1、1 印月9410月 本標準非經本局同意得翻印 中華民國國家標準 CNS 總號 號 ICS 11.040.30 14775 T4037 經濟部標準檢驗局印 公布日期 修訂公布日期 9210月9日 月日 醫用面罩材料細菌過濾效率試驗法 使用金黃色葡萄球菌生物氣霧 (共6頁) Method of test for evaluating the bacterial filtration efficiency (BFE) of medical face mask materials, using a biological aerosol of staphylococcus aureus 1. 適用範圍
2、1.1 本標準規定測醫用面罩材細菌過效的試驗法，由過前之細菌和過後之細菌殘存之比值評估醫用面罩材的細菌過效。 備考1. 本測試法可檢測醫用面罩材的過效至99.9。 2. 本測試法並適用生物氣霧曝的所有形式或態。測試者應檢視穿戴者的曝模式並且評估出最合適測試者的測試方式。 3. 本測試法主要用評估使用在醫用面罩其組合材功能，而探討面罩的設計、合適性和臉部的密合性質，所以測出相對高的細菌過效之特殊醫用面罩材，並能確定穿戴者能免受生物氣霧傳染。 4. 本標準未規範所有與使用相關的安全規定，使用者須在使用前建適當的安全和衛生程序，並判斷一般使用時之限制。 2. 用語釋義 2.1 本標準之主要用語除依C
3、NS 14778防護衣詞彙之規定外，其他用語規定如下： 2.1.1 氣霧(aerosol)：在氣體中懸浮的固體或液體顆。 2.1.2 瓊脂(agar)：用於使細菌和其它微生物生長的半固體培養基。 2.1.3 空氣媒介的曝徑（airborne exposure pathways）：醫用面罩穿戴者之吸氣曝徑。 2.1.4 細菌過效(bacterial filtration efficiency)：製作醫用面罩材阻止懸浮細菌通過之效能，表示方法為在一定噴霧下，已知懸浮細菌中能通過醫用面罩材之百分比。 2.1.5 生物氣霧(biological aerosol)：在氣體中懸浮的生物顆。 2.1.6 血
4、液媒介病原（blood-borne pathogen）：感染性細菌、病毒或其他在血液或潛在感染液體之微生物。 2.1.7 體液(body fluid)：任何人體產生、分與排泄之液體。 2.1.8 防護衣(protective clothing)：為隔部分身體與潛在性危害的外裝之材或組合材。 2 CNS 14775, T 4037 2.1.9 醫用面罩 (medical face mask)：一個保護衣的零件，在治療過程中，用於保護使用者臉部避免接觸微生物、微粒、病人之血液或體液，至少包括使用者口鼻之黏膜區域。 3. 方法摘要 3.1 將醫用面罩固定在 Anderson 取樣器 (如圖 1)與氣
5、霧艙之間，利用霧化器和培養的金黃色葡萄球菌懸浮液將細菌氣霧導入氣霧艙。以真空幫浦把氣霧抽吸通過醫用面罩而抵達 Anderson 取樣器。 Anderson 取樣器是用六個瓊脂培養皿收集通過醫用面罩的氣霧液滴。對照組是在測試儀器中未經過測試樣品過濾之氣霧數量。 圖 1 細菌氣霧過濾效率裝置中六段式 取樣器 3.2 將 Anderson 取樣器中的瓊脂培養皿培養 48 h，並計算所收集的活菌數。計算測試樣品過濾前後效果之比值，即為細菌過濾效率。 4. 重要性與應用 4.1 本試驗法可用於評估醫用面罩的細菌過濾效率，並無法定義出可容忍的細菌過濾效率等級。因此若利用本試驗法，必須說明在何種特殊條件下進
6、行測試。 4.2 本試驗法使用金黃色葡萄球菌作為試驗細菌，其主要因素為臨床上該細菌是誘發院內感染的主因。 4.3 本試驗法允許試驗氣霧通過試樣的內面或外面，因此可用於評估患者和穿戴者所產生氣霧之過濾效率。 4.4 物理、化學及熱應力造成的降解，均會造成醫用面罩的不良影響。而產品也可能因折曲、磨損或因酒精和呼吸造成受潮等因素，而損害產品功能。因此如果 3 CNS 14775, T 4037在產品的測試時沒有考量到這些因素，則會導致濳在的安全問題。因此在測試產品對細菌過濾效率的同時，考量上述這些因素和使用的狀況，作適當的產品前處理。並可藉此判斷拋棄式產品的保存條件及時間，或是評估經洗滌及滅菌後可重
7、覆使用產品的性能。 5. 儀器與材料 5.1 儀器 5.1.1 滅菌釜：可維持在 121 123 。 5.1.2 培養箱：可維持在 372 。 5.1.3 分析天平：可精稱至 0.001 g。 5.1.4 渦流混合器：可混合 16 mm150 mm 試管的內容物。 5.1.5 橢圓形振盪器：可達 100250 rpm。 5.1.6 冰箱：可維持 2 8 。 5.1.7 Anderson 取樣器。 5.1.8 真空幫浦：可達 57 L/m。 5.1.9 空氣壓縮機：表壓可達 1.055 kgf/cm2(15 psig)。 5.1.10 蠕動幫浦：可輸送 0.01 mL/min。 5.1.11 霧
8、化器：依第 11.3 節，每次在測試時能輸送平均粒徑為 30.3 m，數量為2200500 之活菌數。 5.1.12 玻璃氣霧艙：長度 60 cm，管徑 8 cm。 5.1.13 菌落計數器：手動或自動，可計算每個培養皿上之菌落數達 400。 5.1.14 計時器：準確度至 0.1 s。 5.1.15 自動吸管：可輸送 1.0 0.05 mL。 5.1.16 流量錶：可達 28.3 L/min。 5.1.17 氣霧冷凝管。 5.1.18 壓力錶：準確度至 351 kPa。 5.1.19 空氣調節閥。 5.2 材料 5.2.1 燒瓶： Erlenmeyer 規格 250 500 mL。 5.2.
