1、2011 年浙江大学（生物化学）考研真题及答案解析(总分：82.00，做题时间：90 分钟)一、名词解释题(总题数：10，分数：20.00)1.维生素（分数：2.00）_2.G 蛋白（分数：2.00）_3.卡尔文循环（分数：2.00）_4.必需氨基酸（分数：2.00）_5.线粒体（分数：2.00）_6.终止子（分数：2.00）_7.互补 DNA（分数：2.00）_8.HIV（分数：2.00）_9.原癌基因（分数：2.00）_10.农杆菌（分数：2.00）_二、不定项选择题(总题数：10，分数：20.00)11.不定项选择题下列各题的备选答案中，有一个或多个是符合题意的，请选出所有符合题意的备选
2、答案。（分数：2.00）_12.酶催化反应时，所产生的能量效应是( )。（分数：2.00）A.提高底物的能量水平B.降低反应的自由能C.提高反应的活化自由能D.降低反应的活化自由能13.存厌氧条件下，哪些化合物会存哺乳动物肌肉中积累?( )（分数：2.00）A.葡萄糖B.内酮酸C.乙醇D.乳酸E.乙醛酸14.下列哪些不是三羧酸循环出的催化酶?( )（分数：2.00）A.柠檬酸脱氢酶B.琥珀酸脱氢酶C.苹果酸脱氢酶D.顺乌头酸酶E.NADH 脱氢酶15.SDSAGE 是根据( )来分离蛋白质的。（分数：2.00）A.分子量B.带电性C.疏水性D.分子的构象16.关于转录的叙述，正确的是( )。（
3、分数：2.00）A.转录只是指合成 mRNA 的过程B.转录是一种酶促的核苷酸聚合过程C.逆转录也需要 RNA 聚合酶D.复制中合成 RNA 引物也是转录E.逆转录也是 RNA 的合成过程17.有 5-帽子结构的核酸片段是( )。（分数：2.00）A.原核生物 mRNAB.真核生物 mRNAC.hnRNAD.5SrRNA18.有关 DNA 复制，下列( )说法是不正确的。（分数：2.00）A.DNA 复制需要复制起始位点B.DNA 复制需要 RNA 聚合酶C.DNA 复制是半保留、半连续的D.DNA 复制时不需要连接酶19.有关转座子，以下( )说法是不正确的。（分数：2.00）A.转座子只通
4、过 DNA 复制或直接切除两种方式获得可移片段，重新插入基因B.转座子标签可用于基因克隆C.人类基因组中有 35以上的序列为转座子序列D.有一类转座子是依赖其他转座子的，称为被动转座子20.DNA 复制对，以下哪个说法正确?( )（分数：2.00）A.后随链按 53方向合成B.后随链在前导链完成合成后开始合成C.前导链按 53方向合成D.复制时需要单链结合蛋白三、判断题请判断下列各题正误(总题数：10，分数：20.00)21.(浙江工业大学 2006 年考研试题)自然界中常见的不饱和脂酸多具有反式结构。（分数：2.00）A.正确B.错误22.(浙江工业大学 2006 年考研试题)膜蛋白质最难于
5、完成的运动方式是旋转运动。（分数：2.00）A.正确B.错误23.QTL 指的是数量性状位点，目前还不能克隆 QTL 基因。（分数：2.00）A.正确B.错误24.顺式作用因子是指位于基因上游对基因的表达起到调控作用的 DNA 序列。（分数：2.00）A.正确B.错误25.蛋白质的相互作用可以用酵母单杂交来验证。（分数：2.00）A.正确B.错误26.PCR 反应中镁离子浓度是可以调节的。（分数：2.00）A.正确B.错误27.转基因动植物凶为植入了非自然的基因，因而是不安全的。（分数：2.00）A.正确B.错误28.性染色体上的基因多态性经常被用于进化研究中。（分数：2.00）A.正确B.错
6、误29.转录因子一般带有一个 DNA 结合结构域和一个活性结构域。（分数：2.00）A.正确B.错误30.蛋白磷酸酶催化下游蛋白的去磷酸化，对下游蛋白的功能起调控作用。（分数：2.00）A.正确B.错误四、应用题(总题数：5，分数：10.00)31.以人的胰岛素为例设计一个确定多肽链中的二硫键的位置的实验。（分数：2.00）_32.设计一个可以将样品中的蛋白质、核酸、脂肪和多糖逐步分离的实验。（分数：2.00）_33.测定 DNA 浓度时，分光光度计的波长一般设置为多少?在实验中，我们取了 1 微升的原始 DNA 样品(双链)，加 29 微升超纯水后制成测试样品。在分光光度计上，你得到的光密度
7、值为 0123。请问原始样品的 DNA 浓度是多少?(10D 的双链 DNA=50gmL)（分数：2.00）_34.实验室现有 50 倍的 SSC、10SDS 和 5MNaOH 的母液，请问如何用这些母液配制 250 毫升的 Southern杂交时用到的一种洗液，该洗液含 1 倍的 SSC、025的 SDS 和 10mMNaOH?（分数：2.00）_35.什么是感受态细胞?在实验室制备感受态细胞后，需要做哪些实验检测其性能?（分数：2.00）_五、综合题(总题数：6，分数：12.00)36.什么是宏基因组，宏基因组的目的如何?简述其关键技术要点。（分数：2.00）_37.什么是非编码 RNA?
