1、1细胞工程1(2019安徽六安舒城中学期末)下图为 A、B 两种二倍体植物体细胞杂交过程示意图，请据图回答下列问题：(1)步骤的方法是_。步骤常用的化学试剂是_，之后_(填“是”或“否”)需要筛选。(2)在利用杂种细胞培育成为杂种植物的过程中，运用的技术手段是_，其中步骤是_。植物体细胞杂交的目的是获得新的杂种植物，与 A、B 两种植物相比，该杂种植物是新物种的原因是_。(3)培育该杂种植物的过程中，遗传物质的传递是否遵循孟德尔遗传规律？为什么？_。解析：(1)题图为植物体细胞杂交过程示意图，其中表示去壁获取原生质体的过程，常用酶解法，即用纤维素酶和果胶酶处理；表示人工诱导原生质体融合，常用的
2、化学试剂是聚乙二醇(PEG)，诱导后形成的两两融合的原生质体有三种，所以需要进行筛选。(2)图中表示再生出新细胞壁的过程，杂种细胞通过植物组织培养技术培育成为杂种植物，过程表示脱分化；表示再分化过程。图中获得的杂种植物与 A、B 两种植物间均存在生殖隔离，所以是新物种。(3)图示为植物体细胞杂交过程，没有经过不同配子的结合，所以不属于有性生殖，因此该过程中遗传物质的传递不遵循孟德尔遗传规律。答案：(1)酶解法 聚乙二醇 是(2)植物组织培养技术 脱分化 该杂种植株与 A、B 两种植物间均存在生殖隔离(3)不遵循，该过程不属于有性生殖2如图为动物细胞培养过程中细胞增殖曲线(甲)及细胞变化图(乙)
3、，请回答下列问题：(1)图甲中_点以后表示细胞的传代培养，AB 段可能发生了如图乙_(填序号)所示的_现象，在进行 B 至 C 过程培养前，需要用_处理细胞。(2)动物细胞培养，一般传至_代以内细胞能保持正常的二倍体核型。2(3)为制备单克隆抗体，需将_注射到小鼠体内，以此获取_，同时将该细胞与图乙_(填序号)所示的细胞融合形成杂交瘤细胞，该杂交瘤细胞的特点是_。为筛选能够产生单克隆抗体的杂交瘤细胞，可用_培养基来达到目的。解析：(1)B 点之前是初次培养，称为原代培养；AB 段增殖速度缓慢，是因为发生了图乙中所示的接触抑制现象，若要继续进行传代培养，需要用胰蛋白酶(胶原蛋白酶)处理使组织细胞
4、分散开来。(2)传代培养 10 代以上，细胞的二倍体核型可能会发生改变，10 代以内的细胞仍然保持二倍体核型。(3)制备单克隆抗体时，需要将浆细胞和能无限增殖的细胞(如中发生癌变的瘤细胞)融合，二者融合后形成的杂交瘤细胞，既能像瘤细胞那样无限增殖，又能像浆细胞那样产生专一抗体。需要利用特定的选择培养基将产生单一抗体的杂交瘤细胞筛选出来。答案：(1)B 接触抑制 胰蛋白酶(胶原蛋白酶)(2)10 (3)抗原 浆细胞 既能无限增殖，又能产生专一抗体 选择3(2019湖北六校联合体联考)克隆猪成功率较低，与早期胚胎细胞异常凋亡有关。Bcl2 基因是细胞凋亡抑制基因，用 PCR 技术可以检测该基因转录
5、水平，进而了解该基因与不同胚胎时期细胞凋亡的关系。克隆猪的培育及该基因转录水平检测流程如图。请回答下列问题：(1)图中重组细胞的细胞核来自_细胞，早期胚胎移入受体子宫继续发育，经桑椹胚、囊胚和_胚最终发育为克隆猪。(2)在 PCR 过程中可检测出 cDNA 中 Bcl2 cDNA 的分子数，进而计算总 mRNA 中 Bcl2 mRNA 的分子数，从而反映出 Bcl2 基因的转录水平。图中 X 表示_过程。在 PCR 过程中利用_技术可检测出 cDNA 中 Bcl2 cDNA 的分子数。(3)该过程所涉及的现代生物技术有早期胚胎培养、胚胎移植、_和_。(4)目前使用的供体细胞一般都选择传代 10
6、 代以内的细胞，原因_。解析：(1)图中卵母细胞是受体细胞，良种猪的体细胞是供体细胞提供细胞核，形成重组细胞；早期胚胎发育经过桑椹胚、囊胚和原肠胚，最终形成克隆猪。(2)mRNAcDNA 的过程表示逆转录过程。在 PCR 过程中利用 DNA 分子杂交技术检测 cDNA 中 Bcl2cDNA 的分子数。(3)据图分析，该过程利用的技术有早期胚胎培养、胚胎移植、动物细胞培养和核移植技术。(4)供体细胞一般都选择传代 10 代以内的细胞，原因是传代 10 代以内的细胞一般能保持正常的二倍体核型，10 代后，细胞发生遗传物质改变的概率增加，到 50 代后，细胞发生突变形成了癌细胞。答案：(1)体 原肠
