1、研究生入学考试生物化学（蛋白质）历年真题试卷汇编 2 及答案与解析1 (中山大学 2009 年考研试题)原核生物新生肽链 N 端第一个残基是 fMet，而真核生物新生肽链 N 端是 Met。（A）正确（B）错误2 (中山大学 2007 年考研试题)甘氨酸和脯氨酸是经常出现在 -螺旋结构中的两种氨基酸。（A）正确（B）错误3 (中山大学 2007 年考研试题)蛋白质分子的一级结构决定其高级结构，最早的证据来自蛋白质的变性和复性实验。（A）正确（B）错误4 (中山大学 2007 年考研试题)质膜上糖蛋白的糖基具有方向性，都位于膜的外侧。（A）正确（B）错误5 (中山大学 2007 年考研试题)所谓
2、必需氨基酸就是指人体生长发育所需要的氨基酸。（A）正确（B）错误6 (中山大学 2007 年考研试题)人类的球蛋白基因基因簇包括了在不同发育阶段表达的各种基因。（A）正确（B）错误7 (南京大学 2008 年考研试题)有一多肽为 HEHVGSKD，pH10 时在电场中向阴极移动。（A）正确（B）错误8 (厦门大学 2008 年考研试题)用凝胶过滤柱(如 SephadexG 一 100)一层析分离蛋白质时，总是相对分子质量最小的先于相对分子质量大的下来。（A）正确（B）错误9 (厦门大学 2008 年考研试题)同源性蛋白质的保守残基通常分布在氨基酸序列中的功能位点上。（A）正确（B）错误10 (
3、厦门大学 2008 年考研试题)在水溶液中，甲硫氨酸、苯丙氨酸、亮氨酸、撷氨酸大多分布在球蛋白分子内部形成疏水内核。（A）正确（B）错误二、填空题请完成下列各题，在各题的空处填入恰当的答案。11 PPP 循环的氧化阶段产生_，该物质为生物体的合成提供还原力，非氧化阶段产生_和_。12 脂肪酸从头合成途径调控的关键酶是_，分为三个部分组成，分别为_、_、_，存在两种调节方式_、_。13 天然脂肪酸有_、_，不饱和脂肪酸所含双键多为_结构，但不饱和脂肪酸双键位置一般在_之间。14 膜中脂类以_为主，膜蛋白分为_和_，分别以_和_获得。15 VLDL 的作用主要是将_运输到_；HDL 的作用主要是将
4、_运输到_。16 DNA 连接酶需要 5为_，3端为_。17 mRNA 转录起始时 30s 亚基与_rRNA 碱基互补，称为_序列。18 柠檬酸对果糖-1，6 一二磷酸的调控作用是_。19 蛋白质的合成方向为_，mRNA 的合成方向为 _。20 原核生物的起始密码子为_，其反密码子为_。21 (中山大学 2009 年考研试题)_是一种结合蛋白，对自己的配基是专一的，当配基与其结合时，可引发相应的生化反应。22 (中山大学 2007 年考研试题)在酶的广义酸碱催化机制中，特别重要的一个氨基酸残基_，其侧链 pK 值接近生物体的 pH 值。23 (中山大学 2007 年考研试题)Westernbl
5、ot 和 ELISA 方法的共同之处是_。24 (厦门大学 2008 年考研试题)稳定蛋白质三维结构的作用力主要包括_，_，_和_。25 (厦门大学 2007 年考研试题)蛋白质的酸水解一般用 6mol/LHCl，110水解 20小时左右，可使蛋白质完全水解。酸水解的优点是_，缺点是使_被完全破坏。26 (厦门大学 2007 年考研试题)蛋白质 N-末端测定的方法有很多，其中_法由于该试剂与 N-末端氨基酸形成的物质具有强烈的荧光，灵敏度很高。27 (厦门大学 2007 年考研试题)一个蛋白质分子含有四个半肽氨酸残基。若所有半肽氨酸残基都可能配对形成二硫键，则此种蛋白质形成二硫键的方式有_种。
