1、 DB41 河南省 地 方 标 准 DB 41/T 833 2013 饲料中氟、 氯化物、 总磷的测定 离子色谱法 Determination of fluorine， chloride， total phosphorus in fodder Ion chromatography method 2013 - 09 - 05 发布 2013 - 11 - 05 实施 河南省质量技术监督局 发布 DB41/T 833 2013 I 前 言 本标准按照 GB/T 1.1-2009标准化工作导则 第 1 部分：标准的结构和编写和 GB/T 20001.4-2001标准编写规则 第 4 部分：化学分析方
2、法给出的规则起草。 本标准由河南省质量技术监督局提出。 本标准起草单位：开封市质量技术监督检验测试中心。 本标准主要起草人：李红艳、李健、郭宏毅、陈书磊、韩超、张庆、杜蘅。 本标准参加起草人：贺笑笑、陈成、刘勇、邱媛婧、栗琳、郭嘉、朱闪闪。 DB41/T 833 2013 1 饲料中氟、 氯化物 、 总磷的测定 离子色谱法 1 范围 本标准规定了饲料中氟、氯化物、总磷含量的离子色谱测定方法。 本标准适用于配合饲料、浓缩饲料、精料补充料中氟、氯化物、总磷含量的测定。 本方法检出限为：氟（ F）0.4 mg kg； 氯化物（NaCl）1.0 mg kg；总磷（ P）5.0 mg kg。 2 规范性
3、引用文件 下列文件对于 本文件的应用是必不可少的。凡是注日期的引用文件，仅注日期的版本适用于本文件。凡是不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适用于本文件。 GB/T 6682 分析实验室用水规则和试验方法 GB/T 602 化学试剂 杂质测定用标准溶液的制备 GB/T 20195 动物饲料 试样的制备 3 原理 用 碱固定饲料 试样中的氟，过氧化氢、硝酸镁助灰化，高温破坏试样中有机物，使氟转化为盐形式、各种赋存形态的磷游离出来并在碱性条件下生成正磷酸盐；用水溶解灰分中的氟、氯化物、磷酸盐，溶液经固相萃取柱净化，阴离子色谱柱分离，电导检测器检测试样中氟、氯化物、总磷，以保留时间定性
4、，外标法定量。 4 试剂和溶液 4.1 一般要求： 除另有说明，测定过程中所使用的化学试剂均为优级纯；水应符合 GB/T 6682 一级水规格。 4.2 无水碳酸钠（Na 2CO3）。 4.3 碳酸氢钠（NaHCO 3）。 4.4 氟化纳（NaF ） 。 4.5 氯化钠（NaCl ） 。 4.6 磷酸二氢钾（KH 2PO4）。 4.7 氢氧化钾（KOH ）。 4.8 过氧化氢（30% H2O2） 4.9 硝酸镁 Mg（ NO3） 2 。 4.10 甲醇（CH 3OH）。 4.11 碳酸钠储备液 (1.0 mol/L)：称取 106g 无水碳酸钠（4.2 ）于 250 mL 烧杯中，用水溶解后移
5、入 1000 mL容量瓶中，稀释至刻度，摇匀 。 DB41/T 833 2013 2 4.12 碳酸氢钠储备液 (1.0 mol/L)：称取 84g 碳酸氢钠（ 4.3）于 250 mL烧杯中，用水溶解后移入 1000 mL 容量瓶中，稀释至刻度，摇匀 。 4.13 淋洗液：分别吸取碳酸钠储备液（ 4.11）、碳酸氢钠储备液（ 4.12）稀释成碳酸钠 4.5 mmol/L；碳酸氢钠 0.8 mmol/L。 或 根据所用分析柱的特性， 分别吸取适当体积的碳酸钠储备液（ 4.11）、碳酸氢钠储备液（4.12 ）稀释成 适于所用分析柱要求的浓度作为淋洗液，使用时配制。 4.14 再生液：根据所用抑制
6、 器（电解抑制器或微模抑制器），参考抑制器说明 ，选择不同的再生方式。 4.15 氟 化物标准溶液： （ F） = 0.1 mg/mL（水基体），按 GB/T 602 配制。 4.16 氯 化物标准溶液： （ Cl）= 0.1 mg/mL（水基体），按 GB/T 602 配制。 4.17 磷 标准溶液： （ P） = 0.1 mg/mL（水基体）， 按 GB/T 602 配制。 4.18 氢氧化钾乙醇溶液： （ KOH）= 10 0g/L 。 4.19 硝酸镁乙醇溶液： Mg（NO 3） 2 = 100 g/L。 5 仪器和设备 5.1 离子色谱仪：配有抑制器；阴离子分析柱；电导检测器。 5.
