长16m23m，ej长39m63m水仙根蜻R.narcissi Lin &- Ding, 1990 -.须肢基节上毛elcp长17m20m，背毛Cj长33m35m，ej长71m100m. 澳登根蜻R.ogdeni Fan &- Zhang, 2004 2) 不含狲猴桃根蠕Rhizoglyphusactinidia Zha
27、ng , 1994和淮南根蜻R.huainanensis Zhang &. Li , 2000。该两种原描述缺少定种依据，据查模式标本已遗失。FFON-goNH阁。国华人民共和国家标准根蜻检瘟鉴定方法GB/T 28069-2011 中* 中国标准出版社出版发行北京市朝阳区和平里西街甲2号(100013)北京市西城区三里河北街16号(100045)网址总编室:(010)64275323发行中心:(010)51780235读者服务部:(010)68523946中国标准出版社秦皇岛印刷厂印刷各地新华书店经销 印张1.25 字数28千字2012年5月第一次印刷开本880X12301/16 2012年5月第一版晤21.00元如有印装差错由本社发行中心调换版权专有侵权必究举报电话:(010)68510107定价书号:155066. 1-44579 GB/T 28069-2011 打印H期:2012年5月22日F002