6、28 (南开大学 2009 年考研试题)蛋白质完成一个 -螺旋需_个氨基酸残基，螺旋每上升一圈向上平移_nm，两个相邻氨基酸残基之间的轴心距为_nm。29 (南开大学 2008 年考研试题)SDS-PAGE 中，凝胶的单体为_，_是交联剂。蛋白质结合 SDS 后均带_电荷，肽链越长迁移速度越_。30 (南开大学 2008 年考研试题)蛋白质在 280nm 波长下的紫外吸收性质绝大部分是由_和_所引起的。三、不定项选择题下列各题的备选答案中，有一个或多个是符合题意的，请选出所有符合题意的备选答案。31 关于谷胱甘肽的叙述正确的是( )。（A）还原性（B）有一个 -氨基和一个 -羧基（C）有 -羧
7、基参与合成肽键（D）是活性肽32 关于蛋白质的 折叠片的叙述正确的是 ( )。（A）氢键平行于多肽链走向（B）肽链氨基与羧基参与氢键形成（C）与 R 基位于折叠片同侧（D）氨基酸残基亲水33 下面可以用 X 衍射分析的有( )。（A）蛋白质溶液定性分析（B）原子水平蛋白质构象（C）分子水平蛋白质构型（D）只能解析蛋白质三维构型34 可以在 tuRNA 水平鉴定基因表达规律的实验是 ( )。（A）western blot（B） ELISA（C） RT-PCR（D）Southern blot35 琼脂和琼脂糖( ) 。（A）主要成分相同，属同多糖（B）主要成分不同，属同多糖（C）主要成分相同，应用
8、不能代替（D）主要成分不同，应用不能代替36 关于限制性内切酶叙述正确的是( )。（A）专门的核酸 35 内切酶活性（B） DNA 分子中（C）选择性水解双链 DNA（D）选择性水解 RNA37 关于酶-底物中间产物叙述正确的是( )。（A）结合后，酶稳定性（B）复合物可分离（C）复合物称过渡态（D）有饱和现象38 关于跨膜主动运输叙述正确的是( )。（A）需运送物具有跨膜梯度（B）要有 ATP（C）需要蛋白质大分子参与（D）只能单向运输39 关于线粒体的电子传导叙述正确的是( )。（A）NADH 是 FMN 的电子供体（B） NADH 是 NAD+的电子供体（C） Cyt C 在线粒体外膜上
9、（D）辅酶 Q 是移动性强的电子链组分40 属于高能磷酸化合物的是( )。（A）ADP，磷酸肌醇，磷酸精氨酸，烯醇式（B）烯醇式，焦磷酸，肌醇，精氨酸（C）乙酰辅酶 A，精氨酸，焦磷酸，ADP（D）ATP、G-6-P，精氨酸，烯醇式41 (厦门大学 2007 年考研试题)当严重营养不良时常会发生全身性水肿，这主要是由于( )。（A）清蛋白含量过低（B）脂蛋白含量过低（C）糖蛋白含量过低（D）球蛋白含量过低42 (南开大学 2009 年考研试题)下列哪种氨基酸是必需氨基酸?( )（A）Ser（B） Thr（C） Pro（D）Tyr43 (南开大学 2009 年考研试题)在蛋白质结构分析中常以二硫
10、键进行拆行，下列哪一试剂用于防止二硫键的再形成?( ) 。（A）过甲酸（B）碘乙酸（C）巯基乙醇（D）二硫苏糖醇44 (南开大学 2009 年考研试题)对角线电泳分析结果显示在对角线的两侧各有 2 个茚三酮显色斑点，说明被分析蛋白中含有几对二硫键?( )（A）一对（B） 2 对（C） 3 对（D）4 对45 (南开大学 2009 年考研试题)分子排阻色谱分离蛋白质是根据( )。（A）蛋白质的电荷（B）蛋白质分子的大小（C）蛋白质的形状（D）蛋白质的特异性46 (南开大学 2009 年考研试题)下列哪种形式的肽平面可能存在?( )（A）=0，=180（B） =180，=0（C） =180，=18