7、(2)逆转录 DNA 分子杂交(3)动物细胞培养 核移植技术(4)10 代以内的细胞保持正常的二倍体核型34(2019河南林州一中调研)单克隆抗体的特点是特异性强、灵敏度高、可以大量制备，已被广泛应用于疾病的诊断和治疗。用 H7N9 病毒制备单克隆抗体的流程如图所示：(1)过程常用的方法是_。(2)向小鼠体内注射抗原蛋白，使小鼠产生_免疫。从小鼠体内分离的细胞是_，细胞应具有的特点是_。(3)体外培养细胞，首先应保证其处于_的环境中，其次需要提供充足的营养和适宜的温度。培养箱充入二氧化碳的作用是_。(4)对于转基因成功的细胞还要进行克隆化培养和_检测。(5)若要预防 H7N9 禽流感，可用图中
8、的_作为疫苗。解析：(1)将重组 DNA 导入动物细胞，常用显微注射法。(2)向小鼠体内注射抗原蛋白，使小鼠产生相应的浆细胞，这是体液免疫，从小鼠体内分离的细胞 是 B 淋巴细胞(浆细胞或已免疫的 B 淋巴细胞)，将无限增殖的基因导入浆细胞，得到的细胞 应具有的特点是既能无限增殖，又能产生特异性抗体。(3)体外培养细胞 ，首先应保证其处于无菌、无毒的环境中，其次需要提供充足的营养和适宜的温度。培养箱充入二氧化碳的作用是维持培养液的 pH。(4)对于转基因成功的细胞 还要进行克隆化培养和(专一)抗体检测。(5)疫苗为毒性弱的抗原，因此要预防 H7N9 禽流感，可以用图中的抗原蛋白作为疫苗。答案：
9、(1)显微注射法 (2)体液(只答特异性不可) B 淋巴细胞(浆细胞或已免疫的 B淋巴细胞) 既能无限增殖，又能产生特异性抗体 (3)无菌、无毒(缺一不可)维持培养液的 pH (4)(专一)抗体 (5)抗原蛋白5(2019河北衡水中学押题检测)细胞的种类不同，特异性表达的蛋白质也不同，如效应 T 细胞可以产生干扰素，乳腺细胞可以分泌乳腺蛋白，膀胱壁细胞可分泌尿血小板溶素膜蛋白。其中效应 T 细胞产生的干扰素(IFN)具有抑制细胞分裂、调节免疫、抗病毒、抗肿瘤等多种作用。请回答下列问题：(1)通过分析干扰素的氨基酸序列，可人工合成编码干扰素的_序列，该序列_(填“是”或“不是”)唯一的。利用 P
10、CR 的方法对人工合成的干扰素基因扩增时，用_方法使 DNA 变性。(2)若将干扰素基因导入癌细胞，在_的环境，一定的营养，适宜的温度和pH，气体环境等条件下，可从体外培养的培养液中源源不断地提取得到干扰素。(3)目的基因在血液中表达的转基因动物叫做血液反应器。由于某些物质进入血液会影响动物的健康，因此血液生物反应器比较适合生产_(填“胰岛素” “抗体”或“干扰素”中的一种或多种)。(4)乳腺生物反应器的原理是外源基因与_的启动子构建成基因表达载体，使干扰素基因在乳腺中表达，通过回收乳汁获得干扰素。(5)膀胱反应器可将干扰素基因插入_基因中，使干扰素分泌到尿液中。与乳腺反应器相比，膀胱反应器的
11、优势表现在_。4解析：(1)目的基因的获取可以采用人工合成的方法，即通过分析干扰素的氨基酸序列，可人工合成编码干扰素的脱氧核苷酸序列，由于一种氨基酸可以由多种密码子决定，因此通过该方法获得的序列不是唯一的。利用 PCR 的方法对人工合成的干扰素基因扩增时，用加热方法使 DNA 变性。(2)若将干扰素基因导入癌细胞，需要采用动物细胞培养技术培养癌细胞，即在无菌、无毒的环境，一定的营养，适宜的温度和 pH，气体环境等条件下，可从体外培养的培养液中源源不断地提取得到干扰素。(3)胰岛素在动物的血液中会降低动物的血糖，对动物有害；而抗体和干扰素属于免疫活性物质，对动物健康有利，因此血液生物反应器比较适
12、合生产抗体、干扰素。(4)乳腺生物反应器的原理是外源基因与乳腺蛋白基因的启动子构建成基因表达载体，使干扰素基因在乳腺中表达，通过回收乳汁获得干扰素。(5)膀胱反应器可将干扰素基因插入尿血小板溶素膜蛋白基因中，使干扰素分泌到尿液中。与乳腺反应器相比，膀胱反应器的优势表现在周期短、不受性别和年龄的限制。答案：(1)脱氧核苷酸 不是 加热(2)无菌、无毒(3)抗体、干扰素(4)乳腺蛋白基因(5)尿血小板溶素膜蛋白 周期短、不受性别和年龄的限制6(2019湖北荆州中学模拟)细胞工程是一门新兴的生物工程技术。在动、植物的育种；药物提取；药物生产等领域的应用十分广泛。利用所学知识回答以下关于细胞工程的相关
