1、中华人民共和国国家标准生物质量六六六和滴滴涕的测定气相色谱法发布实施国家环境保护局发布中华人民共和国国家标准生物质量六六六和滴滴涕的测定气相色谱法国家环境保护局批准实施适用范围本标准适用于生物动物如禽畜鱼蚯蚓植物如粮食水果蔬菜茶藕中六六六滴滴涕的分析本法采用丙酮石油醚提取以浓硫酸净化用带电子捕获检测器的气相色谱仪测定本方法的最低检测浓度为试剂和材料载气氮气纯度经去氧管过滤氧的含量小于氢的含量小于配制标准样品和试样预处理时使用的试剂和材料使用的试剂系分析纯有机溶剂经重蒸浓缩倍用气谱测定无干扰峰色谱标准样品六六六六六六六六六六六六含量色谱纯石油醚沸程丙酮异辛烷苯优级纯浓硫酸密度为发烟硫酸高氯酸优级
2、纯冰乙酸无水硫酸钠在烘箱中烘烤备用硫酸钠溶液硅藻土试剂级三氯甲烷助滤剂脱脂棉或玻璃棉用丙酮回流取出晾干后备用消化液将高氯酸及冰乙酸等体积混合制备色谱柱时使用的试剂和材料色谱柱和填充物涂渍固定液所用溶剂三氯甲烷仪器主要仪器带电子捕获检测器的气相色谱仪控制载气的压力表及流量计进样器全玻璃系统进样器记录器与仪器相匹配的记录仪检测器类型电子捕获检测器器件的特征可采用放射源或高温放射源检测器极化电压可采用直流电源或脉冲电源色谱柱色谱柱数量支色谱柱特征材料硬质玻璃尺寸长内径色谱柱类型螺旋状填充柱色谱柱预处理经水冲洗后在玻璃柱管内注满热洗液浸泡然后用水冲洗至中性再用蒸馏水冲洗烘干后进行硅烷化处理将的二氯二甲
3、基硅烷甲醇溶液注满玻璃柱管浸泡然后用甲醇清洗至中性烘干备用填充物载体或者目固定液甲基硅酮最高使用温度或三氯丙基甲基硅酮最高使用温度或液相载荷为或为涂渍固定液的方法根据担体的重量称取一定量的固定液溶在三氯甲烷中待完全溶解后倒入盛有担体的烧杯中再向其中加入三氯甲烷至液面高出摇匀后浸然后在红外灯下将溶剂挥发干或在旋转蒸发器上慢速蒸干再置于烘箱中放置后备用色谱柱的填充方法将色谱柱的一端接检测器用硅烷化玻璃塞住接真空泵另一端接一漏斗开动真空泵后将固定相徐徐倾入色谱柱内并轻轻拍打色谱柱使固定相在色谱柱内填充紧密至固定相不再抽入柱内为止装填完毕后用硅烷化玻璃棉塞住色谱柱另一端色谱柱的老化将填充好的色谱柱进口
4、按正常接在汽化室上出口空着不接检测器先用较低载气流速在略高于实际使用温度而不超过固定液的使用温度下处理然后逐渐提高载气流速老化再降低至使用温度接上检测器后如基线稳定即可使用柱效能在给定条件色谱柱总分离效能即分离度要求不小于试样预处理时使用的仪器样品瓶适宜的玻璃磨口瓶蒸发浓缩器脂肪提取器水浴锅振荡器万能粉碎机组织捣碎机真空泵玻璃器皿分液漏斗具塞锥型瓶抽滤瓶直径布氏漏斗直径长玻璃层析柱量筒平底烧瓶刻度试管经标定研钵微量注射器离心机样品样品性质样品名称禽畜鸟兽肉鱼肉蚯蚓粮食果蔬茶藕样品状态固体样品的稳定性在各种样品中六六六滴滴涕化学性质稳定样品的采集禽畜包括鸟兽样家禽取只杀好的从脊背切开取其整体一半
