1、中华人民共和国化工行业标准HG/T 2414-93 照相化学品成色剂含量的测定反相高效液相色谱法1993-03-22发布1993-10-01实施中华人民共和国化学工业部发布中华人民共和国化工行业标准照相化学品HG/T 2414-93 成色剂含量的测定反相高效液相色谱法1 主题内睿与适用范围本标准规定了反相高效液相色谱法测定成色剂含量的方法，包括试剂及材料、仪器及装置、色谱操作条仲、测定步骤、结果计算等内容.本标准适用于醇溶性、有紫外吸收的成色剂的测定-2方法提要样品经称量，溶解，用微量注射器或定量进样阀将样品溶液注人ODS色谱柱(或C.、TMS色谱柱)内，进行层析分离，用254nm或其他指定波
2、长紫外检测器检测，用面权归一法或外标法计算成色剂的含量.3试剂及材料3.1 配制流动相的试剂反相高效液相色谱法流动相常用甲醇、无水乙醇、乙睛、冰乙酸等试剂配制.上述试剂其254nm的吸光度一般不应超过0.03(1. 0 cm吸收池)，不应该含有0.5m以上的固体微粒.配制流动相时最好使用液相色谱专用试剂.当用分析纯试剂时，应进行重新蒸馆.必要时，应精密分情以，除去微量杂质.流动相使用前应进行脱气处理.常用脱气方法有真空法、加热回流法、超声法和氮气法，可根据具体情况选用.3.2 色谱用水高效液相色谱用水应该是新鲜蒸懵水，避免水中微生物产生而损坏高效液相色谱仪的流路系统.3.3标准样品色谱法主体含
3、量不得低于99.0%的高纯成色剂样品，用于外标法定量分析.标准样品由化学工业部感光材料质量监督检验中心测试认定.3.4 对照样品由相关成色剂及其杂质，或相关成色剂及其难分离中间体配制.用于鉴定分离该成色剂的色谱柱是否满足分离要求.对照样品由化学工业部感光材料质量监督检验中心测试认定.4仪器及装置4.1 一般实验室仪器.4.2 分析天平:感量为0.01mg. 4.3 微量注射器:容量10L，最小刻度为O.1L. 4.4 高效液相色谱仪:高效液相色谱仪通常由输液泵、进样器、检测器、微处理机等部件组成.中华人民共和国化学工业部1993-03-22批准1993-10-01实施HG/T 2414-93
4、4.4.1 输液泵:一般为往复式柱塞泵，其流速应在0-10mL/ miD范围内可调，流速稳定性优于:1:1%，最高输出压力不应低于25MPa. 4.4.2 进样器:一般为六通阀进样器，也可以用双流路进样器.进样设定误差不得大于0.1L.4.4.3 紫外检测器:选用2S4nm固定波长检测器，也可以用可变波长(2-390nm)检测器.波长设定误差不得大于2nm，波长波动范围不得大于1Dm. 4.4.4 微处理机:应具有记录并处理色谱图谱的功能.4. S 色谱柱:用于成色剂含量分析的色谱仪器至少应配备两支ODS色谱柱，条件许可时，还应配备C.(辛烧基)色谱柱和甲基色谱柱.色谱柱材质一般为不锈钢;填料
5、粒径一般为5m或10m;柱长一般为2S0mm或150mm;内径一般为3.9mm或4.6mm或5.0mm.柱效应满足成色剂分析的需要，必要时应用成色剂对照样品标定.5 邑谱操作条件色谱操作条件主要由色谱柱、流动相、检测波长、检测灵敏度、流速、柱温、记录纸速和记录灵敏度等八个因素组成.所选择的色谱操作条件应该使成色剂样品中所有组份完全分离，主成份的色谱保留时间为5-20min.总的洗脱时间为30miD左右.在满足上述要求的基础上，尽量选用通用性强的色谱柱和试剂组成相对简单并易得易处理的流动相，以便尽可能简化操作.常用成色剂的色谱分析操作条件见表1、表2.表1常用成色剂色谱分析用的流动相样晶名称流动
