1、气相色谱法模拟试卷 3 及答案与解析一、填空题请完成下列各题，在各题的空处填入恰当的答案。1 反相分配色谱适用于分离_化合物，极性_(大或小)的组分先流出，极性_(大或小)的组分后流出。2 高效液相色谱中，梯度洗脱适用于分离极性变化范围_(宽或窄)的试样。3 高效液相色谱中存在的流动相的传质阻力，包括两个方面：_的流动相中的传质阻力及_的流动相中的传质阻力。4 高效液相色谱所用的流动相，一般要经过_和_处理。5 液相色谱的流动相又称为淋洗液，改变其_和_可显著改变组分分离效果。6 高效液相色谱采用梯度洗脱，是为了改变被测组分的保留值，提高_。7 高效液相色谱中，若采用_法进行定量时，选用的标准
2、物应为样品中不含有的纯物质。8 广泛使用的十八烷基(C 18 或 ODS)键合相为_(极性或非极性)键合相，常用于分析_物质。9 化学键合相10 梯度洗脱11 等度洗脱12 离子对色谱法13 离子抑制色谱法14 高效液相色谱中提高柱效的途径有哪些?其中最有效的途径是什么?15 何谓化学键合相? 它有哪些优点 ?16 简述高效液相色谱仪主要部件及其作用。17 高效液相色谱常用检测器有哪几种?其适用范围是什么?18 从分离原理、仪器构造及应用范围上简要比较气相色谱及液相色谱的异同点。19 液相色谱中影响色谱峰展宽的因素有哪些?与气相色谱相比较，有哪些主要不同之处?20 液一液分配色谱和液一固分配色
3、谱的分离原理分别是什么?分别适宜分离何种物质?21 化学键合相色谱的分离机制是什么?适合分离何种物质?22 什么是正相色谱和反相色谱?23 什么是梯度洗脱? 试比较梯度洗脱与气相色谱中的程序升温之间的异同点?24 简述高效液相色谱中，紫外检测器的检测原理及其局限性。25 简述与气相色谱相比，高效液相色谱具有的优势。26 简述梯度洗脱和等度洗脱。27 高效液相色谱进样技术与气相色谱进样技术有何不同之处?28 简述高效液相色谱的速率方程中各项的物理意义。29 用高效液相色谱法分离甲、乙两组分，测得甲的保留时间为 565 分钟，峰宽为 018 分钟；乙的保留时间为 760 分钟，峰宽为 025 分钟
4、。试计算该色谱柱对甲、乙两组分的理论塔板数、平均理论塔板数和两组分的分离度。30 用高效液相色谱法分离 A、B 两组分，测得 A 的保留时间为 525 分钟，半峰宽为 036 分钟；B 的保留时间为 788 分钟，半峰宽为 039 分钟。试计算该色谱柱对 A、B 两组分的理论塔板数和两组分的分离度。31 在 25 咖长的柱上分离 A、B 混合物，A 物质保留时间为 1620 分钟，峰底宽121 分钟；B 物质保留时间为 1763 分钟，峰底宽 127 分钟；不保留物 130分钟流出色谱柱。计算：(1)A、B 两峰的分离度；(2)平均理论塔板数及理论塔板高度；(3)分离度如要达到 15，柱长应为
5、多少?32 准确称取样品 0200g，加入内标物 0200g，测得待测物 A 及内标物的峰面积分别为 51 830，86 163。已知待测物及内标物的相对校正因子分别为080、100。计算组分 A 的百分含量。33 在某一液相色谱柱上组分 A 流出需 150 分钟，组分 B 流出需 250 分钟，而不溶于固定相的物质 C 流出需 20 分钟。问：(1)B 组分相对于 A 的相对保留值是多少?(2)A 组分相对于 B 的相对保留值是多少?(3)组分 A 在柱中的容量因子是多少?(4)组分 B 在固定相的时间是多少?34 高效液相色谱法测定某复方药 M 中有效成分 A 和 B 的含量，采用内标对比
