1、1第二章 克隆技术一、单选题1.单克隆抗体制备过程中，骨髓瘤细胞和 B 淋巴细胞融合后，要筛选出杂交瘤细胞，在这种培养基上不能存活增殖的细胞是 ( )。B 淋巴细胞 小鼠骨髓瘤细胞 B 淋巴细胞自身融合细胞 小鼠骨髓瘤细胞自身融合细胞 杂交瘤细胞 A. B. C. D. 2.如果用动物的细胞进行克隆实验应该选择的细胞核不能来源于（ ） A. 乳腺细胞 B. 卵细胞 C. 胃腺细胞 D. 胚胎时期的胚胎细胞3.如图为克隆牛（名为如意）的培育过程。下列有关叙述正确的是（ ）A.如意的表现型和 B 牛相同B.如意的产生过程为有性生殖C.试管婴儿的操作过程和克隆牛的不完全相同D.可用 A 牛的精子代替
2、 B 牛的卵细胞4.如图表示抗人体胃癌的单克隆抗体的制备过程，有关叙述不正确的是（ ）A. 图中实验小鼠注射的甲是能与抗人体胃癌抗体特异性结合的抗原B. 在培养液中加入促融剂诱导细胞融合才能获得乙C. 用特定的选择培养基对乙筛选，能增殖的均为融合细胞D. 丙需进行大规模体外培养和抗体检测，经多次筛选后可获得大量能分泌所需抗体的丁5.下图是单克隆抗体制备过程示意图，其中 1 过程注射的物质和 A 细胞的名称分别为( ) A. 抗体、T 淋巴细胞 B. 抗原、T 淋巴细胞 C. 抗体、B 淋巴细胞 D. 抗原、B 淋巴细胞26.下列关于体细胞克隆的叙述中，错误的是( ) A. 供体为体细胞的细胞核
3、 B. 受体为去核卵母细胞C. 细胞核移植是体细胞克隆的关键步骤 D. 克隆出的后代与供体的遗传物质和表现型完全一致7.下图是科学家新研发的制备单克隆抗体的过程，相关叙述错误的是( )A. 该过程涉及基因工程和动物细胞融合技术 B. 经酶 A 处理后的与质粒具有相同的黏性末端C. 若供体 DNA 提供了 prG 基因(无限增殖调控基因)，则该过程中的是已免疫的 B 淋巴细胞 D.通过检测和筛选得到的细胞既能无限增殖又能分泌特异性抗体8.下列关于克隆的叙述，不正确的一项是（ ） A. 生物体通过体细胞进行的无性繁殖 B. 将某肿瘤细胞在体外培养繁殖成一个细胞系C. 扦插和嫁接实质上也是克隆 D.
4、 将鸡的某个 DNA 片段整合到小鼠的 DNA 中9.随着生物技术的迅速发展，已灭绝生物的“复活”将不再是神话。如果世界上最后一只野驴刚刚死亡，下列“复活”野驴的方法中，最可行的是 A. 将野驴的体细胞取出，利用组织培养技术，经脱分化、再分化，培育成新个体B. 取出野驴的体细胞两两融合，再经组织培养培育成新个体C. 取出野驴的体细胞核移植到家驴的去核卵母细胞中，经孕育培养成新个体D. 将野驴的基因导入家驴的受精卵中，培育成新个体10.牛雄性胚胎中存在特异性 H-Y 抗原，可在牛早期胚胎培养液中添加 H-Y 单克隆抗体，筛选胚胎进行移植，以利用乳腺生物反应器进行生物制药。下列相关叙述正确的是（
5、） A. 此过程利用了动物细胞培养技术B. H-Y 单克隆抗体由骨髄瘤细胞分泌C. 培养鉴别后的雄性胚胎用于生产药物D. 目的基因与含有血红蛋白基因的启动子的载体连接11.下列关于单克隆抗体的应用叙述错误的是( ) A. 特异性强、灵敏度高；与抗癌药物结合可制成“生物导弹”B. 制备单克隆抗体是动物细胞融合技术最重要的应用C. 体外培养 B 淋巴细胞可大量分泌单克隆抗体D. 由效应 B 细胞与骨髓瘤细胞融合而成的杂交瘤细胞分泌12.科学家用小鼠骨髓瘤细胞与某种细胞融合，得到杂交瘤细胞，经培养可产生大量的单克隆抗体。与骨髓瘤细胞融合的细胞是( ) A. 经过特定抗原免疫的 B 淋巴细胞 B. 不
