1、I C S 65.020 .20 B 05 河 北 省 地 方 标 准 DB 1 3 D B 1 3 / T 1 3 2 0 . 8 2 0 1 0 中药材 种 子质量标 准 第 8 部分 ： 牛 膝 2 0 1 0 - 1 1 - 1 5 发布 2 0 1 0 - 1 1 - 2 5 实施 河 北 省 质 量 技 术 监 督 局 发 布 D B 13 / T 1 320 . 8 2 010 I 前 言 本标准 按 照 G B / T 1.1 200 9 给出 的规 则起 草 。 D B 13 / T 13 20 中药 材种 子 质量标 准 分 为 10 个部 分 ： 第 1 部 分 ： 紫苏
2、 ； 第 2 部 分 ： 菘蓝 ； 第 3 部 分 ： 桔梗 ； 第 4 部 分 ： 荆芥 ； 第 5 部 分 ： 瞿麦 ； 第 6 部 分 ： 黄芪 ； 第 7 部 分 ： 射干 ； 第 8 部 分 ： 牛膝 ； 第 9 部 分 ： 白芷 ； 第 10 部分 ： 防 风 。 本部分 为 D B 13 / T 13 20 的 第 8 部 分 。 本 部分 由河 北省 农林 科学 院提出 。 本 部分 起草 单位 ： 河 北省 农林科 学院 经济 作物 研究 所 ， 河 北省 种子 管理 总站 。 本 部分 主 要 起草 人 ： 刘铭 、 周巧 梅 、 张 保 起 、 张志 刚 、 田伟 、 温
3、 春秀 、 马 立刚 、 谢晓亮 、 刘灵娣 。 D B 13 / T 1 320 . 8 2 010 1 中药材 种 子质量 标准 第 8 部分 ： 牛 膝 1 范围 本 部分 规定 了 牛 膝 （ A c hy r ant hes bi dent at a B l .） 种 子 质量要 求 、 检验 方法 、 检 验规则 。 本 部分 适用 于 牛 膝 种 子的 生产和 销售 。 2 规范性 引用 文件 下列文 件对 于本 文件 的应 用是必 不可 少的 。 凡是 注 日期的 引用 文件 ， 仅注 日 期的版 本适 用于本 文件 。 凡 是不 注日 期的引 用文 件 ， 其最 新版 本 （
4、 包 括所 有的 修改 单 ） 适用于 本 文 件 。 G B / T 3543 .2 农作 物种 子 检验规 程扦 样 G B / T 3543 .3 农作 物种 子 检验规 程净 度分 析 G B / T 3543 .4 农作 物种 子 检验规 程发 芽试 验 G B / T 3543 . 5 农作 物种 子 检验规 程 真 实性 和品 种纯 度鉴定 G B / T 3543 .6 农作 物种 子 检验规 程水 分测 定 3 质量 要 求 牛膝 种 子质 量 应 符合 表 1 的 要求 。 表 1 项目 指标 纯度 （ ）， 9 5 净度 （ ）， 9 0 发芽率 （ ）， 8 5 水分
5、 ）， 1 1 4 检 验方 法 4 .1 扦样 4 .1.1 种 子批 的最 大重 量 为 1 000 kg 。 4 .1.2 送 验样 品的 最小 重 量为 3 0 0 g 。 4 .1.3 水 分测 定 试 样 最 小 重量为 50 g ； 净 度分 析试 样最小 重量 为 5 0 g ； 其他 种子计 数试 样 最小重 量为 50 g 。 4 .1. 4 其 余部 分按 G B / T 3543.2 执行 。 D B 13 / T 1 320 . 8 2 010 2 4 . 2 净度 分析 按 G B / T 35 43. 3 执 行 。 4 . 3 发芽 试验 发芽床 采用 纸间
