1、研究生入学考试生物化学（蛋白质）历年真题试卷汇编 1 及答案与解析1 (复旦大学 2008 年考研试题)人体中不存在 D 型氨基酸。（A）正确（B）错误2 (复旦大学 2008 年考研试题)溶液的离子浓度会影响蛋白质之间的氢键作用的强弱。（A）正确（B）错误3 (复旦大学 2008 年考研试题)纸层析分离氨基酸的原理是利用了氨基酸侧链在极性上的差异。（A）正确（B）错误4 (复旦大学 2008 年考研试题)Edman 试剂可以用来进行氨基酸的定量。（A）正确（B）错误5 (复旦大学 2008 年考研试题)DTT 能破坏蛋白质分子的二硫键，所以是酶的失活剂。（A）正确（B）错误6 (复旦大学 2
2、008 年考研试题)分子伴侣是帮助蛋白质折叠的 ATP 酶。（A）正确（B）错误7 (中山大学 2009 年考研试题)人体中有 8 种必需氨基酸必须从食物摄取。（A）正确（B）错误8 (中山大学 2009 年考研试题)蛋白质具有高级结构，而 DNA 和 RNA 没有高级结构。（A）正确（B）错误9 (中山大学 2009 年考研试题)完成折叠的蛋白质，其分子内氢键的数目倾向于达到最大。（A）正确（B）错误10 (中山大学 2009 年考研试题)构成蛋白质的 20 种氨基酸都是必需氨基酸。（A）正确（B）错误11 G 蛋白是信号传导的重要蛋白质组分。（A）正确（B）错误12 DNA 的复制过程同时
3、需要 DNA 聚合酶和 RNA 聚合酶参与。（A）正确（B）错误13 甲流感、艾滋病、SARS 都是病毒引起的。病毒自身有高效的 DNA 复制、转录和翻译机制，因而传播快、控制难。（A）正确（B）错误14 RNA 编辑15 核酸杂交16 小 RNA17 阻遏蛋白18 反式作用因子(转录因子)三、填空题请完成下列各题，在各题的空处填入恰当的答案。19 (复旦大学 2008 年考研试题)氨基酸之一的苏氨酸 Thr 有_种光学异构体。20 (复旦大学 2008 年考研试题)将一个蛋白质样品中的盐离子除去的方法有_、_等。21 (复旦大学 2008 年考研试题)浓缩蛋白样品的主要方法有_、_、_等。2
4、2 (复旦大学 2008 年考研试题)在紫外有特征吸收峰的氨基酸有_、_、_等。23 (复旦大学 2008 年考研试题)常用的阳离子交换树脂有_、_等。24 (中山大学 2009 年考研试题)第一个被解析出晶体结构的蛋白是_。25 (中山大学 2009 年考研试题)某同源蛋白中的 Ala 残基被替换为 Val，此类替换属于_。26 (中山大学 2009 年考研试题)蛋白质折叠的推动力主要来自于非共价作用中的_。27 (中山大学 2009 年考研试题)寡糖与蛋白的 O 连接指与 Ser 或 Thr 的侧链羟基 O连接，N 连接指_。28 (中山大学 2009 年考研试题)常见的蛋白质超二级结构类
5、型有 Greekkey、-acomer 和_等。四、不定项选择题下列各题的备选答案中，有一个或多个是符合题意的，请选出所有符合题意的备选答案。29 酶的催化效果是由于( )。（A）增加反应底物和产物之间的自由能差（B）降低反应底物和产物之间的自由能差（C）减少反应所需的能量（D）增加反应所需的能量30 下列关于酶的陈述正确的是( )。（A）酶的浓度必须与底物的浓度一致才有催化效果（B）酶增加了反应的平衡常数，因此有利于产物的形成（C）酶加快了底物向产物转化的速率（D）酶可以确保把所有的底物转化为产物（E）酶可以降低底物向产物转化的活化能31 下列关于胞内碳水化合物特征的选项中正确的是( )。（