6、经过免疫的 B 淋巴细胞C. 经过特定抗原免疫的 T 淋巴细胞 D. 不经过免疫的 T 淋巴细胞13.用动物细胞工程技术获取单克隆抗体，下列实验步骤中错误的是（ ） A. 将抗原注入小鼠体内，获得能产生抗体的 B 淋巴细胞B. 用纤维素酶处理 B 淋巴细胞与小鼠骨髓瘤细胞3C. 用聚乙二醇（PEG）作诱导剂，促使能产生抗体的 B 淋巴细胞与小鼠骨髓瘤细胞融合D. 筛选杂交瘤细胞，并从中选出能产生所需抗体的细胞群，培养后提取单克隆抗体二、填空题14.如图表示人类“治疗性克隆”的大概过程，请据图回答：（1）人类“治疗性克隆”属于生物工程中的_ 工程，它是一种_ 水平的操作（2）科学家将患者的体细胞
7、的核植入去核的卵细胞，而不直接用体细胞进行培养的原因是：_ （3）你认为“治疗性克隆”有什么意义？（答出两点）_ ， _ （4）胚胎干细胞若作为培育转基因动物的受体细胞被移入囊胚中，胚胎将发育成只有部分细胞含有目的基因的“嵌合体”这种嵌合体的后代仍然会含有目的基因吗？_ 原因是_ （5）在胚胎工程中，可以利用连续胚胎细胞核移植的方式培育动物，该技术的优点是_ 15.人绒毛膜促性腺激素（HCG）是女性怀孕后胎盘滋养层细胞分泌的一种糖蛋白，制备抗 HCG 单克隆抗体可用于早孕的诊断图是抗 HCG 单克隆抗体制备流程示意图，请分析回答：（1）制备单克隆抗体过程中要用到_ 和_技术（2）在 B 淋巴细
8、胞内 DNA 合成有 D 和 S 两条途径，其中 D 途径能被氨基嘌呤所阻断而骨髓瘤细胞的DNA 合成没有 S 途径利用 DNA 合成途径不同的特点配制的 HAT 培养基含有多种成分，其中添加的_成分具有筛选杂交瘤细胞的作用最终筛选获得的杂交瘤细胞的特点是_ （3）哺乳动物在怀孕初期能为胚胎的收集提供可能，这是因为_ ；在胚胎移植技术中收集到胚胎后要进行_ 以及移植后的检查等步骤；胚胎移植时可利用激素对受体进行_处理，使受体处于适合的生理状况；此外，受体对移入子宫的外来胚胎基本上不发生_反应，为胚胎在受体内的存活提供了可能416.新兴生物工程能使免疫学在应用方面更上一层楼，为人类带来福音一方面
9、新兴生物工程可以为免疫活性物质及疫苗的制备开辟新途径，解决免疫治疗及免疫预防方面的难题；另一方面，新兴生物工程还可以为解决器官移植所面临的供体不足和免疫排斥两大难题提供可能（1）利用_ 技术发展起来的杂交瘤技术，为制备单克隆抗体开辟了新途径，与传统方法获取的同类产品相比，它的显著优点是_ （2）干扰素及部分疫苗都可以通过_ 技术制造的工程菌来大规模生产，如国内应用较普遍的重组 CHO 乙肝疫苗；（3）对大面积烧伤病人，借助_ 技术可获取大量自身健康皮肤用于移植（4）通过向供体动物基因组中导入某种调节因子，以抑制_ 的表达，或设法将之去除，再结合_ 技术，可培育出无免疫排斥的转基因猪器官；（5）
10、_ 的分离和培养成功也为解决上述难题开辟了新途径，因其具有_ 性，可在体外诱导分化产生各种人造组织器官 三、实验探究题17.Graves 病（GD）可导致甲状腺功能亢进。研究发现，GD 患者甲状腺细胞表面表达大量细胞间粘附分子 1（ICAM-1），导致甲状腺肿大。科研人员通过制备单克隆抗体，对治疗 GD 进行了尝试。 （1）用 ICAM-1 作为抗原间隔多次免疫若干只小鼠，几周后取这些免疫小鼠的血清，分别加入多孔培养板的不同孔中，多孔培养板中需加入_以检测这些小鼠产生的抗体。依据反应结果，选出_反应最强的培养孔所对应的小鼠 M。 （2）实验用骨髓瘤细胞置于_恒温培养箱中 37培养，融合前将部分