8、非编码 RNA 主要有哪些功能?什么是核糖开关?（分数：2.00）_38.描述利用埃德曼降解(EdmanDegradation)和质谱进行氨基酸测序的方法和原理。（分数：2.00）_39.描述 K m 值的含义。如何测定一个酶的 K m 值?（分数：2.00）_40.举例描述一条反馈抑制的生化反应途径并说明其抑制的分子机制。（分数：2.00）_41.指出糖酵解、三羧酸循环、氧化磷酸化、光合磷酸化的亚细胞定位及它们的生物学意义。（分数：2.00）_2011 年浙江大学（生物化学）考研真题答案解析(总分：82.00，做题时间：90 分钟)一、名词解释题(总题数：10，分数：20.00)1.维生素（
9、分数：2.00）_正确答案：(正确答案：维生素(vitamin)是机体维持正常功能所必需，但在体内不能合成或合成量很少，必须由食物供给的一组低分子量有机物质。维生素种类多，化学结构差异很大，主要按其溶解性分为：脂溶性维生素，包括维生素 A、维生素 D、维生素 E、维生素 K 等；水溶性维生素，包括 B 族(含维生素B 1 、B 2 、B 4 、B 6 、B 12 、维生素 pp、泛酸、叶酸、生物素)和维生素 C。)解析：2.G 蛋白（分数：2.00）_正确答案：(正确答案：受体与配体结合后即与膜上的偶联蛋白结合，使其释放活性因子，再与效应器发生反应。Lj 于这些偶联蛋白的结构和功能极为类似，且
10、都能结合并水解 GTP，所以通常称 G 蛋白(G-protein)，即鸟苷酸调节蛋白。G 蛋白的种类已多达 40 余种，大多数存在于细胞膜上，由 、 三个不同亚单位构成，总分子量为 100kDa 左右。)解析：3.卡尔文循环（分数：2.00）_正确答案：(正确答案：卡尔文循环又称光合碳循环，是一种类似于 Kerbs cycle 的新陈代谢过程，其可使起动物质以分子的形态进入和离开这循环后发生再生。碳以二氧化碳的形态进入并以糖的形态离开卡尔文循环。卡尔文循环是光合作用中暗反应的一部分。反应场所为叶绿体内的基质。卡尔文循环可分为三个阶段：羧化、还原和二磷酸核酮糖的再生。)解析：4.必需氨基酸（分数
11、：2.00）_正确答案：(正确答案：必需氨基酸(essential amino acid)指的是动物自身不能合成或合成速度不能满足人体需要，必须从食物中摄取的氨基酸。对成人来讲必需氨基酸共有赖氨酸、色氨酸、苯丙氨酸、蛋氨酸、苏氨酸、异亮氨酸、亮氨酸、缬氨酸八种，如果饮食中经常缺少上述氨基酸，可影响健康。对婴儿来说，组氨酸也是必需氨基酸。)解析：5.线粒体（分数：2.00）_正确答案：(正确答案：线粒体(mitochondrion)是真核细胞中由双层高度特化的单位膜围成的细胞器，主要功能是通过氧化磷酸化作用合成 ATP，为细胞各种生理活动提供能量，有细胞“动力工厂”之称。线粒体由两层膜包被，外膜
12、平滑，内膜向内折叠形成嵴，两层膜之间有腔，线粒体中央是基质。基质内含有与三羧酸循环所需的全部酶类，内膜上具有呼吸链酶系及 ATP 酶复合体。另外，线粒体有自身的。DNA 和遗传体系，但线粒体基因组的基因数量有限，因此，线粒体只是一种半自主性的细胞器。)解析：6.终止子（分数：2.00）_正确答案：(正确答案：一种位于 poly(A)位点下游，长度在数百碱基以内的结构。在原核中，发现终止信号存在于 RNA 真核中的聚合酶已经转录过的序列之中。这种提供终止信号的结构就称为终止子。终止子可分为两类。一类不依赖于蛋白质辅因子就能实现终止作用。另一类则依赖蛋白质辅因子才能实现终止作用。这种蛋白质辅因子称