7、2 镍坩埚或银坩埚： 50 mL。 5.3 可调温电炉：1 000 W 。 5.4 马弗炉：可控温 50010。 5.5 溶剂过滤装置（水系膜： 0.45 m）。 5.6 试样瓶： 聚乙烯或高密度聚丙烯材质， 10 mL、 25 mL、 50 mL，使用前需充满水超声清洗 30 min，倾出水，再用水洗涤 2 3 次，晾干备用。 5.7 一次性注射器：1 mL、5 mL 、10 mL 。 5.8 净化柱： OnGuraod RP1)（ 1 mL或 2.5 mL）柱 。 注：使用前需活化：用注射器分别抽取 5 mL甲醇、 10 mL纯水，以 2 mL/min 4 mL/min流速通过小柱，平放
8、20 min充分水合活化。 OnGuraod RP使用后可按照上述步骤重新活化，反复使用。如重新活化后小柱填料颜色不褪去，则应更换。 5.9 净化柱： OnGuraod H1)（1 mL 或 2.5 mL）柱，或等效的样品前处理小柱。 注：柱使用前需活化：用注射器抽取纯水 20 mL，以 2 mL/min 4 mL/min流速通 过小柱，平放 20 min充分水合活化，OnGuraod H 柱不可再生。 5.10 针式过滤器（水系膜： 0.22 m）。 6 分析步骤 6.1 试样的制备 按GB/T 20195 规定的方法进行。 6.2 测试溶液的制备 6.2.1 试样的分解 1) 是适合的市售
9、产品的实例，给出这一信息是为了方便本标准的使用者，并不表示对这一产品的认可。如果其他等效产品具有相同的效果，则可使用这些等效产 品。 DB41/T 833 2013 3 称取试样 2 g（精确至 0.0001g） ，置于坩埚 （5. 2）中，加氢氧化钾乙醇溶液（ 4.18）2 mL、过氧化氢（4.8 ）1 mL、硝酸镁 乙醇溶液 (4.19) 2 mL，混匀后浸泡1 h，在电炉 （5.3 ）上低温炭化 至不冒烟为止；加盖，移入马弗 炉 （5. 4）中，待温度升至 500保持6 0min，取出冷至室温， 用水分数次洗涤坩埚，合并入100 mL 容量瓶中，稀释至刻度，摇匀备用。 6.2.2 净化
10、将试样溶液用滤纸过滤，弃去初滤液，收集滤液于试样瓶 (5.6)中。 用一次性注射器（ 5.7）抽取该滤液，以2 mL/min 4mL/min 流速 依次 流过净化柱（ 5.8）、 （5.9 ）、 针式滤器 （5. 10） ，弃去前面 3 mL（ 1.0 mL净化柱）或 6 mL（2.5 mL 净化柱 ），收集净化液备用。 6.2.3 空白 实验 除不加试样外，操作同 6.2.1 和 6.2.2。 6.3 色谱分析 6.3.1 色谱条件 测定结果与所使用仪器和条件有关，设定的参数应保证色谱分析时目标组分与其它组分能有效分离，下列给出的参数已被证明是可行的，采用其他条件应验证其适用性： a) 阴离
11、子分析 柱： Dionex Ionpac AS232)（ 250mm4mm），带 AG232)（4mm 50mm ）保护柱； b) 抑制器：自循环 电解连续再生抑制器； c) 抑制电流： 25mA； d) 淋洗液：用前应过滤脱气； e) 检测器：电导检测器； f) 柱温：30 ； g) 流速：1.0 mL/min ； h) 进样量：10 L 。 6.3.2 标准曲线 按表 1 配制 混合 标准溶液 ，用于制作标准曲线。 表1 混合标准 溶液 系列 中各阴离子浓度 阴离子 混合 标准 溶液 浓度 F- ， (mg/L) 0.01 0.05 0.25 1.00 2.00 3.00 4.00 Cl-