6、 B P ）， 置床培 养温 度 2 0 25 ， 初次 记数 天 数 5 d ， 末次 记数天 数 10 d ， 其余 部分 按 G B / T 35 43.4 执行 。 4 . 4 真实 性和 品种 纯度 鉴 定 按 G B / T 35 43. 5 执 行 。 4 . 5 水分 测定 按 G B / T 35 43. 6 执 行 。 5 检 验规 则 以 种子 的上 述指 标为 质量检 验依 据 ， 若其 中一 项达不 到指 标的 即为 不合 格种子 。 1 中药材种子质量标准 编制的主要依据 第 8 部分 ： 牛 膝 牛膝是河 北省 知 名 药材之一 ， 为 苋 科 多年生草 本植物
7、 牛 膝 ( A ch y r a n t h e s b i d e n t a t a B l . ) 的干 燥 根 ， 味 苦 、 甘 、 酸 ， 性 平 ， 有 逐瘀通 经 、 补肝肾 、 强筋 骨 、 利尿通淋 、 引血 下 行 的功能 ， 用于经 闭 、 痛经 、 腰膝酸痛 、 筋骨 无 力 、 淋证 、 水肿 等 症 （ 国家 药典委 员 会 ， 2 0 1 0 ） 。 目前 ， 我国 未 对 药 材生产中 所用的 牛 膝种子 制 定统一 的 标准 ， 生产用 种质量优 劣不等 ， 种子质量 监督和 市 场监督缺 乏判定 依 据 ， 种 子质量 纠 纷责任 划分与 调 处难度大
8、 我们 通 过 对各地 牛膝种 子 的实验调 查 、 查阅国内 外有关 文 献资料和 生产实 践 相结合 制 定本标 准 。 标准编制 的 主要依据 如下 ： 1 、 种子真实性鉴定 采用 G B/ T 3 5 4 3 . 5 中 6 . 2 . 1 形态 鉴定 法 ， 通过对 种子形 态 、 大小 、 表面特征 和种子 颜 色的鉴定 能够比 较 准确地鉴 别物种 的 真伪 。 鉴别 依 据如下 ： 种子常 附 带黄色苞 片及小 苞 片 ， 内 有坚硬 、 褐 色长圆形 的胞 果 ， 上方有宿 存的花 柱 ， 胞果内有 种子 1 粒 ； 种子长圆 形 ， 长 约 2 . 5 m m ， 宽约
9、 1 . 5 m m ， 黄褐色 ； 种胚 紧靠种 皮 ， 外胚乳 肉质 ， 在 种胚的内 方 。 结论 ： 本标准 将 牛膝 ( A c h yr a n t h e s b i d e n t a t a B l . ) 种子 的纯度 确定 为 不 低 于 9 5 % 。 2 、 种子净度分析 （ 1 ） 实验 材料 牛 膝 种子 材 料 2 0 份 ， 其中 1 6 份 购于 各药 材 种子市 场 ， 4 份 来自于 药材 基地 ， 现 保 存 于河 北省农林 科学院 药 用植物 研 究 中心 “ 低 温 种质 资 源库 ” 中 。 2 （ 2 ） 实验 方法 先将样品 充分混 合 ，
10、随机从中取 两份 试样 ， 每份 1 5 g ， 放 在天平 上称重 ， 精确到 0 . 0 1 g 。 然后 将废种 子 、 其它植 物种子 及 杂质与牛 膝 种子分离 ， 分离 后 分别称重 ， 计算 种 子的净度 。 两份 试 样平均值 的误 差允许范 围为 5 % ， 不超过 5 % 的 ， 则其 平均值就 是该样 品 的 净度 ； 超 过 5 % 的 ， 则 称 取 第 三份试样 测量 ， 取 平均值作 为该样 的 净度 。 （ 3 ） 实验 结果 通过对不 同来源 的 2 0 份种子 进行了 净 度分析 ， 牛膝种 子 的净度 在 7 4 % 9 6 % 之间 ， 其中一半 以上的