11、培养细胞置于含 HAT 的选择培养基中培养，一段时间后培养基中_（填“有”或“无”）骨髓瘤细胞生长，说明培养基符合实验要求。 （3）取小鼠 M 的脾脏细胞制备成细胞悬液，与实验用骨髓瘤细胞进行融合，用选择培养基筛选得到具有_能力的细胞。将获得的上述细胞在多孔培养板上培养，用 ICAM-1 检测，从中选择_的杂交瘤细胞，植入小鼠腹腔中_培养，一段时间后从小鼠腹水中提取实验用抗体。 （4）若进一步比较实验用抗体和 131I 对 GD 模型小鼠的治疗作用，可将若干 GD 模型小鼠等分为三组，请补充下表中的实验设计。对照组（A） 131I 治疗组（B） 单克隆抗体治疗组（C）给 GD 模型小鼠腹腔注射
12、 0.1mL 无菌生理盐水给 GD 模型小鼠腹腔注射溶于 0.1mL 无菌生理盐水的 131I _四、综合题18.下图是某实验室做的通过动物纤维母细胞等获得单抗的实验研究。据图回答相关问题。（1）X、Y、Z 细胞的的名称分别是_、_、_。 5（2）过程类似于植物组织培养技术中的_过程。与纤维母细胞相比，诱导干细胞的全能性较_。过程的实质是_。 （3）X 细胞和 Y 细胞经过促融合处理后可得到_种细胞 19.单纯疱疹病毒 I 型(HSVI)可引起水泡性口唇炎。利用杂交瘤技术制备出抗 HSVI 的单克隆抗体可快速检测 HSVI。回答下列问题： （1）在制备抗 HSVI 的单克隆抗体的过程中，先给小
13、鼠注射一种纯化的 HSVI 蛋白，一段时间后，若小鼠血清中抗_的抗体检测呈阳性，说明小鼠体内产生了_反应，再从小鼠的_中获取 B 淋巴细胞。将该 B 淋巴细胞与小鼠的_细胞融合，再经过筛选、检测，最终可获得所需的杂交瘤细胞，该细胞具有的特点是_。 （2）若要大量制备抗该蛋白的单克隆抗体，可将该杂交瘤细胞注射到小鼠的_中使其增殖，再从_中提取、纯化获得。 （3）通过上述方法得到的单克隆抗体可准确地识别这种 HSVI 蛋白，其原因是该抗体具有_和_等特性。 6答案解析部分一、单选题1.【答案】A 【解析】【分析】B 淋巴细胞能产生特异性抗体，在体外不能无限增殖；骨髓瘤细胞不产生专一性抗体，在体外能
14、无限增殖。所以 B 淋巴细胞自身融合细胞在体外也不能存活增殖，而杂交瘤细胞和骨髓瘤细胞自身融合细胞在体外能存活增殖。用特定的培养基可以选择性抑制骨髓瘤细胞的 DNA 复制，所以骨髓瘤细胞和骨髓瘤细胞自身融合细胞在这种特定的培养基上不能存活繁殖。故选 A2.【答案】B 【解析】【解答】解：1、乳腺细胞、胃腺细胞和胚胎时期的胚胎细胞都含有 2 个染色体组，经过核移植获得克隆动物2、卵细胞只含有 1 个染色体组，核移植后获得单倍体，对于绝大多数二倍体动物而言，单倍体不能存活 故选：B【分析】动物核移植的概念：将动物的一个细胞的细胞核移入一个去掉细胞核的卵母细胞中，使其重组并发育成一个新的胚胎，这个新