12、， (mg/L) 0.10 0.50 2.50 5.00 10.00 15.00 30.00 P， (mg/L) 0.50 2.00 5.00 10.00 20.00 30.00 50.00 分别吸取各浓度的标准溶液 10L，按浓度 由低到高 的顺序 依次注入离子色谱仪中，得到相应的色谱图（参见附录 A 图 A.1） ，测得各阴离子不同浓度响应值 的峰面积； 以阴离子浓度为横坐标，峰面积为纵坐标绘制 F- 、 Cl- 、 P 标准曲线并计算 线性回归方程。 6.3.3 试样测定 2)是适合的市售产品的实例，给出这一信息是为了方便本标准的使用者，并不表示对这一产品的认可。如果其他等效产品具有相同
13、的效果，则可使用这些等效产品。 DB41/T 833 2013 4 在相同色谱条件下，依次进空白液（6.2.3 ） 、 试样溶液（ 6.2.2）各 10 L，得到试样色谱图，以保留时间定性、外标法定量， 试样色谱图参见附录 A 图 A.2。 7 结果计算 7.1 氟（以 F计）的含量以质量分数 1w 计，数值以（ mg/kg）表示，按式（ 1）计算： mVw 11 (1) 式中： 1 试样溶液中氟离子的响应值在 标准曲线 上对应的质量浓度，单位为毫克每升 (mg/L)； V 试样溶液体积，单位为毫升 (mL)； m 试样质量，单位为克 (g)。 7.2 氯化物（以 NaCl计） 的含量以质量分
14、数 2w 计，数值以（%）表示，按式（ 2）计算： 6485.110010001000/22 m Vw (2) 式中： 2 试样溶液中氯离子的响应值在标准曲线 上对应的质量 浓度， 单位为毫克每升 (mg/L)； V 试样溶液体积， 单位为毫升 (mL)； m 试样质量，单位为克 (g)； 1.6485 氯化物换算 为 食盐 （以 NaCl计） 的 系数。 7.3 总磷（以 P计）的含量以质量分数 3w 计，数值以（% ）表示，按式（ 3）计算： 10010001000/23 m Vw .(3) 式中： 2 试样溶液中磷酸根离子的响应值在标准曲线 上对应的质量浓度， 单位为毫克每升 (mg/L
15、)； V 试样溶液体积，单位为毫升 (mL)； m 试样质量，单位为克 (g)。 7.4 以重复性条件下获得的两次独立测定结果的算术平均值表示，结果保留至小数点后一位。 8 精密度 在重复性条件下获得的两次独立测定结果的相对偏差不大于 10。 DB41/T 833 2013 5 A A 附 录 A （资料性附录） 离子 色谱图 A.1 标准溶液离子色谱图 标准溶液离子色谱图见图 A.1。 0.0 2.5 5.0 7.5 10. 0 12. 5 15. 0 17. 5 20. 0 22. 5 25. 0 27. 5 30. 0-0. 200.5 01.0 01.5 02.0 02.5 03.0
16、05种 阴离子标准曲线 #9 8 由D ION EX修 改 ECD _1 Smin电导率 S保留时间 m in1 -F- 3.4572 -Cl -5.9833 -HPO4- 15.9401氟离子（ F-）、 2氯离子（ Cl-）、 3 磷（ P） 。 图 A.1 标准溶液离子色谱图 A.2 试样溶液离子色谱图 试样溶液离子色谱图见图 A.2。 0.0 2.5 5.0 7.5 10. 0 12. 5 15. 0 17. 5 20. 0 22. 5 25. 0 27. 5 30. 0-0. 200.5 01.0 01.5 02.0 02.5 03.0 05种 阴离子标准曲线 #2 2 由D ION EX修 改 ECD _1 Smin电导率 S保留时间 m in1 -F- 3.5702 -Cl -5.9233 -HPO4- 16.0001氟离子（ F-）、 2氯离子（ Cl-）、 3 磷（ P）。 图 A.2 试样溶液离子色谱图 _