13、为释放因子，通常又称 p 因子。)解析：7.互补 DNA（分数：2.00）_正确答案：(正确答案：互补 DNA(complementary DNA，cDNA)特指与信使核糖核酸(mRNA)分子具有互补碱基序列的单链 DNA 分子。由 mRNA 通过逆转录产生。可用于分子克隆或在分子杂交中作为细胞 DNA 中特殊序列的分子探针。与基因组 DNA 不同，互补 DNA 中不含内含子。)解析：8.HIV（分数：2.00）_正确答案：(正确答案：HIV 即为人类免疫缺陷病毒(Human Immunodeficiency Virus，HIV)，它是一种感染人类免疫系统细胞的慢病毒，属反转录病毒的一种。该病
14、毒破坏人体的免疫能力，导致免疫系统的失去抵抗力，而导致各种疾病及癌症得以在人体内生存，发展到最后，导致艾滋病(获得性免疫缺陷综合征)。)解析：9.原癌基因（分数：2.00）_正确答案：(正确答案：原癌基因(proto-oncogene)是调控细胞生长和增殖的正常细胞基因。当原癌基因的结构或调控区发生变异，基因产物增多或活性增强时，使细胞过度增殖，从而形成肿瘤。)解析：10.农杆菌（分数：2.00）_正确答案：(正确答案：农杆菌(agrobacterium)是生活在植物根的表面，依靠由根组织渗透出来的营养物质生存的一类普遍存在于土壤中的革兰氏阴性细菌，主要有根癌农杆菌和发根农杆菌两种。)解析：二
15、、不定项选择题(总题数：10，分数：20.00)11.不定项选择题下列各题的备选答案中，有一个或多个是符合题意的，请选出所有符合题意的备选答案。（分数：2.00）_解析：12.酶催化反应时，所产生的能量效应是( )。（分数：2.00）A.提高底物的能量水平B.降低反应的自由能C.提高反应的活化自由能D.降低反应的活化自由能 解析：13.存厌氧条件下，哪些化合物会存哺乳动物肌肉中积累?( )（分数：2.00）A.葡萄糖B.内酮酸C.乙醇D.乳酸 E.乙醛酸解析：14.下列哪些不是三羧酸循环出的催化酶?( )（分数：2.00）A.柠檬酸脱氢酶 B.琥珀酸脱氢酶C.苹果酸脱氢酶D.顺乌头酸酶E.NA
16、DH 脱氢酶 解析：15.SDSAGE 是根据( )来分离蛋白质的。（分数：2.00）A.分子量 B.带电性C.疏水性D.分子的构象解析：16.关于转录的叙述，正确的是( )。（分数：2.00）A.转录只是指合成 mRNA 的过程B.转录是一种酶促的核苷酸聚合过程 C.逆转录也需要 RNA 聚合酶D.复制中合成 RNA 引物也是转录E.逆转录也是 RNA 的合成过程解析：17.有 5-帽子结构的核酸片段是( )。（分数：2.00）A.原核生物 mRNAB.真核生物 mRNA C.hnRNAD.5SrRNA解析：18.有关 DNA 复制，下列( )说法是不正确的。（分数：2.00）A.DNA 复
17、制需要复制起始位点B.DNA 复制需要 RNA 聚合酶C.DNA 复制是半保留、半连续的D.DNA 复制时不需要连接酶 解析：19.有关转座子，以下( )说法是不正确的。（分数：2.00）A.转座子只通过 DNA 复制或直接切除两种方式获得可移片段，重新插入基因 B.转座子标签可用于基因克隆C.人类基因组中有 35以上的序列为转座子序列D.有一类转座子是依赖其他转座子的，称为被动转座子解析：20.DNA 复制对，以下哪个说法正确?( )（分数：2.00）A.后随链按 53方向合成 B.后随链在前导链完成合成后开始合成C.前导链按 53方向合成 D.复制时需要单链结合蛋白 解析：三、判断题请判断