6、A）在动植物体内作为能量存储（B）是植物组织的主要结构组成（C）是蛋白质的结合位点（D）是有机催化剂（E）具有细胞间相互识别的功能32 下列是杂多糖的有( )。（A）肝糖原（B）透明质酸（C）淀粉（D）纤维素（E）几丁质33 下列脂类中是膜脂的有( )。（A）胆固醇（B）三酰基甘油(甘油三酯)（C）磷脂酰甘油（D）脑苷脂（E）鞘磷脂34 下列在 280nm 波长处吸光值最大的是( )。（A）色氨酸（B）半胱氨酸（C）赖氨酸（D）苯丙氨酸（E）酪氨酸34 从截然不同的环境中分离了两种不同的菌：A 是从平均水温约为 40的温泉中获得，B 是从平均水温约为 4的冰川湖中获得。35 哪一种菌的膜脂上含
7、有更多的不饱和脂肪酸?( )36 哪一种含有更长链的脂肪酸?( )37 在 27哪一种可能具有更高的膜流动性?( )38 下列关于乙醛酸循环的描述正确的是( )。（A）能够将脂肪酸氧化的产物最终转变成葡萄糖（B）在氨基酸形成过程中为柠檬酸循环提供中间介质（C）消耗细胞内储存的草酰乙酸（D）在植物中代替柠檬酸循环而存在39 尿素循环发生在细胞两个不同的部位，下面的哪个中间代谢产物必须要转运进线粒体内膜?( )（A）精氨琥珀酸（B）瓜氨酸（C）鸟氨酸（D）延胡索酸40 关于对糖异生的调控下列说法正确的是( )。（A）糖原激活腺苷酸环化酶，形成 Camp（B）环化腺苷酸通过磷酸化反应激活果糖二磷酸酶
8、（C）果糖二磷酸酶能够降低 2，6-二磷酸果糖的水平，因此提高了糖异生的速率（D）它与糖酵解反应相互调节41 在炎热干燥的环境下，C 3 植物的竞争力不如 C4 植物是因为( )。（A）C 4 植物不需要像 C3 植物那么多的 ATP 来固定 CO2 合成己糖（B） C4 植物在炎热的环境下能够更加有效地利用 CO2，因为它们能够增加维管束细胞中的CO 2（C） C3 植物中的 rubisco 酶加氧反应的 Km 值较高（D）C 4 植物能够绕过 Calvin 循环节省能量42 维持蛋白质螺旋结构稳定主要靠哪种化学键?( )（A）离子键（B）氢键（C）疏水键（D）二硫键43 免疫蛋白是( )
9、。（A）铁蛋白（B）糖蛋白（C）铜蛋白（D）核蛋白44 (浙江大学 2009 年考研试题)以下哪个是正确的?( )（A）氨基酸能作为质子的供体和受体（B）酸性越强，K a 值越高（C）酸性越强，pH 越小（D）氨基酸是两性的（E）均正确45 (浙江大学 2009 年考研试题)以下多肽序列中，那个最有可能形成 -螺旋结构?( )（A）Gry-Ile 一 Trp 一 Leu-Ile-Ile-Phe-Gly-Val-ValAlaGly-Val-Ile-Gly-TrpIleLeu 一 Leu-Ile（B） Gly-Pro-Hyp-Gly-ProMetGly-ProSer-GlyPro-Arg-Gly-
10、Pro-HypGlyPro-HypGly（C） GlyMet-TrpPro-Glu-Met-Cys-Cly-GluFroAla-HisVal-Arg-Asp-Tyr-Pro-Leu-Leu（D）Cry-Met-Trp-Pro-Glu-Met-Cys-Gly-Glu-Pro-Ala-His-Val-Arg-Asp-Tyr-Cvs-Leu-Leu46 (浙江大学 2009 年考研试题)高原适应是一种复杂的生理过程，涉及每个红血球中血红蛋白分子数目增加，而且红血球总数也有增加。这往往需要几个周期才能完成。可是只要处于高原环境一天，人体就能表现出极大程度的适应性。这种效应来源于红血球 BPG 浓度的快
11、速升高。高原适应血红蛋白对氧气的结合亲和力与高原不适应血红蛋白相比( ) 。（A）高些（B）低些（C）一样47 (浙江大学 2009 年考研试题)蛋白 A、B 和 C 是与培养的细胞完整生物膜相关的膜蛋白(可能是膜外周蛋白，也可能是膜内在蛋白)。当含有这些蛋白的细胞在培养基的离子强度剧烈下降后，只有蛋白 A 还附着在细胞上。我们可以得出 ( )。（A）B 和 C 是膜外周蛋白（B） B 和 C 是膜内在蛋白（C） A 是膜外周蛋白（D）A 可能是膜内在蛋白，也可能是与膜脂共价结合的膜内在蛋白（E）A 和 D 都正确48 (浙江大学 2009 年考研试题)在人类食物摄取中，必需氨基酸指什么?(