15、的胚胎最终发育为动物个体（克隆动物）3.【答案】C 【解析】【解答】分析过程图可知，如意的细胞核遗传物质来自于 A 牛，细胞质中的遗传物质来自于 B牛，生物的表现型由细胞核内遗传物质和细胞质中遗传物质共同控制，并受环境条件的影响，因此如意的表现型和 A 牛、B 牛都不完全相同，A 不符合题意；图中显示，如意的产生是动物体细胞移植的结果，其过程应为无性生殖，B 不符合题意；试管婴儿的诞生应用了体外受精、早期胚胎培养及胚胎移植等技术，其操作过程和克隆牛的不完全相同，C 符合题意；与 A 牛的精子相比，B 牛的卵细胞中含有细胞核遗传物质表达所需的成分，同时卵细胞体积大，所含的营养物质（卵黄）多，因此
16、不能用 A 牛的精子代替 B 牛的卵细胞，D 不符合题意。故答案为：C【分析】特别提醒 (1)核移植时选 M期卵母细胞的原因有：此类细胞体积大，易于操作；卵黄多，可为发育提供充足的营养；卵母细胞的细胞质中存在激发细胞核全能性表达的物质。(2)克隆动物是由重组细胞经培养而来的，该重组细胞的细胞质基因来源于受体细胞，细胞核基因来源于供体细胞的细胞核，所以克隆动物绝大部分性状与供体动物相同，少数性状与提供卵母细胞的动物相同，与代孕动物的性状无遗传关系。(3)动物体细胞核移植技术(克隆)从生殖方式的角度看属于无性生殖，需要动物细胞培养和胚胎工程技术的支持。4.【答案】C 【解析】【解答】解：A、甲注射
17、小鼠，产生能分泌特异性抗体的 B 淋巴细胞，则甲属于抗原，A 正确；B、利用聚乙二醇（化学法）、灭活的病毒（生物法）和电激（物理法）可诱导细胞融合获得杂种细胞，B 正确；C、用特定的选择培养基对乙筛选，融合具有同种核的细胞和未融合细胞均不能生长，只有融合的杂种细胞能生长，C 错误；D、杂交瘤细胞经过选择培养基的筛选并经单一抗体检测后，培养能产生特定抗体的杂交瘤细胞即可制备7单克隆抗体，D 正确故选：C【分析】据图分析，甲表示抗原，乙表示杂种细胞，表示杂交瘤细胞，丁表示能产生特异性抗体的杂交瘤细胞单克隆抗体的两次筛选：筛选得到杂交瘤细胞（去掉未杂交的细胞以及自身融合的细胞）；筛选出能够产生特异性
18、抗体的细胞群两次抗体检测：专一抗体检验阳性5.【答案】D 【解析】【解答】分析图形可知，图中 1 过程注射的是特定抗原，以获得经免疫的 B 淋巴细胞，用于和骨髓瘤细胞融合形成杂交瘤细胞，生产单克隆抗体，D 正确。【分析】本题考查单克隆抗体制备过程，意在考查考生能理解所学知识的要点，把握知识间的内在联系，形成知识网络的能力。6.【答案】D 【解析】【分析】克隆出的后代与供体的细胞核内的遗传物质一致但由于细胞质遗传物质的影响还有环境的影响表现型不完全一致，D 错误，ABC 的叙述正确，本题选 D。【点评】本题考查了学生的理解分析能力，难度适中，解题的关键是明确体细胞克隆的过程。7.【答案】A 【解
19、析】【解答】由图可知，该过程涉及基因工程，但未涉及动物细胞融合技术。该过程是把控制抗体产生的基因导入骨髓瘤细胞或把无限增殖调控基因导入已免疫的 B 细胞进而制取单克隆抗体的。故答案为：A【分析】分析题图，用同一种限制性内切酶（酶 A）处理供体 DNA 和质粒，产生相同的黏性末端，用 DNA连接酶（酶 B）处理产生重组质粒，导入效应 B 细胞（细胞）产生重组细胞。8.【答案】D 【解析】【解答】A、物体通过体细胞进行的无性繁殖即克隆，A 正确；B、某肿瘤细胞在体外培养繁殖是由一祖先细胞分裂繁殖成一团细胞的过程，属于无性繁殖，因此属于克隆，B 正确；C、扦插和嫁接属于无性繁殖，能保持亲本的遗传性状