18、下列各题正误(总题数：10，分数：20.00)21.(浙江工业大学 2006 年考研试题)自然界中常见的不饱和脂酸多具有反式结构。（分数：2.00）A.正确B.错误 解析：解析：自然界中常见的不饱和脂酸多具有顺式结构。22.(浙江工业大学 2006 年考研试题)膜蛋白质最难于完成的运动方式是旋转运动。（分数：2.00）A.正确B.错误 解析：解析：膜蛋白质最难于完成的运动方式是翻转运动。23.QTL 指的是数量性状位点，目前还不能克隆 QTL 基因。（分数：2.00）A.正确B.错误 解析：解析：QTL 指的是数量性状位点，目前已经能克隆 QTL 基因。24.顺式作用因子是指位于基因上游对基因
19、的表达起到调控作用的 DNA 序列。（分数：2.00）A.正确B.错误 解析：解析：顺式作用因子是指位于基因上游对转录起到调控作用的 DNA 序列。25.蛋白质的相互作用可以用酵母单杂交来验证。（分数：2.00）A.正确B.错误 解析：解析：DNA 和蛋白质的相互作用可以用酵母单杂交来验证。26.PCR 反应中镁离子浓度是可以调节的。（分数：2.00）A.正确 B.错误解析：27.转基因动植物凶为植入了非自然的基因，因而是不安全的。（分数：2.00）A.正确B.错误 解析：解析：转基因动植物是用转基凶技术将具体特殊经济价格的外源基因导入动植物体内，不但表达出人类所需要的优良性状(如抗虫，抗病，
20、抗除草剂，抗倒伏，产肉，产蛋量高)，还可以通过蛋白质重新组合得到新的品种。其安全性还存在争议。28.性染色体上的基因多态性经常被用于进化研究中。（分数：2.00）A.正确 B.错误解析：29.转录因子一般带有一个 DNA 结合结构域和一个活性结构域。（分数：2.00）A.正确B.错误 解析：解析：转录因子一般带有一个 DNA 结合结构域和若干个活性结构域。30.蛋白磷酸酶催化下游蛋白的去磷酸化，对下游蛋白的功能起调控作用。（分数：2.00）A.正确 B.错误解析：四、应用题(总题数：5，分数：10.00)31.以人的胰岛素为例设计一个确定多肽链中的二硫键的位置的实验。（分数：2.00）_正确答
21、案：(正确答案：首先，对蛋白质全部氨基酸测序；然后，用胃蛋白酶水解胰岛素，得到还连着二硫键的多肽产物。 采用对角线电泳分离多肽产物确定二硫键的位置。先进行第一向电泳，将水解产物点在滤纸上，由于不同多肽段的片段大小和电荷的不同，在电泳过程中被分离开。再用甲酸蒸气使肽段的二硫键断裂。再进行第二向电泳，将滤纸旋转 90，其他条件与第一向电泳相同。选取偏离对角线的产物(多肽或寡肽)，即含有二硫键的片段，将其分离出来，分别测序，对照已测的全部氨基酸序列，找出二硫键位置。)解析：32.设计一个可以将样品中的蛋白质、核酸、脂肪和多糖逐步分离的实验。（分数：2.00）_正确答案：(正确答案：(1)使用分液法将
22、样品中的脂肪分离出来。 先用普通漏斗把要分离的液体注入分液漏斗内，加塞。然后将分液漏斗静置在漏斗架上或铁架台的铁环中。待液体分成两层后，旋开旋塞，使下层液体从漏斗管流下。当下层液体流尽时，立即关闭旋塞，然后再从漏斗上口把上层液体倾倒出来。收集到的上层液体即为脂肪。下层液体继续分离提纯。 (2)使用盐析法将蛋白质分离出来。 中性盐对蛋白质的溶解度有显著影响，一般在低盐浓度下随着盐浓度升高，蛋白质的溶解度增加，此称盐溶；当盐浓度继续升高时，蛋白质的溶解度不同程度下降并先后析出，这种现象称盐析。将大量盐加到蛋白质溶液中，高浓度的盐离子有很强的水化力，可夺取蛋白质分子的水化层，使之“失水”，于是蛋白质