12、)（A）在所有蛋白合成中必需（B）只可获取于动物蛋白中（C）人体自身不能合成（D）不能由 DNA 编码（E）在肝脏中不会被降解49 (南京大学 2008 年考研试题)某一蛋白质在 pH8O 时，在电场中向阳极移动，测其 pI( )（A）等于 80（B）大于 80（C）小于 80（D）无法确定50 (南京大学 2008 年考研试题)在 pH9 的天冬氨酸溶液里，下列哪一种结构占优势 ?( )（A）羧基氨基酸都不解离（B）只有 -羧基解离（C） -羧基和 -羧基都解离（D）只有 -羧基解离51 (厦门大学 2008 年考研试题)下列氨基酸溶液除哪个外都能使偏振光发生旋转?( )（A）Ala（B）
13、Gly（C） Pro（D）Ser52 (厦门大学 2007 年考研试题)下列有关谷胱甘肽(GSH)的论述，哪一项是不正确的?( )（A）保护血液的红细胞不受氧化损伤（B）维持血红蛋白的半脱氨酸残基处于还原态（C）与过氧化物反应起解毒作用（D）维持蛋白质的二硫键稳定53 (厦门大学 2007 年考研试题)血红蛋白分子中四条多肽链之间的连接键是( )。（A）配位键（B）二硫键（C）非共价键（D）共价键54 什么叫 DNA 多态性?DNA 亲子鉴定是通过分析个体 DNA 中的“短串联晕复序列”即 STR 来确定二个体间是否存在亲子关系。说明 STR 鉴定的基本原理和实验方法。55 描述蛋白质、核酸、
14、脂类和糖类四种生物大分子的主要功能和结构特征。56 描述细胞呼吸的三个阶段。57 假设你的实验指导老师给了你三种细菌，并且告诉你其中一种细菌是厌氧菌，能够通过发酵作用获得能量；另一种细菌可以通过柠檬酸循环和氧化磷酸化作用氧化葡萄糖获得能量；第三种细菌通过光合作用获得能量。三种细菌都可以代谓葡萄糖。你不小心将三种细菌培养物的名称弄混了。不借助任何生化检测手段(即不寻求研究生的帮助)，仅通过不同的实验室培养条件来确定三种培养物分别是哪一类细菌。58 用图描述在线粒体内膜上的电子传递复合体和电子载体的顺序，确定要列出最初的电子供体和最终的电子受体。59 描述你在吃了一个苹果之后，细胞内从果糖到二氧化
15、碳的整个代谢途径。60 描述进行 WesternBlotting、NorthernBlotting 和 SouthernBlotting 的实验目的和主要步骤。61 举例说明 2008 年诺贝尔化学奖成果绿色荧光蛋白(GFP)在生物学研究中的两种以上的用途。62 什么是表观遗传学? 基因组的表观遗传调控有哪些主要方式?63 分子生物学的实验室最常见的工作是要培养大肠杆菌，培养大肠杆菌的培养基中常加入不同种类的抗生素，这些抗生素的作用是什么?说出两种培养大肠杆菌的主要目的和原理。64 (中科大 2009 年考研试题)蛋白质和多肽的差异。65 (中科大 2009 年考研试题)在一个重组蛋白纯化过程
16、中发现以下现象：(1)在分子筛纯化中，发现有两个独立的蛋白质峰，但是这两个峰经过 SDS 凝胶电泳均只发现一条电脉条带；(2)在室温旋转一周后再进行 SDS 凝胶电泳发现在原来的条带下方又出现了两条新的电泳条带。这是为什么?如何采用可行的实验手段证实之? 并提出防止出现上述现象的解决方案。66 (郑州大学 2007 年考研试题)比较蛋白质 -螺旋中的氢键和 DNA 双螺旋中的氢键，并指出氢键在稳定这两种结构中的作用。67 (江南大学 2008 年、浙江工业大学 2006 年考研试题)含有以下四种蛋白质混合物：A，分子量 12000，pI=10；B ，分子量 62000， pI=3：C，分子量2