20、，属于个体水平的克隆，C 正确；D、将鸡的某个 DNA 片段整合到小鼠的 DNA 中属于转基因技术，D 错误故选：D【分析】克隆是指生物体通过体细胞进行的无性繁殖，以及由无性繁殖形成的基因型完全相同的后代个体组成的种群通常是利用生物技术由无性生殖产生与原个体有完全相同基因组织后代的过程不经过两性细胞结合而直接繁衍后代，就叫无性繁殖，也称克隆9.【答案】C 【解析】【分析】此时应该选择克隆的方法，利用细胞核移植技术，使野驴“复活”，因为动物细胞的全能性受到限制，而细胞核具有全能性，故本题答案选 C。10.【答案】A 【解析】【解答】此过程利用了动物细胞培养技术、胚胎移植技术等，A 符合题意；H-
21、Y 单克隆抗体由杂交瘤细胞分泌，B 不符合题意；由于是利用乳腺生物反应器进行生物制药，则鉴别后的雌性胚胎可用于生产药物，而雄性胚胎没有意义，C 不符合题意；本题没有涉及到基因工程以及目的基因的种类等，D 不符合题意。故答案为：A8【分析】理清单克隆抗体制备的过程：11.【答案】C 【解析】【解答】单克隆抗体的优点是特异性强、灵敏度高，同时单克隆抗体的应用之一就是制成生物导弹，故 A 正确；单克隆抗体制备的原理是动物细胞融合，故 B 正确；单克隆抗体是由杂交瘤细胞分泌的，故 C 错误，D 正确。【分析】本题主要考查单克隆抗体的制备及应用，意在考查考生能理解所学知识的要点，把握知识间的内在联系的能
22、力。12.【答案】A 【解析】【解答】骨髓瘤细胞必须与经过特定抗原免疫的 B 淋巴细胞融合，形成杂交瘤细胞，才能大量增殖并产生能够与相应的抗原特异性结合的单克隆抗体。故答案为：A【分析】B 淋巴细胞要经过免疫过程，即接触抗原，增殖分化为有特异性免疫功能的 B 淋巴细胞，才能产生相应的抗体，所以，与骨髓瘤细胞融合的 B 淋巴细胞实际上是浆细胞。13.【答案】B 【解析】【分析】A.将特定的抗原注入小鼠体内，获得能产生抗体的 B 淋巴细胞；正确。B.纤维素酶是用来处理细胞壁的，而动物细胞不含细胞壁；处理 B 淋巴细胞与小鼠骨髓瘤细胞用胰蛋白酶；错误。C.用聚乙二醇（PEG）作诱导剂，促使能产生抗体
23、的 B 淋巴细胞与小鼠骨髓瘤细胞融合；正确。D.筛选杂交瘤细胞，并从中选出能产生特异性抗体的细胞群，既能大量增殖，又能产生特异性抗体，培养后提取单克隆抗体；正确。【点评】本题考查了动物细胞工程的知识，提升学生理解能力和分析与综合运用能力。二、填空题14.【答案】 细胞 ；细胞；体细胞核在体细胞中不能表现全能性，而卵母细胞的细胞质可以给它提供表达全能性的环境；为人类疾病治疗提供了新的途径；再造人体组织或器官供移植；没有排斥反应；不一定 ；嵌合体的生殖细胞中不一定含有目的基因；后代完全保留了亲代的遗传性，并可无限度地获得遗传性状完全相同的后代 【解析】【解答】（1）人类“治疗性克隆”涉及核移植技术
24、和动物细胞培养技术，属于细胞工程，是一种细胞水平的操作（2）将患者的体细胞的核植入去核的卵细胞，而不直接用体细胞进行培养，原因是体细胞核在体细胞中不能表现全能性，而卵母细胞的细胞质可以给它提供表达全能性的环境（3）“治疗性克隆”为人类疾病治疗提供了新的途径，再造人体组织或器官供移植；没有排斥反应9（4）只有部分细胞含有目的基因的“嵌合体”，形成的生殖细胞中不一定含有目的基因，因此这种嵌合体的后代不一定含有目的基因（5）利用连续胚胎细胞核移植的方式培育动物，优点是后代完全保留了亲代的遗传性，并可无限度地获得遗传性状完全相同的后代【分析】分析题图：图示所示为人类“治疗性克隆”的大概过程，从患者身体