23、胶粒凝结并沉淀析出。 故在待分离液体中加入大量的盐直至蛋白质析出。得到的上清液待用，得到的蛋白质沉淀使用透析法纯化。 蛋白质在用盐析沉淀分离后，混有部分盐，可以采用透析法将蛋白质中的盐除去，即把蛋白质溶液装入透析袋内，用缓冲液进行透析，并不断的更换缓冲液，直至把蛋白中的盐除去得到纯化的蛋白。 (3)上一步骤中，液体里含有大量的盐，核酸可以与盐反应生成核酸盐，核酸盐可被有机溶液沉淀。在剩余的待分离液体中加入有机溶液，离心，得到的沉淀中含有核酸盐，上清液中含有多糖。 用 70的乙醇洗涤核酸盐沉淀，可以除去多余的盐分，得到一定纯度的核酸。 (4)使用透析法提纯上清液中的多糖，即可得到一定纯度的多糖。
24、)解析：33.测定 DNA 浓度时，分光光度计的波长一般设置为多少?在实验中，我们取了 1 微升的原始 DNA 样品(双链)，加 29 微升超纯水后制成测试样品。在分光光度计上，你得到的光密度值为 0123。请问原始样品的 DNA 浓度是多少?(10D 的双链 DNA=50gmL)（分数：2.00）_正确答案：(正确答案：测定 DNA 浓度时，分光光度计的波长一般设置为 260nm。DNA 样品的浓度(g/l)=OD 260 x 稀释倍数501000，所以依题意得，原始样品的 DNA 浓度为： 012330501000=01845(g/l)解析：34.实验室现有 50 倍的 SSC、10SDS
25、 和 5MNaOH 的母液，请问如何用这些母液配制 250 毫升的 Southern杂交时用到的一种洗液，该洗液含 1 倍的 SSC、025的 SDS 和 10mMNaOH?（分数：2.00）_正确答案：(正确答案：取一个烧杯，加入 5 毫升 50 倍的 SSC，625 毫升 10SDS，05 毫升的 5 M NaOH，加入少量蒸馏水稀释混合液，将混合液转移入 250 毫升的容量瓶中，用洗瓶吹洗烧杯壁两到三次，将洗涤后的蒸馏水一并转移入容量瓶中，定容至 250 毫升即可。)解析：35.什么是感受态细胞?在实验室制备感受态细胞后，需要做哪些实验检测其性能?（分数：2.00）_正确答案：(正确答案
26、：细胞处于能够吸收外源 DNA 的状态称为感受态，经特殊处理后处于此状态的细胞称为感受态细胞。 为保证宿主细胞是感受态细胞，而且无污染，需作 3 个试验。 取 l 管分装的感受态细胞，不作转化(比如不加 DNA，但和实验样品平行处理)，将等量的细菌涂布到含抗菌素和不含抗菌素的平板上。含抗菌素的平板应无菌落生长，生长有菌落就表明污染了质粒或抗菌素失效，为区别可从生长的菌落中提取质粒，以鉴别原因。不含抗菌素的平板上应生长了许多菌落，甚至菌落群，反之表明细菌无活力。第 3 个实验是确定感受态细胞的转化效率。将一定量的完整质粒转化到感受态细胞中，取一部分转化的细菌，涂布到选择培养基上，可用菌落生长单位
27、g DNA，按下面的方法计算感受态细胞的转化效率： 用 01ng 完整的质粒DNA 转化 100l 的感受态细胞，向转化反应液中加入 900l 培养液(01ng1ml)，让细菌恢复一小段时间(1 小时)。将转化反应用培养液作 1：0 的稀释(001ngml)，取其中 100l 的稀释液来涂布(0001ng DNA/100l)。如能豸犬得 200 个克隆，转化效率是 210 8 cfu/g DNA，计算方法如下： 200cfu0001ng=210 5 cfung=210 8 cfug DNA 转化效率110 6 cfugg DNA 可满足普通的亚克隆实验；110 7 cfug DNA 用于作更复