6、相的组成(V:COC-l 甲酶:水=94:6 COC-2 无水乙醇:水-88:12 COM-I 甲回事:水:乙酸乙醋-87: 4: 9 COM-2 甲事:水.90: 10 COM-4 甲醇(含有0.1%冰乙酸):水(含有0.1%冰乙酸)=95: 5 COY-2 甲醉(含有0.1%冰乙酸):水含有0.1%冰乙酸)=92: 8 COY-5 甲回事:水-93:7 表2常用成色剂的其他色谱分析操作条件卢了?COC-l COC咂2COM-I COM-2 COM-4 COY-2 COY-S 色谱柱ODS 检测波长.nm 254 检测灵敏废.AUFS 0.08 0.04 0.08 。.020.02 0.04
7、 。.08流速.mL/min 1. 0 。.91. 0 柱温.t室温记录纸速.mm/min 5 记录灵敏度.mV IFS . 2 HG/T 2414-93 对不同的高效液相色谱仪及不同生产厂的ODS色谱柱，上述各参数可做适当调整，以获取适宜的包谱分离度，并使其符合对照样品色谐分离图的要求.常用成色剂的对照样品色谱图见图1、图2、图3、图4、图5、图6、图7.2 竹寸寸4 S 6 7 8 9 10 11 12 13 14 (miD) 3 图1COC-l对照样晶色谱分离图1一杂质1(8.2 miD); 2-COC-I (9.4 min); 3一杂质n(1 0.9 miD) 2 。12 3 4 S
8、6 7 8 9 10 II 12 (min) 图2COC-2对照样晶色谱分离图1一中间体苯醋。.6miD); 2-i己OC-2(7.0 miD) HG/T 2414-93 2 1 o 1 2 3 . S 6 7 8 9 10 11. 12 13 14. JS 16 17 18 19 (min) 圄3COM-t对照样晶色谱分离图1一杂质1(11. 1四n);2-COM-l (I2.Smin); 3一杂质n(14. 1 min); . -.质m(15.0min) 4 T 守画4, HG / T %414-t.J 2 俨亏3 . 10 11 12 li ,l4 15、16I (min) COM-2对
9、照样品色谱分离图1一杂.It1 (7.2 min); 2一崇质n(8.7min); 3-COM-2 (10. min); .4一杂质m(12.7min) 雪回5 5 a 6 2 3 -7 -s . , COM-4对照样品色谱分离图1一中间体氨基物(4.4min); 2-COM-4 (6.2 min); 3一中间体乙黯(6.8min) 将HG/T 2414-93 2 3 2 3 o 1 2 3 4 5 6 7 8 -9 10 11 12 13 (归国o 1 2-3 4 S 6 7 8 9 10 11 12 13 14 IS 16伽凶图6COY-2对照样品包谱分离图l一中间体氨基物(6.1 mil
10、); 2- COY-2 (6.8 min); 3一中间体氧化物(8.0min) 6测定步骤图7COY-5对照样品色谱分离图1一中间体氨基物(6.S min); 2一中间体氯化物(8.7min); 3-COY-S (1 0.1 min) 一般采用面积归一法，当含量测定值低于90%.或对其测定结果有疑义时，则用外标法进行仲裁分析.本试验规定的样品(包括标准样品)称样量由样品溶液的进样量、色谱柱负荷、杂质峰检测限、检测灵敏度、微处理机衰减度共同确定.本试验规定的称样量是在灵敏度较高，衰减较小的情况下确定.称样量可以根据不同型号色谱仪做适当地调整.6.1 面积归一法6. 1. 1 样品溶液的配制称取规