17、8000，pI=7；D，分子量 9000，pI=5。若不考虑其他因素，当它们：(1)流过DEAE 一纤维素阴离子交换柱时，用线性盐洗脱时；(2)流经 SEPFtADEXG75 凝胶过滤柱(排阻极限 300070000)时，这些蛋白质的洗脱顺序如何?阴离子交换柱起始pH 可选择什么范围?研究生入学考试生物化学（蛋白质）历年真题试卷汇编 1 答案与解析1 【正确答案】 B【试题解析】 人体中大多是 L 型氨基酸，但也存在 D 型氨基酸，例如有些非蛋白质氨基酸是 D 型氨基酸。【知识模块】 蛋白质2 【正确答案】 A【知识模块】 蛋白质3 【正确答案】 A【知识模块】 蛋白质4 【正确答案】 B【试
18、题解析】 Edman 试剂可以用来进行氨基酸的 N 端鉴定和测序，不能用来进行氨基酸的定量。茚三酮反应可以用来进行氨基酸的定量。【知识模块】 蛋白质5 【正确答案】 B【试题解析】 DTT 是还原剂，可延缓蛋白质的氧化，尤其保护酶中的不饱和二硫键，从而防止延缓酶的失活。【知识模块】 蛋白质6 【正确答案】 A【知识模块】 蛋白质7 【正确答案】 A【知识模块】 蛋白质8 【正确答案】 B【试题解析】 蛋白质具有高级结构，DNA 和 RNA 也有高级结构。DNA 的高级结构为 DNA 的双螺旋结构；RNA 高级结构为发卡结构。【知识模块】 蛋白质9 【正确答案】 A【知识模块】 蛋白质10 【正
19、确答案】 B【试题解析】 必需氨基酸是指人体自身不能合成或合成速度不能满足人体需要，必须从食物中摄取的氨基酸。必需氨基酸共有八种：赖氨酸、色氨酸、苯丙氨酸、蛋氨酸、苏氨酸、异亮氨酸、亮氨酸、缬氨酸。构成蛋白质的 20 种氨基酸不全是必需氨基酸。【知识模块】 蛋白质11 【正确答案】 A12 【正确答案】 A13 【正确答案】 B【试题解析】 甲流感、艾滋病、SARS 病毒都是 RNA 病毒，体内没有 DNA，不能进行高效的 DNA 复制。14 【正确答案】 RNA 编辑是指基因转录产生的 mRNA 分子中，由于核苷酸的缺失、插入或置换，基因转录物的序列不与基因编码序列：互补，使翻译生成的蛋白质
20、的氨基酸组成，不同于基因序列中的编码信息现象。RNA 编辑同基因的选择剪接或可变剪接一样，使得一个基因序列有可能产生几种不同的蛋白质，这可能是生物在长期进化过程中形成的、更经济有效地扩展原有遗传信息的机制。15 【正确答案】 互补的核苷酸序列(DNA 与 DNA、DNA 与 RNA、RNA 与 RNA等)通过 Watson-Crick 碱基配对形成非共价键，从而形成稳定的同源或异源双链分子的过程即为核酸杂交。其原理是核酸变性和复性理论，即双链的核酸分子在某些理化因素作用下双链解开，而在条件恢复后又可依碱基配对规律形成双边结构。核酸杂交技术主要包括制备样品、制备探针、杂交、检测等四个步骤。16
21、【正确答案】 小 RNA 即 microRNA(miRNA)，是在真核生物中发现的一类内源性的具有调控功能的非编码 RNA，其大小长约 2025 个核苷酸。成熟的 miRNA是由较长的初级转录物经过一系列核酸酶的剪切加工而产生的，随后组装进 RNA诱导的沉默复合体，通过碱基互补配对的方式识别靶 mRNA，并根据互补程度的不同指导沉默复合体降解靶 mRNA 或者阻遏靶 mRNA 的翻译。17 【正确答案】 阻遏蛋白(repressor protein) 是基于某种调节基因所制成的一种控制蛋白质，在原核生物中具有抑制特定基因(群)产生特征蛋白质的作用。由于它能识别特定的操纵基因(即操纵子是阻遏蛋白