28、杂的亚克隆，有限量的 DNA 的转化，T-克隆实验；构建文库和突变要求用的转化效率110 8 cfug DNA。)解析：五、综合题(总题数：6，分数：12.00)36.什么是宏基因组，宏基因组的目的如何?简述其关键技术要点。（分数：2.00）_正确答案：(正确答案：(1)广义宏基因组是指特定环境下所有生物遗传物质的总和，它决定了生物群体的生命现象。它是以生态环境中全部 DNA 作为研究对象，通过克隆、异源表达来筛选有用基因及其产物，研究其功能和彼此之间的关系和相互作用，并揭示其规律。 狭义宏基因组学则以生态环境中全部细菌和真菌基因组 DNA 作为研究对象，它不是采用传统的培养微生物的基因组，包
29、含了可培养和不能培养的微生物的基因，通过克隆、异源表达来筛选有用基因及其产物，研究其功能和彼此之间的关系和相互作用，并揭示其规律。 特定生物种基因组研究使人们的认识单元实现了从单一基因到基因集合的转变，宏基因组研究将使人们摆脱物种界限，揭示更高更复杂层次上的生命运动规律，并能有效的开发利用基因资源，更深入的了解物种多样性。 (2)宏基因组学是一种以环境样品中的微生物群体基因组为研究对象，以功能基因筛选和测序分析为研究手段，以微生物多样性、种群结构、进化关系、功能活性、相互协作关系及与环境之间的关系为研究目的的新的微生物研究方法。 基因组学的研究过程，一般包括从环境样品中提取基因组 DNA，克隆
30、。DNA 到合适的载体，导入宿主菌体，筛选目的克隆等 4 个步骤。在基因组学研究领域中，其研究目标通常是测定单一物种的基因组序列；而在宏基因组学中，则是要测定由多种微生物组成的复杂群体的混合基因组序列。 1)样品总 DNA 的提取及基因或基因组 DNA 的富集。提取的样品 DNA 必须可以代表特定环境中微生物的种类，尽可能代表自然状态下的微生物原貌，获得高质量环境样品中的总 DNA 是宏基因组文库构建的关键之一。要采用合适的方法，既要尽可能地完全抽提出环境样品中的 DNA，又要保持较大的片段以获得完整的目的基因或基因簇。 2)宏基因组文库的建立。宏基因组文库的构建策略取决于研究的整体目标。偏重
31、于低拷贝、低丰度基因还是高拷贝、高丰度基因要取决于研究的目的是单个基因或基因产物还是整个操纵子及编码不同代谢途径的基因簇。基因文库的建立过程中需要选择合适的克隆载体和宿主菌株。 3)宏基因组文库的筛选。由于环境基因组的高度复杂性，需要通过高通量和高灵敏度的方法来筛选和鉴定文库中的有用基因。筛选技术大致可分为四类：基于核酸序列差异分析；基于目的克隆功能的特殊代谢活性；基于底物诱导基因的表达；基于包括稳定性同位素和荧光原位杂交在内的其他技术。 当前宏基因组学技术中最大缺陷是文库的表达问题，模式微生物并不能把所有的宏基因组 DNA表达出来，降低了表型筛选的效率。宏基因组表型筛选的效率很低，从上万个克
32、隆中一般只能筛选到几个有用的克隆。这表明宏基因组学的提出虽然带来观念上极大的突破，但受限于技术瓶颈，还未在实际工作中产生理论上可能带来的巨大成果。但有理由相信，随着分子生物学技术的发展，宏基因组学研究必然成为今后若干年自然科学研究的一个重要领域。)解析：37.什么是非编码 RNA?非编码 RNA 主要有哪些功能?什么是核糖开关?（分数：2.00）_正确答案：(正确答案：(1)非编码 RNA 是指不编码蛋白质的 RNA，包括 rRNA、tRNA、snRNA、snoRNA 和microRNA 等多种已知功能的 RNA，还包括未知功能的 RNA。这些 RNA 的共同特点是都能从基因组上转录而来，但是