6、法定量。精密称取 M 片剂的质量，求得平均片重 m1=05012g，然后称取片剂的细粉 m2=05010g ，加入内标物 S 的质量(m s)样品 =00350g，经适当处理制备成100m1 混合溶液(样品溶液)。另按药典中该药的片剂处方含量，称取对照品成分A02200g，成分 B01500g，内标物(m s)对照 =00350g。三种纯品经适当处理制备成 100ml 混合溶液(对照品溶液)。经测定，对照品溶液中各组分的峰面积均值为：A(154 900)、 S(171 200)、B(692 300)；样品溶液中各组分的峰面积均值为：A(178 000)、 S(202 700)、B(820 90
7、0)。计算： (1)M 片剂中 A、B 的标示量()； (2)M 片剂中 A、B 的含量 mA、m B。35 某色谱柱的柱效相当于 104 块理论塔板。当所得色谱峰的保留时间为 100 秒、1000 秒和 104 秒时，峰底宽度 W 分别是多少?36 在一根色谱柱上测得某组分的调整保留时间为 194 分钟，峰底宽度为 97 秒，假设色谱峰呈正态分布，色谱柱的长度为 1m，试计算该色谱柱的有效理论塔板及有效理论塔板高度。37 在一个柱效能相当于 4200 块有效理论塔板的色谱柱上，十八烷及 一甲基十七烷的调整保留时间分别为 1505 分钟及 1482 分钟。(1)这两个化合物在此色谱柱上的分离度
8、是多少?(2)如果需要分离度 R=10，需要多少块有效理论塔板?38 利用 HPLC 测定生物碱试样中黄连碱和小檗碱的含量，试样与对照品同法配成溶液后，相同条件下测定，实验结果如表：求试样中黄连碱和小檗碱的含量。39 用 15cm 的 C18 柱分离两个组分。测得 t0=151min ；组分tR1=530min，t R2=565min，柱效 n=35210 3m 一 1。求 k1、k 2、 及 R。40 用色谱法测定花生中农药(稳杀特)的残留量。称取 500g 试样，经适当处理后，用石油醚萃取其中的稳杀特，提取液稀释到 500ml。用该试液 5l 进行色谱分析，测得稳杀特峰面积为 486mm
9、2，同样进 5l 纯稳杀特标样，其质量浓度为5010 -5ngl，测得色谱峰面积为 568mm 2。计算花生中稳杀特的残留量，以ngg 表示。41 分析某种试样时，两个组分的相对保留值 r2,1=111，柱的有效塔板高度H=1mm，需要多长的色谱柱才能完全分离?42 在一液一液色谱柱上，惰性组分保留时间为 30 分钟，组分 A 和 B 的 K 分别为 10 和 15，柱的固定相体积为 05ml，流动相体积为 15ml，流速为05mlmin。求 A、B 的保留时间和保留体积。43 准确称取样品 0100g，加入内标物 0100g，测得待测物 A 及内标物的峰面积分别为 62 357，89 025
10、。已知待测物及内标物的相对校正因子分别为080、100。计算组分 A 的百分含量。44 用 15cm 长的 ODS 柱分离两组分。柱效 n=42910 3m-1；测得 t0=131min；组分的 tR1=410min；t R2=445min。求： (1)k 1、k 2、R 值。 (2)若增加柱长至30cm，分离度 R 可否达 15745 高效液相色谱测定生物碱试样中黄连碱和小檗碱，得到如下数据：计算：(1)黄连碱的分配比是多少?(2)黄连碱和小檗碱的分离度是多少?46 欲测定二甲苯的混合试样中对一二甲苯的含量。称取该试样 1121mg ，加入对一二甲苯的对照品 312mg，用反相色谱法测定。加
