1、ICS 65.020.01 B50 DB33 浙江省 地方标准 DB 33/T 905 2014 滩涂埋栖型双壳贝类苗种人工繁育通用技术规范 General technical specification for benthic bivalve artificial breeding and seedling 2014 - 02 - 28 发布 2014 - 03 - 28 实施 浙江省质量技术监督局 发布 DB33/T 905 2014 I 前 言 本 标准 按照 GB/T 1.1-2009给出的规则起草。 本标准由浙江省海洋与渔业局提出。 本标准由浙江省水产标准化技术委员会归口。 本标准起
2、草单位： 浙江万里学院 、浙江省海洋水产养殖研究所、宁波市海洋与渔业研究院 。 本标准主要起草人： 林志华、边平江、董迎辉、沈伟良、陈彩芳、沈庞幼 。 DB33/T 905 2014 1 滩涂埋栖型双壳贝类苗种人工繁育通用技术规范 1 范围 本标准规定了泥蚶（ Tegillarca granosa）、缢蛏（ Sinonovacula constricta）、文蛤（ Meretrix meretrix）、青蛤（ Cyclina sinensis）等滩涂埋栖型双壳贝类苗种生产场地的 设施与环境 、亲贝选择和处理、催产和孵化、幼虫培育、稚贝培育、饵料培养、大规格苗种培育、苗种收获、 包装和运输、标准
3、化生产模式图 等技术要求。 本标准适用于滩涂埋栖型双壳贝类室内工厂化繁育 ， 室外池塘或设施化大规格苗种培育可参照执行。 2 规范性引用文件 下列文件对于本文件的应用是必不可少的。凡是注日期的引用文件，仅所注日期的版本适用于本文件。凡是不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适用于本文件。 GB 2762 食品安全国家标准 食品中污染物限量 GB 2763 食品安全国家标准 食品中农药最大残留限量 GB 18406.4 农产品安全质量 无公害水产品安全要求 GB/T 18407.4 农产品质量安全 无公害水产品产地环境要求 NY 5052 无公害食品 海水养殖用水水质 NY 5071
4、 无公害食品 渔用药物使用准则 NY 5073 无公害食品 水产品中有毒有害物质限量 SC/T 2042 文蛤 亲贝和苗种 SC/T 3016 水产品抽样方法 SC/T 3018 水产品中氯霉素残留量的测定 气相色谱法 SC/T 3022 水产品中呋 喃唑酮残留量的测定 液相色谱法 3 术语和定义 下列术语和定义适用于本 标准 。 3.1 催产 人工 方法 诱导刺激 亲贝 产卵、排精。 3.2 D 型幼虫 DB33/T 905 2014 2 又称初期面盘幼虫，或直线铰合幼虫。由壳腺分泌形成的两片贝壳包裹了全身，侧面观如英文字母D。 3.3 壳顶幼虫 D型幼虫经过一段时间的发育，铰合线开始向背部
5、隆起，形成壳顶 的幼虫 。 3.4 眼点幼虫 在壳顶幼虫后期， 幼虫 足的基部出现 的 一对黑褐色 腺体的幼虫 。 3.5 附着基 眼点幼虫附着的基质。可 用无污染的中高潮带涂面海泥，浸泡成泥浆后去除沙石杂质并消毒。 3.6 稚贝 幼虫向幼贝过渡的一个发育阶段。主 要特征是面盘完全退化，钙质的贝壳形成，用鳃呼吸，足部发达，营底栖生活。 3.7 壳长 壳前端至 壳 后端的最大 直线距离。 3.8 规格合格率 达到规格的苗种数量占苗种总数的百分比。 3.9 伤残空壳率 壳残缺、破碎、畸形和空壳苗种数占苗种总数的百分比。 3.10 杂质率 苗种中的杂质（除贝苗外的其他物质）重量占苗种总重量的百分比。