11、 种子净度 大于 9 0 % 。 结论 ： 本标 准将牛 膝 种子的净度 确定 为 不低于 9 0 % 。 图 1 牛膝种子净度调查结果 3 、 种子含水量测定 （ 1 ） 实验 材料 牛 膝 种子 材 料 2 0 份 ， 其中 1 5 份 购于 各药 材 种子市 场 ， 5 份 采 自于 药材 基地 ， 现 保 存 于河 北省农林 科学院 药 用植物 研 究 中心 “ 低 温 种质 资 源库 ” 中 。 0.0 0% 20. 00% 40. 00% 60. 00% 80. 00% 100 .00 % 120 .00 % 1 3 5 7 9 11 13 15 17 19 样品 数 （ 份 ）
12、净度 （ % ） 3 （ 2 ） 实验 方法 先将样品 盒预先 烘 干 、 冷却 、 称 重 ， 并 记下盒号 ， 取得 牛 膝 种子 试样两份 ， 每份 4 . 5 5 . 0 g ， 将试样 放 入 预先烘 干和称 重 过的样品 盒 内 ， 再称 重 （ 精 确 至 0 . 0 0 1 g ） 。 使 烘箱 通电预热至 1 1 0 1 1 5 ， 将样 品摊平放 入烘箱 内 的上层 ， 样 品盒距 温度计的 水银球约 2 . 5 cm 处 ， 迅 速关闭烘 箱门 ， 使箱 温在 5 1 0 m i n 内回升至 1 0 3 时 开始 计算时间 ， 烘 8 h 。 戴上手 套盖 好盒盖 (
13、在 箱内加 盖 ) ， 取出 后放入 干燥 器内冷却 至 室温 ， 约 3 0 4 5 m i n 后再称 重 。 （ 3 ） 实验 结果 通过对不 同来源 的 2 0 份牛膝 种子进 行 了水分测 定 ， 牛 膝 种子的 含水量集 中在 7 % 1 1 % 之间 。 结 论 ： 本标 准将牛膝 种子的含 水量 确 定为 不 高于 1 1 % 。 图 2 牛膝种子含水量调查结果 4 、 温度对种子萌发的影响 （ 1 ） 实 验 材 料 牛膝 种子 采 于 安国 药材 基地 ， 现 保存 于河 北省农林 科学院药 用植物 研 究中心 “ 低温 种 质 资源库 ” 中 。 牛膝 0.0 0% 1.
14、0 0% 2.0 0% 3.0 0% 4.0 0% 5.0 0% 6.0 0% 7.0 0% 8.0 0% 9.0 0% 10. 00% 11. 00% 1 2 3 4 5 6 7 8 9 1 0 1 1 1 2 1 3 1 4 1 5 1 6 1 7 1 8 1 9 2 0 样品 （ 份 ） 水 分 （ % ） 4 （ 2 ） 仪器设 备 智能人工 气候培 养 箱 （ Z RX 2 5 8 D ） 、 冰箱 、 培养 皿 、 滤纸 。 （ 3 ） 实验 方法 发 芽 温 度分 别设 为 1 5 、 2 0 、 2 5 、 3 0 四 个 恒 温处 理 。 测定 采 用 培养皿纸 床 ， 4
15、次重 复 ， 每重复 1 0 0 粒 。 发芽开始 后 ， 每 天记录萌 发 的正常幼 苗数直 至 无萌发种 子出现 为 止 ， 根据 情况加 水 ， 保持湿 润 ， 再将不正 常幼苗 和 死种子拣 出并记 录 ， 实验过程 中出现 的 严重霉烂 的 种子随时 拣出并 加 以记录 。 发 芽标准 以 新鲜胚根 伸出超 过 种子长度 以 上为发芽 ， 发芽 率 的计算公 式如下 ： 发芽率 = （ 发 芽种 子总数 / 供试 种子总 数 ） 1 0 0 % 。 （ 4 ） 实验 结果 牛膝 种子 在 2 5 条件下 发芽最 高 ， 为 9 1 % ， 1 5 条 件下发芽 最 低 ， 为 8 1