22、的结合位点)，当操纵序列结合阻遏蛋白时会阻碍 RNA 聚合酶与启动序列的结合，或使 RNA 聚合酶不能沿 DNA 向前移动，阻遏转录，介导负性调节，因而可抑制与这个操纵基因相联系的基因群，也就是操纵子的 mRNA 合成。18 【正确答案】 反式作用因子(转录因子)是能够与真核基因启动子区域中顺式作用元件发生特异性作用的 DNA 结合蛋白，通过它们之间以及与其他相关蛋白之间的相互作用激活或抑制转录。反式作用因子有两个重要的功能结构域：DNA 结合结构域和转录活化结构域，它们是其发挥转录调控功能的必需结构。反式作用因子可被诱导合成，其活性也受多种因素的调节。三、填空题请完成下列各题，在各题的空处填
23、入恰当的答案。19 【正确答案】 4【知识模块】 蛋白质20 【正确答案】 超滤 透析【知识模块】 蛋白质21 【正确答案】 丙酮沉淀法 硫酸铵沉淀法 免疫沉淀法【知识模块】 蛋白质22 【正确答案】 苯丙氨酸(Phe) 酪氨酸(Tyr) 色氨酸(Trp)【知识模块】 蛋白质23 【正确答案】 CM-纤维素 P 一纤维素【知识模块】 蛋白质24 【正确答案】 肌红蛋白【知识模块】 蛋白质25 【正确答案】 保守性替换【知识模块】 蛋白质26 【正确答案】 疏水相互作用【知识模块】 蛋白质27 【正确答案】 与天冬酰胺的 y 酰胺 N 原子共价连接【知识模块】 蛋白质28 【正确答案】 unit
24、【知识模块】 蛋白质四、不定项选择题下列各题的备选答案中，有一个或多个是符合题意的，请选出所有符合题意的备选答案。29 【正确答案】 C30 【正确答案】 C,E31 【正确答案】 A,B,C,E32 【正确答案】 B33 【正确答案】 A,C,D,E34 【正确答案】 A35 【正确答案】 B36 【正确答案】 A37 【正确答案】 B38 【正确答案】 A,B39 【正确答案】 B,C40 【正确答案】 A,B,C,D41 【正确答案】 B42 【正确答案】 B43 【正确答案】 B44 【正确答案】 E【知识模块】 蛋白质45 【正确答案】 A【知识模块】 蛋白质46 【正确答案】 B【
25、知识模块】 蛋白质47 【正确答案】 D【知识模块】 蛋白质48 【正确答案】 C【知识模块】 蛋白质49 【正确答案】 C【知识模块】 蛋白质50 【正确答案】 C【知识模块】 蛋白质51 【正确答案】 B【知识模块】 蛋白质52 【正确答案】 D【知识模块】 蛋白质53 【正确答案】 C【知识模块】 蛋白质54 【正确答案】 (1)DNA 多态性是在染色体的某个基因座可能由两个或多个等位基因中的一个占据而造成的同种 DNA 分子的多样性。具有多态性的 DNA 分子在核苷酸序列上不同或在核苷酸重复单位的数量上有变化，可分为序列多态性和长度多态性。DNA 序列多态性是指一个基因座上，因不同个体
26、 DNA 序列有一个或多个碱基的筹异而构成的多态性。DNA 长度多态性是指同一基因座上各等位基因之间 DNA片段长度差异构成的多态性。(2)STR 鉴定的基本原理。“短串联重复序列”(STR)是一类广泛存在于真核生物基因组中的 DNA 串联重复序列，它由 26bp 的核心序列构成，重复次数通常在1530 次，DNA 片段长度为 100350bp，由于 STR 很容易通过 PCR 扩增、电泳分型，所以是目前常用的遗传标记，特别是应用于亲子鉴定等法医学领域有诸多优点：STR 在人类基因组中广泛分布，等位基因多，杂合度高； STR 扩增片段短，一般在 100350bp 之间，扩增率高，灵敏度比传统的
27、 DNA 指纹高得多；各个 STR 位点扩增片段长度近似，扩增条件相似，可进行复合扩增；STR 核心序列重复单位少(26bp) ，Amp-FLP 时不会造成小片段有限扩增错误，其稳定性是RFLP 和 VNTR 不能比拟的： 检测方法简单省时，且易实现自动化、标准化。(3)STR 鉴定的实验方法：首先将样品在 5螯合树脂悬浮液中煮沸。离心后取上清提取 DNA 或直接 PCR。PCR 的模板 DNA 区域必须包括 DNA 的侧翼区序列。DNA 总长度为 100400bp；进行多基因座同时扩增时，根据不同的基因座序列设计不同的特异引物。使用臼动荧光检测的电泳分离 PCR 产物。对 PCR 产物进行激