6、 4 环境与设施 4.1 环境 DB33/T 905 2014 3 交通便利、电力设施完备，海水水源无污染。产地环境符合 GB/T 18407.4的规定，水质符合 NY 5052的规定。 4.2 设施 育苗池、单细胞藻类培养池齐全，供水、电、气和热设施完备。 5 亲贝选择 和处理 5.1 来源 捕自自然海区或人工养成。 5.2 选择 选择体壮、形态正常无畸形，壳表无损伤、无附着物、无寄生虫，性腺成熟而饱满的 2龄 3龄贝为亲贝。 文蛤亲贝选择应符合 SC/T 2042 的要求 。 5.3 处理 洗净亲贝，用 10 毫克 /升 20 毫克 /升 高锰酸钾溶液浸泡 5 分钟 15 分钟，期间需连续
7、搅拌。然后 用 清洁 海水洗净。 6 催产和孵化 6.1 催产 亲贝阴干 8 小时 16 小时 后，流水或充气刺激 1 小时 3 小时 。 6.2 洗卵 根据产卵池中精子和排泄物的含量，洗卵 2 次 3 次。也可结合捞泡沫、加换水等方法去除多余精子及杂质。 6.3 孵化 持续微充气孵化。受精卵孵化密度为 20 颗 /毫升 40 颗 /毫升 。产卵孵化池 可 与育苗池兼用。 6.4 D 型幼虫收集 发育为 D型幼虫后 20 小时 内，用 300 目 500 目 筛绢网排水收集与清洗，然后移入育苗池培育。 7 幼虫培育 7.1 培养池 大小 以 30 平方米 50 平方米为宜 ，蓄水高度 1 米
8、1.5 米 。 7.2 培育密度 DB33/T 905 2014 4 D型幼虫培育密度 以 10 个 /毫升 15 个 /毫升为宜 ；壳顶幼虫培育密度 以 5 个 /毫升 10 个 /毫升为宜 。 7.3 充气 持续 微 充气，保持水中溶解氧浓度在 5 毫克 /升 以上。 7.4 换水 D型幼虫期、壳顶幼虫期、 眼点幼虫期分别用 300 目 、 250 目 、 200 目 筛绢滤苗换水，日均换水 2次，换水量为 30% 80%。 7.5 投饵 D型幼虫期投喂金藻、角毛藻等新鲜单细胞藻类为主，投喂量为 保持水体中藻细胞为 1 104 个 /毫升 5 104 个 /毫升 ；壳顶幼虫期后可投喂扁藻，
9、投喂量为 5 103 个 /毫升 1 104 个 /毫升 。每天投喂 2 次，早晚各一次，均在换水后 1 小时内 进行。 7.6 倒 池与洗苗 幼虫培育期间， 3 天 5 天倒 池洗苗一次。采用网目最大孔径小于幼虫壳高的筛绢网袋，从幼虫培育池的排水口收集，然后移入消毒过的并注满新鲜过滤海 水的培育池中。培育密度可根据本标准 7.2执行。 7.7 附苗 镜检发现 1/3幼虫出现眼点时移入附苗池。池底稚 贝密度达到 2 106 颗 /平方米 时，即移出未附 着变态的幼虫到新附苗池。 8 稚贝培育 8.1 培养 池 大小 宜 为 30 平方米 50 平方米 ， 长方形水泥池，蓄 水高度 80 厘米
10、以 上。 8.2 培育密度 稚贝初始培育密度为 2 106 颗 /平方米 ，随着个体的生长而逐渐降低， 每隔 5 天 10 天疏 减 培养密度 50%。 8.3 投饵 每天投饵 2 次 4 次，换水后或移池后 1 小时内 进行。投饵量 以 扁藻 1 104 个 /毫升、 金藻及角毛藻 5 104 个 /毫升 1 105 个 /毫升为宜 。 8.4 培育管理 8.4.1 充气 按 本标准 7.3执行 。 8.4.2 换水 DB33/T 905 2014 5 培养池控制水位在 50 厘米 80 厘米 ，日换水量 为 80% 100%。在排水口安装 100 目 150 目 的筛绢网袋，以防贝苗逃漏。