16、 % 。 从发 芽天数来 看 ， 1 5 条件下发 芽时间 最 长 ， 为 1 4 天 ； 2 0 与 2 5 条件下 发芽时间 最短 ， 为 1 0 天 ， 且 两温度 条件 下发芽 率 差异不明 显 。 结 论 ： 从种子 萌发的速度和天数 来看 ， 牛膝 种子的 适宜 发芽温 度为 2 0 2 5 。 表 1 不同 温度对 牛膝 种子发芽的影响 温度 （ ） 发芽时间 （ 天 ） 发芽率 （ % ） 15 1 4 81 20 1 0 89 25 10 91 30 1 2 84 5 5 、 牛膝种子的发芽实验 （ 1 ） 实验材料 牛 膝 种子材 料 2 0 份 ， 其中 1 6 份购于
17、各药 材种子市 场 ； 4 份 采自于 药材 基地 ， 基地 种子采 后晾干 ， 经 简单风 选 ； 现保 存 于河北省 农林科 学 院药用植 物研究 中 心 “ 低温 种质资 源 库 ” 中 。 种 子处理 ： 根 据当前种 植习惯 ， 牛膝种子 播种前 不 经任何处 理 ； 本实验用 的牛膝 种 子也未经 处理 ， 直 接用于发 芽试验 。 （ 2 ） 仪器设 备 智能人工 气候培 养 箱 （ Z RX 2 5 8 D ） 、 培养皿 、 滤 纸 。 （ 3 ） 实验 方法 测定采用 培养皿 纸 床 ， 4 次重 复 ， 每重 复 1 0 0 粒 ， 发芽温 度 为 2 5 。 发芽开始
18、后 ， 每 天 记录萌发 的正常 幼 苗数至第 1 0 天为 止 ， 根据情 况 加水 ， 保持湿润 ， 再将不正 常幼苗 和 死种子拣 出并记 录 ， 实验 过程中 出现的严 重霉烂 的 种子随时 拣出并 加 以记录 。 发 芽标准 以 新鲜胚根 伸 出超过种 子长度 以 上为发芽 ， 发芽 率 的计算公 式如下 ： 发芽率 = (1 0 天 发 芽种子总 数 /供试种 子总数 ) 1 0 0 % （ 4 ） 实验 结果 通过对 1 6 份来自 市 场和 4 份采自 基地的 药材种子 进行发 芽 试验 ， 结果表明 ， 采自 药 材基地的 牛膝种 子 发芽整齐 ， 发芽 率 在 8 9 %
19、9 6 % 之间 ； 市场 上种子 的发芽率 差别很 大 ， 发芽率在 0 % 9 8 % 之间 ， 其中 发芽率大 于 8 5 % 的 种子占 3 7 . 5 % 。 根 据 基地种子 发芽试 验 结果 ， 参 照 市场种子 发芽情 况 ， 本标准将牛膝 种子的发 芽率确定为不小于 8 5 % 。 表 2 不同来源 牛膝 种子的发芽情况 6 序 号 发芽率 （ % ） 序 号 发芽率 （ % ） 1 96 1 1 17 2 9 1 12 0 3 94 13 98 4 89 14 85 5 82 15 78 6 64 16 52 7 41 17 10 8 95 18 86 9 88 19 92 10 0 20 80 注 ： 1 - 4 采 自药材基地 ， 5 - 20 号来自药材种子市场 。 参 考文 献 ： 1 陈 瑛 实用中药种子技术手册 M 北京 ： 人民卫生出版社 ， 1999 ： 13 6 2 G B 4404.1 2008 ， 粮食作物种子 第一部分 ： 禾谷类 s 3 国家药典委员会 中华人民共和国药典 M 2010 年版 （ 一部 ） ， 北京 ： 中国医药科技出版社 ， 2010 ： 67 6 8 4 李娜 ， 邵爱娟 ， 袁 媛 ， 等 不同产地牛膝种 子生活力及形态的比较研究 J 中 国中药杂志 ， 200 8 ， 33 （ 9 ） ： 1001 1003