11、入对照品前后的色谱峰面积为：对一二甲苯(A 对 412，A 对 1056) ；间一二甲苯(A 间 1425，A 间 1573) 。试计算对一二甲苯的百分含量。气相色谱法模拟试卷 3 答案与解析一、填空题请完成下列各题，在各题的空处填入恰当的答案。1 【正确答案】 非极性；大；小【知识模块】 气相色谱法2 【正确答案】 宽【知识模块】 气相色谱法3 【正确答案】 流动；静态【知识模块】 气相色谱法4 【正确答案】 纯化；脱气【知识模块】 气相色谱法5 【正确答案】 组成；极性【知识模块】 气相色谱法6 【正确答案】 分离度【知识模块】 气相色谱法7 【正确答案】 内标法【知识模块】 气相色谱法8
12、 【正确答案】 非极性；非极性及中等极性【知识模块】 气相色谱法9 【正确答案】 化学键合相：是用化学反应的方法将固定液的官能团键合在载体表面上而形成的固定相。【知识模块】 气相色谱法10 【正确答案】 梯度洗脱：在一个分析周期内，按一定程序不断改变流动相的组成或浓度配比，称为梯度洗脱。【知识模块】 气相色谱法11 【正确答案】 等度洗脱：在一个分析周期内，流动相组成保持恒定，称为等度洗脱。【知识模块】 气相色谱法12 【正确答案】 离子对色谱法：在固定相上涂渍或流动相中加入与溶质分子电荷相反的离子对试剂来分离离子型或可离子化的化合物的方法称为离子对色谱法。【知识模块】 气相色谱法13 【正确
13、答案】 离子抑制色谱法：分析弱酸弱碱时，常因组分的离解而使得组分峰产生拖尾，故向流动相中加入酸、碱或缓冲溶液，以控制流动相的 pH，抑制组分的离解，增加组分在固定相中的溶解度，减少谱带拖尾、改善峰形，这种技术称为离子抑制色谱法。【知识模块】 气相色谱法14 【正确答案】 液相色谱中提高柱效的途径主要有：提高柱内填料装填的均匀性；采用小粒度固定相； 选用低黏度的流动相； 适当提高柱温。其中减小粒度是最有效的途径。【知识模块】 气相色谱法15 【正确答案】 利用化学反应将固定液的官能团键合在载体表面形成的固定相称为化学键合固定相。优点主要有：使用过程中不易流失； 化学性能稳定，一般在 pH 28
14、的溶液中不变质；热稳定性好，一般在 70以下不变性；载样量大，比硅胶约高一个数量级；适于作梯度洗脱。【知识模块】 气相色谱法16 【正确答案】 高效液相色谱仪一般由贮液瓶、高压泵、进样器、色谱柱、检测器及工作站等部件组成。贮液瓶的作用是贮存实验用的流动相。高压泵的作用是给流动相施加高压并将输送流动相进入色谱柱。进样器的作用是将样品导入色谱仪中。色谱柱的作用是将样品各组分分离。检测器的作用是检测从色谱柱中流出的组分。工作站的作用是控制仪器以及进行相关的数据处理。【知识模块】 气相色谱法17 【正确答案】 高效液相色谱法中常用的检测器有：紫外检测器、荧光检测器、电化学检测器、示差折光检测器、二极管
15、阵列检测器、蒸发光散射检测器等。紫外检测器适用于检测有紫外吸收的物质。荧光检测器适用于能产生荧光或其衍生物能发荧光的物质。蒸发光散射检测器适用于无紫外吸收(或较弱)的物质如糖类等。【知识模块】 气相色谱法18 【正确答案】 两者都是根据组分与流动相、固定相之间相互作用力的差别进行分离的。从仪器构造上看，液相色谱需要采用高压泵提高流动相的流动速度。而且液相色谱所采用的固定相种类要比气相色谱更多，分离方式也比较多样。气相色谱的检测器主要采用热导检测器、氢焰检测器等。而液相色谱则多使用紫外检测器、荧光检测器及电化学检测器等。两者均具分离能力强、灵敏度高、分析速度快，操作方便等优点。但对于沸点太高的物
16、质或热稳定性差的物质一般难以用气相色谱进行分析。而只要试样能够制成溶液，即可用于 HPLC 分析，而不受沸点高、热稳定性差、相对分子量大的限制。【知识模块】 气相色谱法19 【正确答案】 液相色谱中引起色谱峰扩展的因素主要包括包括涡流扩散、流动的流动相传质阻力、滞留的流动相传质阻力以及柱外效应。在气相色谱纵向扩散比较显著，而液相色谱中纵向扩散的影响较弱，往往可以忽略。另外，在液相色谱中还存在比较显著的滞留流动相传质及柱外效应。【知识模块】 气相色谱法20 【正确答案】 液一液分配色谱的保留机制是通过组分在固定相和流动相间的多次分配进行分离的。可以分离各种无机、有机化合物。液一固吸附色谱是通过组