25、上提取一个体细胞核，移植到去核的卵细胞，形成重组细胞，形成胚胎干细胞，分裂分化形成各种组织和器官，供患者本人移植用15.【答案】 动物细胞培养 ；动物细胞融合；氨基嘌呤 ；能无限增殖并分泌特异性抗体；早期胚胎在一定时间内不会与母体子宫建立组织上的联系，而是处于游离状态；检查，培养或保存；同期发情；免疫排斥 【解析】【解答】解：（1）制备单克隆抗体的过程涉及到动物细胞融合和动物细胞培养两个过程（2） 根据题意可知，在培养基中添加氨基嘌呤后，可以阻断 DNA 复制的主要途径，又因为骨髓瘤细胞的 DNA 合成没有辅助途径，因此在此培养基中选择生存下来的细胞只有融合后的杂交瘤细胞，因为只有杂交细胞才能
26、进行辅助途径进行 DNA 复制并分裂增殖杂交瘤细胞的特点是能无限增殖并分泌特异性抗体（3） 哺乳动物的早期胚胎形成后，在一定时间内处于游离状态，没有与母体子宫建立组织上的联系，这样为胚胎的收集提供了可能在胚胎移植技术中，收集到胚胎后要 先进行检查、培养或保存，然后再进行移植，以及移植后的检查等步骤胚胎移植时可利用激素对受体进行同期发情处理，使受体处于适合的生理状况；此外，受体对移入子宫的外来胚胎基本上不发生免疫排斥，为胚胎在受体内的存活提供了可能【分析】1、单克隆抗体的制备过程是：对小动物注射抗原，从该动物的脾脏中获取效应 B 细胞，将效应B 细胞与骨髓瘤细胞融合，筛选出能产生单一抗体的杂交瘤
27、细胞，克隆化培养杂交瘤细胞（体内培养和体外培养），最后获取单克隆抗体2、 胚胎移植的生理基础：（1）供体与受体相同的生理变化，为供体的胚胎植入受体提供了相同的生理环境；（2）胚胎在早期母体中处于游离状态，这就为胚胎的收集提供了可能；（3）子宫不对外来胚胎发生免疫排斥反应，这为胚胎在受体内的存活提供了可能（4）胚胎遗传性状不受受体任何影响16.【答案】 细胞融合 ；特异性强、灵敏度高、并可大量制备（产量高）；转基因（基因工程）；动物细胞培养；抗原决定基因 ；克隆；胚胎干细胞 ；全能性 【解析】【解答】（1）利用细胞融合技术发展起来的杂交瘤技术，为制备单克隆抗体开辟了新途径单克隆抗体的优点是特异性
28、强、灵敏度高、并可大量制备（产量高）（2）工程菌是基因工程中常用的受体细胞（3）大面积烧伤的病人们可以采用动物细胞培养技术获得大量自身健康皮肤进行移植（4）利用基因工程获得无免疫排斥的转基因猪器官，可以向动物基因组中加入某种调节因子，以抑制抗原决定簇基因，再结合克隆技术获得基因个体（5）胚胎干细胞具有发育全能性，可以在体外分化成各种组织由于器官移植【分析】利用细胞融合技术发展起来的杂交瘤技术，为制备单克隆抗体开辟了新途径单克隆抗体的优点是特异性强、灵敏度高、并可大量制备（产量高）； 工程菌是基因工程中常用的受体细胞；大面积烧伤的病人们可以采用动物细胞培养技术获得大量自身健康皮肤进行移植；利用基
29、因工程获得无免疫排斥10的转基因猪器 官，可以向动物基因组中加入某种调节因子，以抑制抗原决定簇基因，再结合克隆技术获得基因个体；胚胎干细胞具有发育全能性，可以在体外分化成各种组织由于器官移植三、实验探究题17.【答案】（1）ICAM-1；阳性（或“抗原-抗体”） （2）（5%）CO 2；无（3）无限增殖；大量产生抗 ICAM-1 抗体；克隆（4）给 GD 模型小鼠腹腔注射溶于 0.1mL 无菌生理盐水的抗 ICAM-1 单克隆抗体 【解析】【解答】解：（1）用 ICAM1 作为抗原间隔多次免疫若干只小鼠，几周后取这些免疫小鼠的血清，分别加入多孔培养板的不同孔中，多孔培养板中需加入 ICAM1