11、0（D）=0，=047 (南开大学 2009 年考研试题)如果蛋白质分子中的一个氨基酸发生了改变，那么它的( )。（A）二级结构一定会改变（B）功能一定会改变（C）三级结构一定会改变（D）功能不一定会改变48 (南开大学 2009 年考研试题)变性后的蛋白有如下哪一特点?( )（A）溶解度增加（B）溶解度降低（C）一级结构改变（D）二硫键断裂49 (南开大学 2008 年考研试题)凝血酶原中特有的氨基酸为( )。（A）5- 羟赖氨酸（B） 6-N 一甲基赖氨酸（C） -羧基谷氨酸（D）磷酸丝氨酸50 (南开大学 2008 年考研试题)一氨基酸溶于后水，溶液 pH 为 5，则该氨基酸的pI( )
12、。（A）大于 5（B）小于 5（C）等于 5（D）等于 751 简述脱氧核糖核苷酸合成过程(包括催化反应的酶和电子传递路径)。52 请写出草酰乙酸(OAA)参与生物体内代谢过程的四个不同反应，写明参与的酶、底物和生成物。53 请计算 18：1 的油酸进行 氧化所产生的 ATP 数量，并写出具体步骤。54 解释氨基酸的酸碱性，如何用实验证明氨基酸有酸碱性?讨论氨基和羧基的pK1(羧基 )、pK 2(氨基)和 pI 的含义，三者之间的关系。55 肌红蛋白的功能、分子结构特点和氧结合曲线的特征，讨论可逆结合的分子基础。56 叙述原核细胞中三种 RNA 的结构、特点及功能。57 叙述原核生物 DNA
13、复制中后随链的合成。58 (江南大学 2007 年考研试题)某一纯化的蛋白无 SDS 的凝胶电泳图如图 3-3 所示，两种情况下的电极槽缓冲液都为 82。从下面两幅图给出的信息，有关该纯化蛋白的结构你能得出什么结论?该蛋白的 pI 是大于还是小于 82?59 (江南大学 2007 年考研试题)合成的多肽多聚谷氨酸(Glu)n，当处在 pH30 以下时，在水溶液中形成 -螺旋，而在 pH50 以上时，却为伸展的状态(Glu： pK1=219，pK 2=425，pK 3=967；Lys：pK 1=218，pK 2=895，pK 3=1053)(1)解释该现象：(2)在哪种 pH 条件下，多聚赖氨酸
14、(Lys)n 会形成 -螺旋。60 (武汉大学 2005 年考研试题)某寡聚体蛋白的相对分子质量(M r)为 132000。现有该蛋白质样品 660mg。用 2，4-二硝基氟苯在偏碱性条件下处理，使其反应完全，然后用盐酸水解，使所有的肽键断开，从水解物中分离到 55mg 缬氨酸二硝苯衍生物(M r 为 272)，但没有其他氨基酸的二硝苯衍生物生成。(1)以上信息是怎样被用来测定该蛋白质的肽链数目的?(2)计算该蛋白质的肽链数目；(3)你将使用什么样的蛋白质分析技术确定该蛋白质的肽链是相同的或是不同的?61 (中国药科大学 2006 年考研试题)在某一抽提液中含有三种蛋白质，其性质如下：蛋白质相
15、对分子质量等电点A2000085B2100059C600065试设计设计两个方案来分离纯化这三种蛋白质。并说明实验原理。若你想得到一种有活性的酶，在提纯过程中应注意哪些事项?研究生入学考试生物化学（蛋白质）历年真题试卷汇编 2 答案与解析1 【正确答案】 A【知识模块】 蛋白质2 【正确答案】 B【试题解析】 甘氨酸和脯氨酸是经常出现在 -转角结构中的两种氨基酸，是 -螺旋的破坏者。【知识模块】 蛋白质3 【正确答案】 A【知识模块】 蛋白质4 【正确答案】 A【知识模块】 蛋白质5 【正确答案】 B【试题解析】 必需氨基酸指的是人体自身不能合成或合成速度不能满足人体需要，必须从食物中摄取的氨