11、 8.5 出苗及苗种运输 8.5.1 规格 壳长 500 微米。 8.5.2 质量 同批贝苗个体大小均匀，无同规格死壳。苗体干净，具固有气味，无异臭味。斧足粗壮有力，活力强。在干净的玻璃板上斧足伸缩频率高，爬行速度快，粘液痕迹明显。 8.5.3 计数 采用称量法。先将贝苗混合均匀，用天平称取 0.5 克 1.5 克计数，根据贝苗总重，推算出贝苗数量， 连续取样 3次，取其平均值。 8.5.4 包装 采用筛绢袋盛苗，扎紧袋口，用砂滤海水淋湿贝苗，置于开口的塑料桶、泡沫箱等硬质容器中。装苗容器不应积水。 8.5.5 运输 采用干法运输，途中保持贝苗湿润，严防暴晒、雨淋、风吹。运输时间不宜超过 15
12、 小时 ， 长时间运输宜用空调车或飞机。 9 饵料培养 9.1 藻种保存 保存在试管或三角烧瓶中，在光照培养箱中保存。 9.2 一级培养 在具备控温、调光装置条件的室内进行， 采用容积 为 500 毫升 3000 毫升 三角烧瓶。培养器皿 应烘箱高温消毒后使用，培养液 应 煮沸消毒。营养盐要求分析纯。扩种所用海水亦 应 煮沸消毒，达到 灭菌效果。 9.3 二级培养 采用白色塑料桶或 挂袋 培养，容积 为 50 升 100 升 。培养液 应采用有效氯或漂白精消毒 ， 并 用硫代硫酸钠 中和 去除余氯。 9.4 生产性培养 采用面积为 20 平方米 40 平方米 的培养池，蓄水高度为 60 厘米
13、100 厘米 。培养液用 100 毫克/升 漂白粉消毒，经 10 小时 12 小时 ，用等量硫代硫酸钠中和后使用。 9.5 藻类 供应 DB33/T 905 2014 6 供幼虫投喂使用的藻液。 投喂的藻液应停止施肥培养 3 天 以上，氨氮含量在 1 毫克 /升 以下。 10 中间 培育 10.1 池塘培育 10.1.1 设 施 池塘面积为 0.6 公顷 2 公顷 ，培苗滩面表层软泥厚度以 5 厘米 10 厘米 为 宜 。翻耕涂面 、 挖浅沟 、整 畦，每 畦 面积 以 60平方米 70平方米为宜 ，蓄水 至畦面 50 厘米 60 厘米 。 池塘 养殖区 应 分别设置独立的进排水设施。池塘内培
14、育苗种的滩面四周 应 设置高 于蓄水位 20 厘米的聚乙烯网。 10.1.2 苗种 10.1.2.1 规格 壳长 500 微米 。 10.1.2.2 密度 每 畦（ 60 平方米 70 平方米 ） 以 3 106 颗 5 106 颗 苗为宜。 10.1.2.3 疏养 培养 15 天为宜 ，起苗、清洗、除害并分苗疏养。 10.1.2.4 查苗 定期 检查贝苗的成活率和生长情况。 10.1.2.5 记录 做好水温、盐度、进排水、 投入品 等日常工作记录。 10.1.3 除害 投放贝苗前，用 20 目 40 目 网袋刮除螺类、蟹类等敌害生物 。 然后用 生石灰、漂白粉、茶籽饼、鱼藤精等 药物清塘 。