17、分在两相间的多次吸附与解吸平衡实现分离的。最适宜分离的物质为中等相对分子质量的油溶性试样，凡是能够用薄层色谱分离的物质均可用此法分离。【知识模块】 气相色谱法21 【正确答案】 化学键合色谱中由于键合基团不能全部覆盖具有吸附能力的载体，所以同时遵循吸附和分配的机制，最适宜分离的物质为与液一液色谱相同。【知识模块】 气相色谱法22 【正确答案】 正相色谱是指流动相的极性小于固定相极性的一类色谱。反相色谱是指流动相的极性大于固定相极性的一类色谱。【知识模块】 气相色谱法23 【正确答案】 在一个分析周期内，按一定程序不断改变流动相的组成或浓度配比，称为梯度洗脱，梯度洗脱是改进液相色谱分离效果的重要
18、手段。梯度洗脱与气相色谱中的程序升温类似，但是前者连续改变的是流动相的极性、pH 或离子强度，而后者改变的是温度。程序升温也是改进气相色谱分离效果的重要手段。【知识模块】 气相色谱法24 【正确答案】 检测原理一一朗伯比尔定律；局限性一一只能检测有紫外吸收的物质，流动相的截止波长应小于检测波长。【知识模块】 气相色谱法25 【正确答案】 高效液相色谱的优势：不受试样的挥发性和热稳定性的限制，应用范围广。可以用各种溶剂做流动相，对分离的选择性有很大作用，选择性高。一般在室温条件下进行分离，不需要高柱温。【知识模块】 气相色谱法26 【正确答案】 在一个分析周期内，按一定程序不断改变流动相的组成或
19、浓度配比，称为梯度洗脱。梯度洗脱是改进液相色谱分离效果的重要手段。在一个分析周期内，流动相组成保持恒定，称为等度洗脱。等度洗脱适用于组分数目少、性质差别不大的样品。【知识模块】 气相色谱法27 【正确答案】 在液相色谱中为了承受高压，常常采用停流进样与高压定量进样阀进样的方式。【知识模块】 气相色谱法28 【正确答案】 高效液相色谱的速率方程：H=A+CuA：涡流扩散项，在填充色谱中，当组分随载气向柱出口迁移时，碰剑填充物颗粒阻碍会不断改变流动方向，使组分在气相中形成紊乱的类似“涡流” 的流动，因而引起色谱峰的变宽。Cu：传质阻力项。主要包括流动相传质阻抗项与静态流动相传质阻力项。前者由色谱柱
20、及填充状况、固定相粒径、扩散系数决定，减小固定相粒径及流动相液体的黏度，可以减小峰展宽，提高柱效。后者是液相色谱柱中装填的无定形或球形全多孔微粒固定相，其颗粒内部的孔洞充满了静态流动相，组分分子由于进入滞留在固定相微孔内的静态流动相中，与固定相进行分配，因而相对晚回到流路中，引起峰展宽。【知识模块】 气相色谱法29 【正确答案】 【知识模块】 气相色谱法30 【正确答案】 【知识模块】 气相色谱法31 【正确答案】 【知识模块】 气相色谱法32 【正确答案】 【知识模块】 气相色谱法33 【正确答案】 【知识模块】 气相色谱法34 【正确答案】 【知识模块】 气相色谱法35 【正确答案】 【知识模块】 气相色谱法36 【正确答案】 【知识模块】 气相色谱法37 【正确答案】 【知识模块】 气相色谱法38 【正确答案】 【知识模块】 气相色谱法39 【正确答案】 【知识模块】 气相色谱法40 【正确答案】 【知识模块】 气相色谱法41 【正确答案】 【知识模块】 气相色谱法42 【正确答案】 【知识模块】 气相色谱法43 【正确答案】 【知识模块】 气相色谱法44 【正确答案】 【知识模块】 气相色谱法45 【正确答案】 【知识模块】 气相色谱法46 【正确答案】 【知识模块】 气相色谱法