16、基酸。【知识模块】 蛋白质6 【正确答案】 B【试题解析】 人类的球蛋白基因基因族不包括一些控制组成酶合成的基因。【知识模块】 蛋白质7 【正确答案】 B【试题解析】 pH 10 时，多肽 HEHVGSKD 带负电，在电场中应该是向阳极移动。【知识模块】 蛋白质8 【正确答案】 B【试题解析】 用凝胶过滤柱(如 Sephadex G-100)一层析分离蛋白质时，总是相对分子质量最大的先于相对分子质量小的下来。由于小分子物质能进入凝胶颗粒内部，用洗脱缓冲液洗脱时流出的速度慢；而大分子物质却被排除在凝胶颗粒外部，进入凝胶颗粒间的缝隙，洗脱时流出的速度较快。所以在洗脱过程中就会按相对分子质量的不同而
17、分离蛋白质。【知识模块】 蛋白质9 【正确答案】 A【知识模块】 蛋白质10 【正确答案】 A【知识模块】 蛋白质二、填空题请完成下列各题，在各题的空处填入恰当的答案。11 【正确答案】 NADPH 6 一磷酸果糖 6 一磷酸甘油醛12 【正确答案】 乙酰-CoA 羧化酶 生物素羧基载体蛋白 (BCCP) 生物素羧化酶(BC) 转羧激酶(CT) 别构调节 共价修饰调节13 【正确答案】 棕榈酸 硬脂酸 顺式 C 9 和 C1014 【正确答案】 磷脂 外在膜蛋白 内在膜蛋白 改变 pH 或离子强度 加入去垢剂或其他非极性溶剂15 【正确答案】 甘油三酯 全身各处细胞 胆固醇 全身各处细胞16
18、【正确答案】 磷酸基 羟基17 【正确答案】 16S SD 序列18 【正确答案】 抑制19 【正确答案】 NC 5320 【正确答案】 AUG CAU21 【正确答案】 受体【知识模块】 蛋白质22 【正确答案】 His【知识模块】 蛋白质23 【正确答案】 利用蛋白特异识别【知识模块】 蛋白质24 【正确答案】 氢键 范德华力 疏水作用 二硫键【知识模块】 蛋白质25 【正确答案】 不引起消旋作用 色氨酸【知识模块】 蛋白质26 【正确答案】 NDS【知识模块】 蛋白质27 【正确答案】 6【知识模块】 蛋白质28 【正确答案】 36 054 015【知识模块】 蛋白质29 【正确答案】
19、丙烯酰胺 N-N 亚甲基双丙烯酰胺 负【知识模块】 蛋白质30 【正确答案】 酪氨酸 色氨酸【知识模块】 蛋白质三、不定项选择题下列各题的备选答案中，有一个或多个是符合题意的，请选出所有符合题意的备选答案。31 【正确答案】 C,D32 【正确答案】 B33 【正确答案】 D34 【正确答案】 C35 【正确答案】 D36 【正确答案】 C37 【正确答案】 B,C,D38 【正确答案】 A,B,C39 【正确答案】 A,D40 【正确答案】 A41 【正确答案】 A【知识模块】 蛋白质42 【正确答案】 B【知识模块】 蛋白质43 【正确答案】 B【知识模块】 蛋白质44 【正确答案】 B【
20、知识模块】 蛋白质45 【正确答案】 B【知识模块】 蛋白质46 【正确答案】 C【知识模块】 蛋白质47 【正确答案】 D【知识模块】 蛋白质48 【正确答案】 B【知识模块】 蛋白质49 【正确答案】 C【知识模块】 蛋白质50 【正确答案】 A【知识模块】 蛋白质51 【正确答案】 脱氧核糖核苷酸可以由核糖核苷酸还原形成，以 H 取代其核糖分子中 C2 上的羟基而生成，此还原作用是在核苷二磷酸(NDP) 的水平上进行的。核糖核苷酸还原成脱氧核糖核苷酸需要氢和电子，由 NADPH 提供。生物体有两条电子传递路径： (1)NADPH 提供氢和电子，电子在硫氧还蛋白还原酶的催化下经过FAD 和