15、 主要药物 使用方法见表 1。使用 其他 药物应符合 NY 5071的规定。 表 1 常用清塘药物的功能和使用方法 药物名称 浓度（ 毫克 /升 ） 使用方法 主要靶目标种类 药效消失时间 生石灰 375 500 干洒或兑水全塘（池）泼洒 鱼、虾、蟹、贝、细菌、藻类 10 天 漂白粉 30 50 先加少量水调成糊状，再兑水泼洒 鱼、虾、蟹、贝、细菌、藻类 1 天 茶籽饼 15 30 敲碎，用水浸泡 24 小时 后稀释泼洒 鱼类 2 天 3 天 鱼藤精 2 3 用水混合后均匀泼洒 鱼类 2 天 3 天 10.2 无附着基培育 10.2.1 水泥池集约化培育 DB33/T 905 2014 7 将
16、苗均匀地泼撒于水泥池底培育，培育密度按 本标准 8.2执行 。 10.2.2 上升流装置集约化培育 利用气流带动垂直水流通过贝类苗层进行苗种培育； 将上升流 装置安放于木筏上，气管与 U型管相连， U型管的一端与培育装置上端一侧的开口处相连，另一端置于培育装置中间，整个木筏连同培育装置一起置于养殖池塘的中央 ，具体操作可参照附录 A。 实现主 动式上升流，气流量需达到 8.5 升 /分钟。在以气压压强来控制时，气压压强应控制在 0.016 兆帕斯卡 0.024 兆帕斯卡范围内。流水量控制在 6 升 /分钟，幼虫培育密度为 2.5 克 /立方厘米。 10.2.3 平面流装置集约化培育 通过提水装
17、置使养殖池塘的水进入蓄水装置，后者放水分流到每个平面水槽，使水流均匀流过置于平面水槽内的贝类苗种，然后由水槽另一端流出，最终流入养殖池塘中。具体操作可参照附录 B。水流量为 5 升 /分钟 12 升 /分钟 ，幼虫培育密度为 0.3 千克 /平方米 0.625 千克 /平方米，贝苗成活率及生长率都较为理想。 11 苗种 质量要求 11.1 规格 壳长为 10 毫米 20 毫米 。 11.2 质量 检验 11.2.1 感官检验 肉眼应可见苗体规格均匀，清洁 干净，无附着生物，无异味 。 11.2.2 规格合格率、伤残空壳率、杂质率 规格合格率 90%；伤残空壳率 5%；杂质率 5%。 11.2.
18、3 质量安全要求 贝体污染物 限量按 GB 2762的规定执行，贝体农药残留限量按 GB 2763的规定执行，贝体渔药残留限量按 GB 18406.4的规定执行， 麻痹性贝类毒素、腹泻性贝类毒素按 NY 5073的规定执行。 11.3 试验方法 11.3.1 感官要求 将样品放于洁净的白瓷盘中，在自然光明亮处，感官检测苗种壳色、气味、活力等 。 将适量样品置于自然海水中进行活力检测。 11.3.2 安全要求 污染物检测 按 GB 2762的规定执行，农药检测按 GB 2763的规定执行，渔药检测按 GB 18406.4的规定执行，麻痹性贝类毒素、腹泻性贝类毒素的检测按 NY 5073的规定执行
19、。 氯霉素的检测按 SC/T 3018的规定执行，呋喃 唑 酮的检测按 SC/T 3022规定执行 。 11.4 判定规则 DB33/T 905 2014 8 11.4.1 组批规则 以相同培育方式培育池或同一产地、同一时间捕捞为一检验批。 11.4.2 抽样方法 抽样方法按 SC/T 3016执行。抽样数量按 SC/T 2042执行 。 11.4.3 合格判定 规格合格率、伤残空壳率、杂质率和感官检验，检验结果两项以上不合格，则判定本批苗种为不合格 ； 一项不合格，允许复检，复检不合格则判定本批苗种为不合格。安全指标检验结果中有一项不合格则判定本批苗种不合格，不得复检。 12 标准化生产模式图 滩涂埋栖型双壳贝类苗种人工繁育标准化生产模式图见附录 C。