9、2 無菌細胞培養盤： 15100 mm。 5.2.3 移液管： 1, 5 和 10 mL 。 5.2.4 不銹鋼試管架。 5.2.5 滅菌玻璃量瓶：容積為 100500 mL。 5.2.6 接種環。 5.2.7 瓶塞：尺寸大小適合於試管。 5.2.8 試管： 16 150 mm。 6. 試劑 6.1 消化大豆瓊脂培養基 (TSA)。 6.2 消化大豆蛋白培養液 (TSB)。 4 CNS 14775, T 4037 6.3 蛋白腖水溶液。 6.4 金黃色葡萄球菌 ATCC#6538。 7. 危害性 7.1 將所有接觸到細菌懸浮液的器具和設備，利用滅菌釜 121 123滅菌至少15min。以避免污
10、染實驗室。 7.2 雖然金黃色葡萄球菌在人體中是常見的菌叢但是會導致院內感染，且是一種人體的病原菌。技術人員在操作實驗前，必須有適當的微生物技術訓練。在實驗過程中，需穿戴手套和防護衣以免受感染。 7.3 所有的氣霧必須密封以避免感染及降低實驗室的污染。 8. 培養基的製備 8.1 使用標準的微生物技術來製備培養基。 8.2 依取樣器製造商之說明，製備瓊脂培養皿。 9. 試樣 9.1 試樣須取自醫用面罩成品，每一層依正確順序排列。 10. 調適 10.1 利用可調整溫溼度的空間，將試樣在溫度 215 和相對溼度 855 下，調適至少 4 h。 11. 測試細菌的製備 11.1 接種適當體積的 T
11、SB，於 372 下溫和震盪培養 242 h。 11.2 以蛋白腖水溶液稀釋菌株至濃度約為 5105CFU/mL。 11.3 細菌的輸送量維持在每次測試中有 2200500 活菌數。根據未放試樣之陽性對照組所收集到的氣霧，決定出每天測試的細菌輸送量。測試時必須將稀釋的細菌懸浮液調整至最適合輸送的細菌量。 12. 試驗步驟 12.1 氣霧試驗裝置如圖 2 所示。 12.2 利用蠕動式或針筒式幫浦輸送細菌至霧化器。連接霧化器和蠕動幫浦及菌液間的管路；清除管路和霧化器內的氣泡。 備考：蠕動式或針筒式幫浦必須校正成測試期間可輸送均一量的細菌積。 12.3 在測試系統中不含試樣時進行陽性對照組試驗，以決
12、定所產生的活菌數。經由計算陽性控制組的結果，可得氣霧的平均顆粒大小。 12.4 打開連接至霧化器的氣壓和幫浦，開始形成氣霧。 12.5 立即採集在 Anderson 取樣器的氣霧，調整通過取樣器的流量至 28.3 L/min。 12.6 輸送菌液到霧化器運作 1 min。 12.7 氣壓與取樣器運作 2 min。 12.8 當陽性對照組測試完時，將每個培養皿其從取樣器移出並標 註相對應的順序。 12.9 置放新的瓊脂培養皿到取樣器並將試樣固定到取樣器的最上層，將試樣的內面或外面朝向細菌體。 12.10 如上所述產生氣霧。 5 CNS 14775, T 403712.11 每個試樣都重複測試。
13、12.12 在完成測試樣品後，重複陽性對照組試驗。 12.13 在不含細菌時氣霧艙收集之 2 min 的空氣樣本進行陰性對照組試驗。 12.14 在 372 下，培養瓊脂培養皿 484 h。 12.15 計算取樣器中的每一培養皿的菌落數。 12.16 加總試樣和陽性對照組各六個培養皿之菌落。由下列公式，可計算出細菌過濾效率的百分比： 100CTC=%BFE 式中： C：對照組總菌落數平均值。 T：試樣總菌落數。 12.17 利用取樣器製造商提供規格計算氣霧顆粒平均大小。細菌氣霧的平均顆粒大小應維持在 3.00.3 m。 圖 2 細菌氣霧過濾效率測試裝置 13. 報告 13.1 敘述以本標準之試
14、驗法進行試驗。 13.2 敘述試樣的測試面積。 13.3 敘述測試期間的流量。 13.4 敘述氣霧的平均顆粒大小。 13.5 敘述每個試樣的細菌過濾效率百分比。 13.6 敘述陽性對照組平均總菌落數。 13.7 敘述陰性對照組平均總菌落數。 6 CNS 14775, T 4037 13.8 敘述每個培養皿的總數。 13.9 敘述試樣那一面朝向氣霧。 14. 精密度 14.1 精密度：本標準試驗法量測醫用面罩的細菌過濾效率，根據個別實驗室和操作者使用三種材料重複測試。測試的結果總結在表 1。 表 1 各種不同材料之細菌過濾效率性能再現性 材 料 x Sr t A 99.54 0.1753 0.1
15、035 B 99.30 0.3521 0.2081 C 94.48 1.0400 0.6146 x ：每種材料的平均值。 Sr：每種材料再現性的標準差。 t：每種材料 95 %再現性的極限值。 引用標準： CNS 2779 計數值檢驗抽樣程序及抽樣表 CNS 14778 防護衣詞彙 參考標準： ASTM F 2101-01 Standard Test Method for Evaluation the Becterial Filtra-tion Efficiency(BFE)of Medical Face Mask Material, Us-ing a Biological Aerosol of Staphylococcus aureus