21、硫氧还蛋白，再由核糖核苷二磷酸还原酶催化将电子传递给核糖核苷二磷酸，将核糖核苷二磷酸还原成脱氧核糖核苷二磷酸(dNDP)。 (2)NADPH 提供氢和电子，电子在谷氧还蛋白还原酶的催化下经过谷胱甘肽和谷氧还蛋白，再由核糖核苷二磷酸还原酶催化将电子传递给核糖核苷二磷酸，将核糖核苷二磷酸还原成脱氧核糖核苷二磷酸。 脱氧核糖核：苷二磷酸可以在核苷单磷酸激酶的作用下生成脱氧核糖核苷一磷酸(dNMP)。52 【正确答案】 (1)三羧酸循环：草酰乙酸与乙酰 CoA 在柠檬酸合酶的催化下生成柠檬酸(乙醛酸循环也有这步反应)；而苹果酸在苹果酸脱氢酶的催化下生成草酰乙酸，草酰乙酸的再生又可以继续进入三羧酸循环进
22、行下一轮。(2)糖异生反应：丙酮酸转变为烯醇式丙酮酸的过程中，丙酮酸要先在丙酮酸羧化酶的催化下羧化成草酰乙酸，草酰乙酸再在磷酸烯醇式丙酮酸羧化激酶作用下转变为磷酸烯醇式丙酮酸。(3)丙酮酸在丙酮酸羧化酶催化下转化为草酰乙酸，这是三羧酸循环的一个重要回补途径。(4)天冬氨酸与 -酮戊二酸可以在天冬氨酸氨基转移酶的作用下生成草酰乙酸和谷氨酸，这个反应是可逆的。53 【正确答案】 18：1 油酸进行了 8 次 氧化，生成 9 个乙酰 CoA，每个乙酰CoA 彻底氧化分解可产生 3 个 NADH、1 个 FADH2 和 1 一个 ATP，每个 NADH和 FADH2 进入呼吸链后可分别产生 25 个和
23、 15 个 ATP。则生成的 9 个乙酰CoA 可以产生的 ATP 数量为：(253+151+1)9=90 因 18：1 的油酸有 1 个双键，产生 7 个 FADH2 和 8 个 NADH，则生成 ATP：157+2 58=305 由于2 个高能磷酸键用于活化脂肪酸，故产生的 ATP 总数量为： 90+3052=118554 【正确答案】 (1)氨基酸带有-COOH 和-OH ，有两性解离的性质。可以用酸碱滴定实验证明氨基酸有酸碱性，用标准的盐酸溶液滴定可以证明氨基酸有碱性；用标准的氢氧化钠溶液滴定证明氨基酸有酸性。 (2)pK 是某个可解离基团的解离常数，等于该解离基团解离一半时溶液的 p
24、H。pK 1(羧基)即羧基的解离常数；pK 2(氨基)即氨基的解离常数；而 pI 即等电点，是氨基酸分子所带正电荷与负电荷相等时溶液的 pH。 三者之间的关系：对于酸性氨基酸，pI=12(pK 1+pKR)(pKR 是氨基酸R 基团的解离常数)；对于碱性氨基酸， pI=12(pK R+pK2)；对于普通氨基酸，pI=12x(pK 1+pK2)。55 【正确答案】 (1)肌红蛋白的功能。肌红蛋白分子中的血红素铁只与蛋白质链上一个组氨酸相连，尚有一。个空的配位位置，能可逆地结合一个氧分子，对氧有高度的亲和性，具有储存氧的功能，当肌肉剧烈运动大量需氧时，可以释放储存的氧来供肌肉细胞使用。 (2)肌红
25、蛋白的分子结构特点。肌红蛋白是一条含有 153 个氨基酸残基的多肽链折叠形成的球状结构，有一个血红素辅基。由 一螺旋和无规卷曲共同构成的。有 8 段 -螺旋，分别用 A，B，C，D，E ，F，G ，H 表示，螺旋间是无规卷曲(位于螺旋段间拐角处)，肽链的羧基末端也是无规卷曲。极性氨基酸残基几乎全部分布于分子的表面，而非极性氨基酸残基则被埋在分子内部。辅基血红素位于肌红蛋白分子表面的一个洞穴内，并通过组氨酸残基与肌红蛋白分子内部相连。组氨酸与血红素辅基一起形成一个可以与氧可逆结合的位点。 (3)肌红蛋白的氧结合曲线的特征。肌红蛋白只有一个亚基，没有四级结构，结合氧之后不会因为一个亚基的转变发生构