28、光扫描，通过将参照物和 DNA 分子量标准(具有不同的颜色 )进行同步电泳，并由计算机分析软件分析，对 DNA 片段进行很准确地测定，准确性通常能达到区分相差一个碱基对的片段。将扩增样本片段、等位基因阶梯和内标进行比较，从而达到分型的目的。55 【正确答案】 蛋白质、核酸、脂类和糖娄四种生物大分子的主要功能和结构特征如表所示。56 【正确答案】 细胞呼吸是指有机物在细胞内经过一系列的氧化分解，生成 CO2或其他产物，释放出能量并生成 ATP 的过程，包括有氧呼吸和无氧呼吸两种方式。细胞呼吸的三个阶段： (1)第一阶段，在细胞质的基质中，一个分子的葡萄糖分解成两个分子的丙酮酸，同时脱下 4 个H
29、( 活化氢) ；在葡萄糖分解的过程中释放出少量的能量，其中一部分能量用于合成 ATP，产生少量的 ATP。这一阶段不需要氧的参与，是在细胞质基质中进行的。反应式：C 6H12O6 酶2C 3H4O3(丙酮酸)+4H+少量能量(2ATP) (2)第二阶段，丙酮酸进入线粒体的基质中，两分子丙酮酸和 6 个水分子中的氢个部脱下，共脱下 20 个H，丙酮被氧化分解成二氧化碳；在此过程释放少量的能量，其中一部分用于合成 ATP，产生少量的能量。这一阶段也不需要氧的参与，是在线粒体基质中进行的。 反应式：2C 3H4O3(丙酮酸)+6H 2O酶2OH+6CO 2+少量能量(2ATP) (3)第三阶段，在线
30、粒体的内膜上，前两阶段脱下的共 24 个H 与从外界吸收或叶绿体光合作用产生的 6 个 O2 结合成水；在此过程中释放大量的能量，其中一部分能量用于合成 ATP。这一阶段需要氧的参与，是在线粒体内膜上进行的。反应式：24H+6O 2 酶 12H 2O+大量能量(34ATP)57 【正确答案】 由于这三种细菌对光照、氧的需求不同，可以将三种细菌先在黑暗、无氧的条件下培养一段时间，再在黑暗、有氧的条件下培养一段时间，其他条件均一致，然后分别观察这三种细菌的生长状态。在黑暗、无氧的条件下能生长的菌是第一种细菌厌氧菌，因为其对光照和氧气没有需求，而第二种需要氧气才能进行氧化磷酸化获得能量生长，第三种则
31、需要在光照条件下进行光合作用获得能量生长；在黑暗、有氧的环境下能生长的是第二种菌，因为第一种细菌是厌氧型在有氧的条件下不能生长，第三种细菌则需要光照；最后在其上两种环境中都不能生长的即为第三种菌。58 【正确答案】 如图附录 3-1 所示。NADH 作为最初的电子供体，由复合体 I 催化 2 个电子传递到 CoQ；复合体 II 从琥珀酸接受电子，并传递给 CoQ；复合体 III 催化 CoQH2 传递 2 个电子给 Cyt c；复合体催化还原型 Cyt c 传递电子给分子氧即最终的电子受体。59 【正确答案】 (1)果糖在肝脏中，由果糖激酶催化生成果糖-1-磷酸，然后在果糖-1-磷酸醛缩酶的催
32、化下生成甘油醛和二羟丙酮磷酸。二羟丙酮磷酸可以直接进入糖酵解途径。而甘油醛可以在甘油醛激酶的催化下生成 3-磷酸甘油醛，进入糖酵解途径，消耗 1 个 ATP。甘油醛还可以在醇脱氢酶催化下生成甘油并消耗一个NADH，然后甘油经甘油激酶催化生成甘油-3-磷酸并消耗 1 个 ATP，甘油-3-磷酸再经甘油磷酸脱氢酶催化生成二羟丙酮磷酸以及 1 个 NADH 和 H+，二羟丙酮磷酸进入糖酵解途径。二羟丙酮磷酸在糖酵解过程中由磷酸丙糖异构酶催化生成 3-磷酸甘油醛，继续经糖酵解途径分解。而果糖在脂肪组织中，由己糖激酶催化生成6-磷酸果糖并消耗 1 个 ATP，6-磷酸果糖进入糖酵解途径。以上过程如图附录