33、不翻译成蛋白，在 RNA 水平上就能行使各自的生物学功能。 (2)现已发现非编码 RNA 在细胞中参与了多项重要的生命活动，其中包括转录调控、RNA 的剪切和修饰、mRNA 的稳定和翻译、蛋白质的稳定和转运、染色体的形成和结构稳定、细胞的发育等方面。 1)影响染色体的结构。在昆虫和哺乳动物细胞中发现的序列很长的非编码 RNA，参与了基因沉默和染色体结构的改变。 2)调控转录。非编码 RNA 通过与转录因子的相互作用而调控转录。例如，在神经元分化中起重要作用的 smRNA，与转录因子 NRSFREST相互作用，启动神经元特异基因表达。 3)参与 RNA 的加工、修饰。例如，核酶主要是通过 RNA
34、 的自我裂解、自我剪接等而实现转录后加工的。 4)参与 mRNA 的稳定和翻译调控过程。例如在 RNA 干扰作用中的siRNA 是一类长度为 2125 nt 的双链 RNA，它能与靶 mRNA 互补配对，结合后导致 mRNA 降解，使基因沉默。还发现 miRNA 也有类似于 RNAi 的机制，能够剪切靶 mRNA。 5)影响蛋白质的稳定和转运。tmRNA 有一个同 tRNA 样的区域和 mRNA 样的区域复杂结构，目前仅在细菌中发现，但在细菌中并不普遍存在。tmRNA既有转运氨基酸的 tRNA 活性，也有编码多肽链的 mRNA 活性。tmRNA 可识别核糖体干扰翻译或使阅读 mRNA停止(核糖
35、体滑动延宕)。 6)在植物适应环境胁迫中的调拉作用。植物的非编码 RNA 在对非生物胁迫的适应性反应中有重要作用，这种作用首先用 miRNA 生物信息学、靶基因预测和 miRNA 克隆的方法，通过拟南芥在非生物胁迫下释放新的 miRNA 而得以证实。在拟南芥进行干旱、盐分、冷冻和 ABA 等胁迫诱导的材料中，得到了 26 种新的 miRNA 和 102 种新的 sRNA，说明它们可能在应对上述不良环境中发挥作用。如生长在正常条件下的拟南芥细胞中没有 miR395，而在低硫的胁迫下被诱导；同样，miR399 是在低磷胁迫诱导下产生的。 7)在细胞发育和分化中的调控作用。研究发现许多 miRNA
36、在生物体内有着时序性或组织特异性表达，说明它们在生物的发育和组织分化中可能有着重要的调控作用。对细胞分化的研究证实，miR-181 和 miR-146 分别能促进造血干细胞向 B 细胞与 T 细胞分化；细胞发育的研究说明，Lsy-6 miRNA 参与了调控线虫左右神经元的不对称性发育，miR-166 则调控叶的不对称性发育。用生物信息学的方法分析miRNA 调控的靶蛋白，发现 miRNA 还可涉及到神经元的发育，信号通路的调控等方面。 8)与肿瘤的发生发展的关系。非编码 RNA 由于能够调控细胞的生长与分化，因此，被认为与癌症的发生发展有关。 (3)核糖开关是一类自然界中天然存在的适配子，通过
37、结合小分子代谢物调控基 L 大的表达。它位于特定的mRNA 非编码区，可以不依赖任何蛋白质因子而直接结合代谢物并发生构象变化，在转录和翻译水平上参与调控生物的基本代谢途径。)解析：38.描述利用埃德曼降解(EdmanDegradation)和质谱进行氨基酸测序的方法和原理。（分数：2.00）_正确答案：(正确答案：(1)埃德曼降解(Edman 降解)法。1950 年 PEdman 公布了一项新的氨基酸序列的测定技术，即运用上述苯异硫氰酸酯与氨基酸的反应(Edman 反应)。这种技术每次都只是从蛋白质的 N 端解离和鉴定一个氨基酸残基，这是一项使蛋白质序列分析革命化的技术。1967 年 Edman 和 Begg 建成了多肽氨基酸序列分析仪。Edman 降解测序主要涉及耦联、水解、萃取和转换等 4 个过程。 1)耦联：使用苯异硫氰酸酯(PITC)在 pH 90 的碱性条件下对蛋白质或多肽进行处理，PITC 与肽链的 N-端的氨基酸残基反应，形成苯氨基硫甲酰