26、象改变，即氧与肌红蛋白的结合没有别构效应，所以肌红蛋白在各种氧分压下都对氧有高度的亲和性，其氧结合曲线为一条双曲线。 (4)可逆结合的分子基础。肌红蛋白只由一条肽链组成，含有一个血红素辅基。血红素是铁卟琳化合物，由 4 个毗咯通过 4 个甲炔基相连成一个大环，Fe 2+居于环中。含Fe2+的血红素能结合氧，而含 Fe3+的不能结合氧。血红素的 Fe2+与 4 个吡咯环的氮原子形成配位键，另 2 个配位键中的 1 个与 F8 组氨酸结合剩下的 1 个则可以与O2 进行可逆结合。56 【正确答案】 原核生物主要有 mRNA、tRNA 和 rRNA 三种 RNA。(1)原核生物 mRNA 的结构、特
27、点及功能。原核生物 mRNA 的结构：mRNA 为单链线性分子，mRNA 具有两种序列，一种是用于指导合成蛋白质的序列，核苷酸序列与 DNA 序列相应，即编码区，从起始密码子开始，到终止密码子结束；另一种是位于编码区两侧的非编码区。原核生物 mRNA 的特点：半衰期短。原核生物中，mRNA 的转录和翻译是在同一个细胞空间里同步进行的，蛋白质合成往往在 mRNA 刚开始转录时就被引发了。大多数细菌 mRNA 在转录开始 1 分钟后就开始降解。 mRNA 降解的速度大概只有转录或翻译速度的一半；许多以多顺反子的形式存在。原核细胞的mRNA(包括病毒)有时可以同时编码几个多肽；原核生物 mRNA 的
28、 5端无帽子结构，3 端没有或只有较短的多聚(A)结构； 原核生物常以 AUG(有时 GUG甚至 UUG)作为起始密码子；真核生物几乎永远以 AUG 作为起始密码子。原核生物 mRNA 的功能：mRNA 携带 DNA 遗传信息，mRNA 上的密码子编码氨基酸，指导蛋白质的合成，是蛋白质的合成模板。(2)原核生物 tRNA 的结构、特点及功能。原核生物 tRNA 的结构：tRNA 是分子量较小的单链 RNA。其二级结构含有较多的发夹结构，形成 4 个双链的臂和 4 个单链的环即氨基酸臂、二氢尿嘧啶臂和二氢尿嘧啶环、反密码臂和反密码环、可变环、TT 臂和 TT 环，使其具有三叶草结构，其三级结构通
29、过折叠形成倒 L 形，一端为氨基酸臂，另一端为反密码环。原核生物 tRNA 的特点：分子量 25KD 左右，沉降系数 4S；多数为 7090 个核苷酸；二级结构三叶草形；三级结构倒 L 形；3 味端(接受末端)为 CCAOH结构，接受活化的氨基酸：5端多为 polyG，也有 polyC 结构的；具有不等的稀有碱基及位置不变的恒定核苷酸。原核生物 tRNA 的功能：在蛋白质生物合成过程中把 mRNA 的信息准确地翻译成蛋白质中氨基酸顺序的适配器分子，携带符合要求的氨基酸，以连接成肽链，再经过加工形成蛋白质，具有转运氨基酸的作用。此外，它在蛋白质生物合成的起始作用中，在 DNA 反转录合成中及其他
30、代谢调节中也起重要作用。(3)原核生物 rRNA 的结构、特点及功能。原核生物 rRNA 的结构：rRNA 多与蛋白质结合在一起，分子量较大。原核生物有三种 rRNA：23S、16S、5S 。，原核生物 rRNA 由 70S 和 30S 大小两个亚基组成。原核生物 rRNA 的特点：有 5s、16s 及 23S 三种；rRNA 存在许多修饰核苷；有广泛的双链区域。在双链区，碱基因氢键相连，表现为发夹式螺旋二级结构，并能进一步折叠形成特定的三级结构。原核生物 rRNA 功能：rRNA 与蛋白质结合形成核糖体，作为 mRNA 的支架，使 mRNA 分子在其上展开，实现蛋白质的合成，是蛋白质合成的场