33、 3-2所示。 (2)3 一磷酸甘油醛在糖酵解途径中，由 3-磷酸甘油醛脱氢酶催化生成 1，3-二磷酸甘油酸以及 1 个NADH 和 H+。1，3- 二磷酸甘油酸经磷酸甘油酸激酶催化生成 3-磷酸甘油酸，并生成 1 个 ATP。3 一磷酸甘油酸经磷酸甘油酸变位酶催化生成 2 一磷酸甘油酸，再经烯醇化酶催化生成磷酸烯醇式丙酮酸，最后经丙酮酸激酶催化生成烯醇式丙酮酸，并生成 1 个 ATP。烯醇式丙酮酸不稳定迅速转变为丙酮酸。以上过程如图附录 3-3所示。 (3)丙酮酸进入线粒体，经丙酮酸脱氢酶氧化脱羧生成乙酰 CoA，并产生 1 个 NADH 和H+。乙酰 COA 进入三羧酸循环被彻底氧化分解产
34、生二氧化碳。如图附录 3-4 所示。60 【正确答案】 如表所示。61 【正确答案】 (1)利用绿色荧光蛋白独特的发光机制，可将 GFP 作为蛋白质标签(protein tagging)，即利用 DNA 重组技术，将目的基因与 GFP 基因构成融合基因，转染合适的细胞进行表达，然后借助荧光显微镜便可对标记的蛋白质进行细胞内活体观察；(2)GFP 作为标签融合到主体蛋白中来检测蛋白质分子的定位、迁移、构象变化以及分子间的相互作用，或者靶向标记某些细胞器；(3)GFP 具有同宿主蛋白构成融合子的性质，利用这一性质，可以将 GFP 定位到特定的细胞器和膜系统中，进行细胞生理过程、细胞动力学等的实时观
35、测，或直接应用于定量分析；(4)利用 GFP 荧光探针，将很容易从数量众多的化合物中判断出哪些化合物具有与信号分子相似的能引起配体一受体复合物迁移并介导生理反应的功能，来进行药物筛选。62 【正确答案】 (1)表观遗传学是研究在没有细胞核 DNA 序列改变的情况时，基因功能的可逆的、可遗传的改变。这些改变包括 DNA 的修饰(如甲基化修饰)、组蛋白的各种修饰等。也指生物发育过程中包含的程序的研究。在这两种情况下，研究的对象都包括在 DNA 序列中未包含的基因调控信息如何传递到(细胞或生物体的)下一代这个问题。(2)基因组的表观遗传调控方式主要有：DNA 甲基化(DNA methylation)
36、，基因组印记(genomicimprinting)，母体效应(maternal effects)，基因沉默(gene silencing) ，核仁显性，休眠转座子激活和 RNA 编辑(RNA editing)等。63 【正确答案】 (1)加入抗生素是为了抑制杂菌，防止杂菌污染；也用于检测目的基因是否被导入成功，防止菌株携带的质粒丢失。 (2)培养大肠杆菌的主要目的和原理。 (a)重组质粒 DNA 转化大肠杆菌。 目的：将重组质粒 DNA 导入大肠杆菌，使目的基因随大肠杆菌在细胞内复制、扩增。 原理：氯化钙转化法，是采用CaCl2 处理大肠杆菌细胞，提高其细胞膜的透性，制备成感受态细胞。然后用热
37、击的方法，严格控制温度和作用时间，将重组质粒 DNA 导入大肠杆菌细胞，并用含氨苄青霉素的 LB 固体培养基鉴定转化结果，已转化的菌体可形成菌落 (因质粒上有抗氨苄青霉素的基因)。 (b)目的基因在大肠杆菌中的蛋白质的原核表达。 目的是通过大肠杆菌表达目的基因大量获得重组蛋白，在蛋白纯化、定位及功能分析等方面都有重要意义。原理在于大肠杆菌用于表达重组蛋白有以下特点：易于生长和控制；用于细菌培养的材料不及哺乳动物细胞系统的材料昂贵；有各种各样的大肠杆菌菌株及与之匹配的具各种特性的质粒可供选择。 原核表达一般程序：获得目的基因一准备表达载体一将目的基因插入表达载体中(测序验证)一转化表达宿主菌一诱