11、定量样品，精确至0.1mg，置于具塞玻璃容器中，用10mL甲醇溶解(COC-2改用10mL乙醇溶解.COM-l可滴加约8滴乙酸乙醋助溶).混句.常用成色剂样品称样量见表3.表3常用成色剂样品的称样量样品名称COC-l COC-2 I COM-l I COM-2 I COM-4 I COY-l COY-S 称样量.mg 10 4 I 10 I 6 I S I 10 1,0 6 HG/T 2414咀甲936. 1.2 测定根据被测样晶所要求的色谱操作条件调试高效液相色谱仪，并使其稳定.注人规定量被测样品需掖进行色谱分离，得色谱图.常用成色剂样晶溶液的进样量见表4.表4常用成色剂样品溶液进样量样晶榕
12、液名称I CQC-I I COC-2 I COM-I I COM-2 I COM-4 I COY-2 I COY-5 进样量，LI 10 I 6 I 5 I 6 I 4 I 10 I 6 6. 1.3结果计算成色剂含量(X.)按式。)计算:A_ E一一1一-x 100 ( 1 ) l:A , 式中:X.一一被测样品中成色剂的百分含量，%; A.一一被测样品中成色剂的峰面积;l:Aj-被测样品中各组份峰面权之和.6. t. 4 重复性本方法平行测定两次.结果取两次测定的平均值.两次测定的结果差值不应大于1.0%.6.2外标法6. 2.1 标准溶液的配制称取规定量成色剂标准样品，精确至0.01mg
13、，置于2SmL容量瓶中，用甲醇榕解(COC-2改用10mL无水乙醇溶解、COM-l标准样晶可滴加10滴乙酸乙醋助溶)，并稀释至刻度，混勾.该标准溶液应现用现配.常用成色剂标准样晶的称样量见表s.表5常用成色剂标准样品的称样量标准样品名称I COC-I I COC-2 COM-2 I COM-4 I COY-2 I COY-5 称样量，mg I 25 I 5 7 I II I 25 I 20 6. 2.2 样晶溶液的配制中费6.2.1规定的称样量和配制方法配制样品溶液.6. 2. 3 测定根据被测样品所要求的色谱操作条件调试离效液相色谱仪，井使其稳定.依次分别注入规定量被测成色剂的标准溶液、样品
14、溶液、样品溶液和标准溶液进行测定，得各自色谱图.常用成色剂样品溶液(包括相应标准溶液)的进样量见表6.表6常用成色剂样品溶液(包括相应标准溶液)的进样量溶液名称COC-I I COC-2 I COM-I I COM-2 I COM-4 I COY-2 I COY-当进样量.L5 I 6 I 5 I 6 I 4 I 5 I 6 2.4 结果计算成色剂含量(X2)按式(2)计算:7 HG/T 2414-93 X2= 2 .m.p .m2 (2: 式中:Xi一一被测样品中成色剂的百分含量，%; .一一两次被测成色剂标准溶液主峰面积的平均值;i一一两次被测样品溶液主峰面积的平均值;m.一一被测成色剂标
15、准样品质量，mg; m2-一被测样品的质量，mg; F一一被测成色剂标准样品的含量，%. 6.2. S 重复性本方法平行测定两次，结果取两次测定的平均值.两次测定结果的差值不应女于1.5%.7试验报告试验报告应包括下列内容:a. 有关样品的全部资料:批号、日期、时间及地点、试验使用的仪器型号;b. 分析结果和表示方法;c. 在测定中观察到的异常现象;d. 任何不包括在本标准中的操作或自由选择的试验条件.附加说明:本标准由中华人民共和国化学工业部科技司提出.本标准由化学工业部感光材料技术开发中心归口.本标准由化学工业部感光材料技术开发中心负责起草，化学工业部沈阳化工研究院参加起草.本标准主要起草人丁培玲、潘礼仁、蔡挺、关瑞宝、庄幼琴.8 呐。-S守NH。因华人民共和化工行业标准照相化学晶成色荆含量的测定反帽高效渡榈色谱法HG/T 2414-93 国中编蜻化工行业标准编辖部(化工部标准化研究所)邮政编码:100013 印刷化工部标准化研究所版权专有不得翻印开本880x1230 1/16 印张%字数160001993年6月第一版1993年6月第一次印刷印数1-500工本费4.10元