13、问题。(1)采用植物细胞工程育种的方法如下：Error! 杂种细胞 愈伤组织 胚状体 处 理 甲 原 生 质 体乙 原 生 质 体 诱 导 筛 选 以胚状体为材料，经过人工薄膜包装得到的人工种子，在适宜条件下同样能够萌发成幼苗，与天然种子培育相比，人工种子的培育具有哪些显著的优点？_(答出两点)。甲、乙原生质体经诱导融合完成的标志是_。利用杂种细胞采用植物组织培养技术可以培育成杂种植株，该技术的核心步骤是_和_。(2)已知西湖龙井含有的茶碱是植物细胞的代谢产物，具有提神、抗衰老功效。可用植物组织培养来实现茶碱的工业化生产。若利用植物组织培养技术，可将龙井茶叶细胞培养到_阶段，然后从_(填细胞器
14、)中提取茶碱。如果想获得脱毒的龙井茶苗，可以切取一定大小的_等进行组织培养。解析：图中细胞工程的流程是植物体细胞杂交过程，不同物种的甲、乙细胞首先经过酶解法去壁处理，得到甲、乙两种原生质体，经物理或者化学方法诱导融合，得到杂种细胞(新生细胞壁形成为标志)，再经过组织培养过程，得到杂种植株。(1)以胚状体为材料，经过人工薄膜包装得到的人工种子，在适宜条件下同样能够萌发成幼苗，与天然种子相比，人工种子具有的优点有：生产不受季节限制、不会出现性状分离、能保持优良品种的遗传特性、方便贮存和运输。甲、乙原生质体经诱导融合完成的标志是形成新的细胞壁。植物组织培养技术步骤包括脱分化和再分化两个核心步骤。(2
15、)若利用植物组织培养技术，可将龙井茶叶细胞培养到愈伤组织阶段，愈伤组织程高度液泡化，然后从其液泡中提取茶碱。茎尖、根尖和芽尖等分生区部位含有少量的病毒或不含病毒，因此如想获得脱毒的龙井茶苗，可以切取一定大小的茎尖(根尖和芽尖也可)等5进行组织培养。答案：(1)生产不受季节、气候和地域的限制；一般不会出现性状分离、能保持优良品种的遗传特性 新细胞壁的形成 脱分化 再分化(2)愈伤组织 液泡 茎尖7药用蛋白人组织纤维溶酶原激活物(htPA)可在转 htPA 基因奶牛的乳汁中获得。如图表示利用奶牛乳汁生产人组织纤维溶酶原激活物的培育过程：(1)htPA 基因 cDNA 可通过克隆筛选获得。构建表达载
16、体时，必须将 htPA 基因 cDNA 与牛乳腺蛋白基因的_等调控组件重组在一起。(2)通过形成图中的过程中，通常取培养_代以内的细胞，原因是_。(3)图中“未受精的卵”是指_的卵母细胞，而不能用普通的体细胞作为受体细胞，原因是“未受精的卵”_。(4)与的遗传性状不一样的原因是_。(5)图示过程中涉及的科学技术有转基因技术、_、_、胚胎移植技术等。解析：(1)真核生物的基因中含有内含子，cDNA 是以 mRNA 为模板逆转录形成的，没有非编码区和内含子序列。牛的乳腺蛋白基因只在泌乳期的乳腺细胞中表达，因此将目的基因与乳腺蛋白基因的启动子等调控组件重组在一起，才使得 htPA 基因的表达产物在乳
17、汁中获得。(2)在现代生物工程技术中，利用的动物细胞通常是培养 10 代以内的细胞，其原因是 10 代以内的细胞能保持正常的二倍体核型。(3)从到的过程中，应用了核移植技术，题图中“未受精的卵”是指核移植技术中的受体细胞，该受体细胞为 M中期的卵母细胞，不用普通体细胞的原因是卵细胞体积大，容易操作，含有促进细胞全能性表达的相关物质。(4)为代孕母牛，是转基因生物(乳腺生物反应器)，与的遗传性状不一样的原因是个体的遗传信息几乎全部来自供体的细胞核。(5)本操作中涉及的科学技术有转基因技术、动物细胞培养技术、体细胞核移植技术和胚胎移植技术等。答案：(1)启动子(2)10 10 代以内的细胞能保持正常的二倍体核型(3)M中期(减数第二次分裂中期) 体积大，易操作，含有促进细胞全能性表达的相关物质(4)个体的遗传信息几乎全部来自供体的细胞核(5)动物细胞培养技术 体细胞核移植技术6