38、导靶蛋白的表达一表达蛋白的分析一扩增、纯化、进一步检测。 (c)用于分子生物学的研究：如 DNA 复制、修复等的研究。64 【正确答案】 (1)多肽和蛋白质的结构有差异。多肽仅仅是蛋白质的初级结构形式，而蛋白质具有一定的空间结构。蛋白质是由多肽和其他物质结合而成的，一个蛋白质分子可由一条肽链组成(如高等动物的细胞色素 c 是由 104 个氨基酸残基的一条肽链组成)，也可由多条肽链通过一定的化学键(肯定不是肽键，如二硫键、氢键等)连接而成( 如胰岛素由 2 条肽链组成、胰凝乳蛋白酶是由 3 条肽链组成、血红蛋白分子由 4 条肽链组成、免疫球蛋白分子由 4 条肽链组成等)。(2)多肽与蛋白质的功能
39、有差异。多肽往往是无生物活性，而蛋白质是具有生物活性的。多肽一般无活性(如蛋白质在胃、小肠中经消化产生的多肽)，少数有活性(如抗利尿激素就是多肽类激素)，与蛋白质相比，多肽的分子量较小，没有空间结构，一般无活性；蛋白质的分子量较大，有空间结构，有活性(变性后活性下降或消失，活性消失叫做失活)【知识模块】 蛋白质65 【正确答案】 (1)由于不同的聚合态存在，可能是蛋白质的二聚体或更高的聚合体。这种情形往往是动态的，将其中一个峰重新经过分子筛，会再分为两个峰。加入盐、去垢剂或还原剂可能让其中一个峰消失。(2)蛋白质被蛋白酶降解。只需用LCMASS 或将新鲜纯化的蛋白质进行部分酶解即可得到类似的电
40、泳结果。在纯化过程中或纯化后加入蛋白酶抑制剂，并将蛋白质保存在较低的温度下。【知识模块】 蛋白质66 【正确答案】 蛋白质 -螺旋的稳定性是靠链内氢键维持的，是由每个氨基酸残基的 N-H 于前面隔 3 个氨基酸的 C=O 形成，肽键上所有的肽链都参与氢键的形成，故 -螺旋相当稳定。在 DNA 双螺旋中： 稳定双螺旋的最重要因素是碱基堆积力；碱基配对的氢键，GC 含量越多，DNA 双螺旋越稳定。在 -螺旋中，一个残基上的羧基氧与旋转一圈后的(该残基后面)第四个残基上的一氨基中的氮形成氢键，这些在肽链骨架内原子间形成的氢键大致平行于该螺旋的轴，氨基酸侧链伸向骨架外，不参与螺旋内的氢键形成。在双链
41、DNA 中糖-磷酸骨架不形成氢键，相反在相对的两条链中互补的碱基之间形成 2 个或 3 个氢键，氢键大致垂直于螺旋轴。在 -螺旋中，单独的氢键是很弱的，但是这些键的合力稳定了该螺旋结构。尤其是在一个蛋白质的疏水内部，这里水不与氢竞争成键。在 DNA 中形成氢键的主要作用是使每一条链能作为另一条链的模板，尽管互补碱基之间的氢键帮助稳定螺旋结构，但在疏水内部碱基对之间的堆积对螺旋结构的稳定性的贡献更大。在蛋白质多肽链的 -螺旋中，多肽主链上的第 n 个残基的羧基氧与沿螺旋指向的第 n+4 个残基的酰胺基的氢之间形成氢键，这些氢键大体上与螺旋轴平行。残基的侧链从主链中生出，不出现在螺旋之内，不参与螺
42、旋内的氢键形成。在 DNA的双螺旋中，氢键的形成不涉及糖-磷酸骨架，氢键是在两个反向平行的多核苷酸的碱基对之间形成的，每个碱基对可形成两个或三个氢键，氢键大体上与螺旋轴垂直。【知识模块】 蛋白质67 【正确答案】 (1)当它们流经 DEAE-纤维素阴离子交换树脂时，用线性盐浓度梯度洗脱时，这些蛋白质被洗脱的顺序为 ACDB。因为阴离子交换树脂结合带有负电荷的蛋白质，带负电荷越多 pI 越小，与阴离子交换树脂越容易结合，越不易被洗脱出来，所以 pI 最大的蛋白质最先被洗脱出来，根据这 4 种蛋白质的pI 大小 (ACDB)，则洗脱的顺序为 ACDB。(2)当它们流经 Sephadex G-50 凝胶层析柱时，这些蛋白质被洗脱的顺序为BCAD。凝胶层析柱是根据蛋白质的蛋白质的分子质量分离的，分子量越大，迁移速度越大，先被洗脱出来，根据这四种蛋白质的分子质量大小(BCA D)，则洗脱的顺序为 BCAD。(3)阴离子交换柱必须要求洗脱物有阴离子的存在，才可进行交换，要使洗脱物存在阴离子，必须在碱性环境下，但是如果 pH 过大会导致蛋白质稳定性下降，活性的回收率下降。所以一般在蛋白质的离子交换层析中很少用高于 9 以上的 pH，所以 7pH9。【知识模块】 蛋白质