31、所。57 【正确答案】 原核生物 DNA 复制时，以复制叉向前移动的方向为标准，由于DNA 聚合酶的合成方向是 53，一条模板链是 35走向的即前导链，能够以53的方向连续合成；另一条模板链是 53 走向的即后随链，其合成不能在35方向上进行，而是与复制叉移动的方向相同，随着复制叉的移动，往 53形成许多不连续的片段即冈崎片段，最后连接成一条完整的 DNA 链。后随链的合成是分段进行的，需要不断合成 RNA 引物，由 DNA 聚合酶催化冈崎片段的合成，每当一个新的冈崎片段合成时，DNA 聚合酶 I 就会用外切酶活性切除引物，并填补引物切除后留下的空隙。后随链每次都要等待模板链解开一定长度才能生
32、成引物延长，形成不连续片段，合成速度比前导链稍慢。58 【正确答案】 蛋白质泳动的方向是由负到正的，说明蛋白质带负电荷，则可得出 pI pH，所以 pI8 2。蛋白质进行凝胶电泳时，迁移率取决于其所带静电荷、分子量大小和形状。该蛋白在进行电泳时，迁移方向是由负极到正极，则可得出该蛋白质带负电荷。在凝胶电泳中加入 SDS，SDS 是一种阴离子去污剂，可以使蛋白质变性，所测出的分子量是亚基的相对分子质量，这时的迁移率只与相对分子质量有关，而与电荷无关。SDS 的 PAGE 图中所示有两条条带，说明该蛋白质由两种不同分子质量的亚基组成。由于该蛋白质带负电荷，则可得出 pIpH=8 2，所以该蛋白的
33、pI 是小于 82的。【知识模块】 蛋白质59 【正确答案】 (1)-螺旋与 R 基的带电量有关，R 基带电荷越少，- 螺旋越稳定。pI(Glu)n=(pK1+pK2)2=(219+425)2=3 22。谷氨酸是酸性氨基酸，其 R 基含有羧基，当 pH30 时，R 基不带电或与 NH3+抵消，所以合成的多肽多聚谷氨酸(Glu)n 在水溶液中易形成 -螺旋；当 pH5 0 时，R 基带负电荷，彼此相互排斥，所以为伸展状态。 (2)pI(Lys)=(pK 2+pK3)2=(895+1053)2=9 74。 赖氨酸是碱性氨基酸，其 R 基含有氨基。所以，当 pH974 时，Lvs 的 R 基不带电或
34、与 COO-中和，多聚赖氨酸(Lvs)n 会形成 -螺旋。【知识模块】 蛋白质60 【正确答案】 (1)每 mol 蛋白质所产生的 DNP-Val 的摩尔数应相当于它的 N-末端数，因而也是它的肽链数。 (2)660mg 的该蛋白质样品应含有该蛋白质0005mmol(660132000)，55mg DNP-Val(M r=272)应含有004mmol(55272)。该蛋白质的肽链数为 4(0020005)。 (3)如果该蛋白质是由不同的肽链组成，那么，用 SDS-PAGE 应能检测到不同的电泳谱带。【知识模块】 蛋白质61 【正确答案】 A 和 B 的分子量相近，等电点差异较大，而它们与 C 的分子量差异较大，据此可采用以下方案分离纯化：先根据分子量差异用凝胶过滤层析分离，再根据等电点差异采用离子交换层析分离。先根据等电点差异采用离子交换层析分离，再根据分子量差异用凝胶过滤层析分离。酶是生物催化剂，在提纯时必须尽量减少酶活力的损失，因此全部操作需在低温下进行，一般在 05之间进行，用有机溶剂分级分离时必须在-15时行；为防止重金属使酶失活，提溶剂中加放 EDTA；在整个分离提纯过程中不能过度搅拌，以免产生大量泡沫，而使酶变性。【知识模块】 蛋白质
