1、ICS DB51 四川省地方标准 DB51/T 12002011 棉花枯萎病抗性鉴定技术规程 Rule of Resistance Identification for Fusarium Wilt on Cotton 2011 - 01 - 25 发布 2011 - 03 - 01 实施四川省质量技术监督局 发布DB51/T 12002011 I 目 次 前言 II 1 范围 1 2 规范性引用文件 1 3 术语和定义 1 4 供试菌种制备 1 5 田间抗性鉴定方法 2 6 调查及计算方法 2 7 抗病性评价 3 附录A（资料性附录） 病害分级标准及相关计算公式 4 DB51/T 120020
2、11 II 前 言 本标准由四川省农业厅提出并归口。 本标准由四川省质量技术监督局批准。 本标准起草单位：四川省农科院经作所、四川省农业厅 本标准主要起草人：曾华兰、刘宇、叶鹏盛、何炼、刘朝辉、韦树谷 DB51/T 12002011 1 棉花枯萎病抗性鉴定技术规程 1 范围 本标准规定了转基因棉花、杂交棉花和常规棉花枯萎病抗性鉴定方法和抗病性评价标准。 本标准适用于棉花育种、棉花生产和植保单位对转基因棉花、杂交棉花和常规棉花枯萎病抗性鉴定和抗病评价。 本标准适用于四川省棉区。 2 规范性引用文件 下列文件对于本文件的应用是必不可少的。凡是注日期的引用文件，仅所注日期的版本适用于本文件。凡是不注
3、日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适用于本文件。 GB 1103 棉花 细绒棉 GB 4407.1 经济作物种子 纤维类 DB51/336-2003 无公害农产品（或原料）产地环境条件 DB51/337-2003 无公害农产品农药使用准则 DB51/338-2003 无公害农产品肥料使用准则 3 术语和定义 下列术语和定义适用于本标准。 3.1 感病对照品种 the sensiti ve standard variety 感病对照品种为生产上常年枯萎病病情指数达到50左右的品种。 3.2 校正系数(K) correction factor(K) 校正系数（K）为50除以鉴定试验中感
4、病对照品种的实际病情指数。在实际中K值在0.751.25时，鉴定结果方为有效。 3.3 相对病情指数 relative disease index 相对病情指数为供试品种的实际病情指数与校正系数（K）的乘积。 4 供试菌种制备 供试菌种为试验前一年从田间采集的棉花枯萎病病株分离纯化培养获得的枯萎病菌种。用PDA培养DB51/T 12002011 2 基培养斜面菌种，接种在改良的米饭培养基（取大米3g、蔗糖5g，装入500ml三角瓶中，加水200ml，于15磅灭菌30min，自然冷却至室温即成）中，于2528下进行扩大培养7d后，按1:10的比例接种在灭菌的棉籽上，置2528培养15d后，在室内
5、自然晾干即成棉籽载菌体。在接菌前，将棉籽载菌体用水洗下棉花枯萎病菌孢子，用消毒的双层纱布过滤，在显微镜下用血球计数器计数，以孢子含量达到2108spores/g的棉籽载菌体作田间接种用。 5 田间抗性鉴定方法 5.1 鉴定田块选择及田间管理 5.1.1 土壤条件 选择土壤耕层深厚，疏松肥沃，有机质含量丰富，中性或酸性的土壤。土壤环境质量应符合DB51/336-2003的要求。 5.1.2 灌溉条件 鉴定田块有水源保证，排灌设施健全，灌溉水符合DB51/336-2003的要求。 5.1.3 空气质量 空气环境质量应符合DB51/336-2003的要求。 5.1.4 田间管理 田间施肥应符合DB5
6、1/338-2 003 的要求。本条文没有说明的栽培技术，仍按常规技术措施实施。 5.2 抗性鉴定方法 5.2.1 接菌方法 采用土壤接菌法。 5.2.2 接菌时间和接菌量 棉花枯萎病抗性鉴定在棉花播种前土壤接菌，接种量为90g/m2苗床。 5.2.3 田间设计 抗性鉴定在人工接菌的田间病圃中进行。供试品种随机排列，3次重复，每重复播种100粒。播种后用地膜覆盖调节温度、湿度。出苗后每3d一次观察记载并拔除非枯萎病死苗。鉴定田块四周设保护行。棉花苗期和成株期不防治病害，可施用杀虫剂、杀螨剂防治棉蚜、棉铃虫、棉叶螨等害虫，施药应符合DB51/337-2003的要求。 6 调查及计算方法 在棉花苗
7、期和蕾期观察记载发病情况，当感病对照的病情指数达到50左右时，对全部棉株进行病情调查，记载各棉株的发病程度。发病程度的分级标准见附录A1。 根据各品种棉株的发病程度级别，计算病情指数、相对病情指数。计算方法见附录A2。 DB51/T 12002011 3 7 抗病性评价 根据各品种的相对病情指数，按照表1标准评价各品种的抗病性。 表1 棉花枯萎病抗性鉴定评价标准 抗性型 病指（X）范围 免疫（I） X =0.00 高抗（HR） 0.00X5.00 抗（R） 5.00X10.00 中抗（MR） 10.00X20.00 感（S） 20.00X50.00 高感（HS） X50.00 DB51/T 1
8、2002011 4 AA 附 录 A （资料性附录） 病害分级标准及相关计算公式 A.1 棉株发病程度的分级标准 根据棉株的发病程度，分为 0、1、2、3、4 级共5 个级别，其分级标准如下： 0 级：健株，叶片无病状； 1 级：有25% 及以下的叶片表现叶色加深或皱缩，叶脉成黄色网状或叶片变黄、变红变紫等症状； 2 级:26%5O% 的叶片表现病状，有的病株矮化； 3 级：51%75% 的叶片表现病状，有的病株矮缩； 4 级：76 % 及以上的叶片表现病状，严重时叶片焦枯脱落，枝茎枯死，有的整株凋萎死亡。 A.2 病情指数、校正系数、相对病情指数的计算公式 DI=(各级病株数相应病级)调查总株数最高病级( 4) 100 (1) 式中：DI为病情指数 K=50感病 对照品种的实际病情指数 (2) 式中：K为校正系数 X=K鉴定材料的病情指数 .(3) 式中：X为相对病情指数，K为校正系数 _