30、以检测这些小鼠产生的抗体依据反应结果，选出阳性（或“抗原抗体”）反应最强的培养孔所对应的小鼠 M（2）实验用骨髓瘤细胞置于（5%）CO 2恒温培养箱中 37培养，融合前将部分培养细胞置于含 HAT 的选择培养基中培养，一段时间后培养基中无骨髓瘤细胞生长，说明培养基符合实验要求（3）取小鼠 M 的脾脏细胞制备成细胞悬液，与实验用骨髓瘤细胞进行融合，用选择培养基筛选得到具有无限增殖能力的细胞将获得的上述细胞在多孔培养板上培养，用 ICAM1 检测，从中选择大量产生抗 ICAM1 抗体的杂交瘤细胞，植入小鼠腹腔中克隆培养，一段时间后从小鼠腹水中提取实验用抗体（4）根据题干中实验目的“比较实验用抗体和
31、131I 对 GD 模型小鼠的治疗作用”，单克隆抗体治疗组（C）中应给 GD 模型小鼠腹腔注射溶于 0.1mL 无菌生理盐水的抗 ICAM1 单克隆抗体【分析】理清单克隆抗体的制备过程四、综合题18.【答案】（1）骨髓瘤细胞；抗原刺激过的 B 细胞（浆细胞）；杂交瘤细胞（2）脱分化；高；基因的选择性表达（3）5 【解析】【解答】在单克隆抗体制备的过程中，将骨髓瘤细胞和特定的浆细胞融合，形成杂交瘤细胞，最后经过培养获得单克隆抗体，因此 X 细胞是骨髓瘤细胞，Y 细胞是特定的浆细胞，Z 细胞是杂交瘤细胞。诱导纤维母细胞变成干细胞的过程相当于植物组织培养过程中的脱分化过程；干细胞的分裂能力强，因此其
32、全能性比纤维母细胞高；过程是细胞分化，其实质是基因的选择性表达。在诱导细胞融合时，可能融合，也可能没有融合，因此能获得 5 种细胞；杂交瘤细胞经过筛选的目的是帅选出能产生所需抗体的杂交瘤细胞。【分析】本题主要考查单克隆抗体的制备，意在考查考生能理解所学知识的要点，把握知识间的内在联系，形成知识的网络结构和识图、图文转化的能力。1119.【答案】（1）HSV1 蛋白；体液免疫；脾脏(其他合理答案也可)；骨髓瘤；能无限增殖且可产生专一抗体(其他合理答案也可)（2）腹腔；腹水 （3）灵敏度高；特异性强(其他合理答案也可) 【解析】【解答】(1)单克隆抗体制备的第一步是免疫处理。先给小鼠注射一种纯化的
33、 HSV1 蛋白，一段时间后，若小鼠血清中抗 HSV1 蛋白的抗体检测呈阳性，说明小鼠体内产生了体液免疫反应。第二步制备杂交瘤细胞。从小鼠的淋巴器官中(如脾，骨髓，扁桃体，胸腺等)获取 B 淋巴细胞，与小鼠的骨髓瘤细胞融合，再经过筛选检测，最终可获得所需的杂交瘤细胞。杂交瘤细胞既能无限增殖，又能产生专一性抗体。(2)若想获得大量单克隆抗体，通常有两种方法：一是将杂交瘤细胞培养在动物细胞培养液中，然后从动物细胞培养液中分离出单克隆抗体；二则是将杂交瘤细胞注射到小鼠的腹腔中使其增殖，然后从小鼠的腹水中提取纯化获得。(3)单克隆抗体具有特异性强、灵敏度高等特点。【分析】单克隆抗体：由一个 B 淋巴细胞增殖形成的细胞群所产生的单一型抗体分子。制备原理：免疫原理，细胞融合原理和动物细胞培养原理优点：特异性强，灵敏度高，并能大量制备。由小鼠骨髓瘤细胞与 B 细胞融合而成的杂交瘤细胞，继承了双亲细胞的遗传物质，不仅具有 B 细胞分泌抗体的能力，而且还有无限增殖的本领，因而可以获得大量单克隆抗体。