5、去骨骼然后捣碎混匀备用家畜根据测试目的取具有代表性的样品捣碎混匀备用鱼样去鳞鳍内脏沿脊背纵剖后取其二分之一或数分之一以下者取整体剔刺用滤纸吸干表面水取条切碎混匀备用蚯蚓样从田间采集蚯蚓条在玻璃器皿中自然排泥天皿底垫滤纸加水湿润然后洗净用滤纸吸干表面水取条切碎混匀备用粮食样采取具代表性的小麦稻米玉米等样品粉碎过目筛混匀装入样品瓶备用果蔬藕样取其代表性的新鲜果蔬藕的可食部位切碎取测水分含量其余供试验用茶叶样鲜样同干样同样品的保存生物样品采集后应尽快分析如暂不分析可保存在冷冻箱中试样的预处理提取粮食样品的提取法准确称取样品置于具塞三角瓶中加入石油醚浸泡过夜将上清液转入分液漏斗中再用石油醚分两次洗涤三
6、角瓶及样品合并洗涤液于分液漏斗中待净化法准确称取样品置于具塞三角瓶中加石油醚于电动振荡器上振荡提取液转移入离心杯中每次用石油醚洗涤三角瓶后倒入离心杯中离心上清液合并于分液漏斗中待净化果蔬水生植物样藕的提取法准确称取样品置于组织捣碎机缸内快速捣碎称取匀浆置于三角瓶中加丙酮振摇浸泡后过滤入分液漏斗中残渣用丙酮分三次洗涤洗涤液合并于分液漏斗中然后加入石油醚振摇静止分层后将下层丙酮水溶液移入另一分液漏斗中用石油醚再提取一次用洗涤分液漏斗并加入提取液中而后加硫酸钠溶液振摇静置分层弃去下层丙酮水溶液石油醚提取液待净化法准确称取鲜样加无水硫酸钠于组织捣碎机缸中加入丙酮石油醚快速捣碎浆液经装有助滤剂的布氏漏斗
7、抽滤然后用丙酮冲洗残渣直至滤液近无色止滤液移入分液漏斗中加硫酸钠溶液振摇静止分层后弃去水层待净化茶叶样品的提取准确称取茶叶样干样放入具塞三角瓶中加入正己烷丙酮振摇后浸泡过夜而后用装有玻璃纤维的漏斗过滤下接容量瓶用正己烷定容然后取相当于茶叶样待净化禽畜包括鸟兽鱼蚯蚓样的提取法消煮法准确称取样品置于具塞三角瓶中加入消化液冰乙酸盖好玻璃塞静置冷消化液以上然后在水浴中热消解待冷却后加石油醚振摇静止分层后用细嘴滴管将石油醚层移入分液漏斗中再以石油醚分两次重复提取最后一次在三角瓶中缓缓加入蒸馏水至瓶颈吸尽石油醚浮层合并三次提取液于分液漏斗中待净化法索氏提取法适用于样品量不大又易碎的动物内脏昆虫蚯蚓等小动物
8、准确称取均样放入研钵中加入无水硫酸钠研成粉状装入滤纸筒内放入索氏提取器中用石油醚浸泡过夜后抽提冷却后将提取液转入容量瓶中在室温下用石油醚定容至刻度净化法浓硫酸净化法适用于土壤粮食果蔬水生植物及动物肉类样品在盛有石油醚提取液的分液漏斗中按提取液体积的十分之一数量加入浓硫酸振摇静置分层后弃去硫酸层注意用硫酸净化过程中要防止发热爆炸加硫酸后开始要慢慢振摇不断放气然后剧烈振摇按上述步骤重复数次直至加入的石油醚提取液二相界面清晰均呈无色透明时止然后向石油醚提取液中加入其体积量一半左右的硫酸钠液振摇十余次将其静置分层后弃去水层如此重复至提取液呈中性时止一般次石油醚提取液再经过装有无水硫酸钠的筒型漏斗脱水滤
9、入适当规格的容量瓶中定容供气相色谱测定法酸性硅藻土柱层析法适用于茶叶蚯蚓等小动物及动物内脏样品取内径长干燥的层析柱柱底端塞上少量玻璃棉加约厚的无水硫酸钠再装入新调制的酸性硅藻土硅藻土加发烟硫酸拌匀后再加浓硫酸拌匀即可上面再装厚无水硫酸钠用橡皮锤子轻轻敲打柱子使其松紧适度取待净化的提取液置于浓缩器中浓缩到倾入装好的层析柱中承接适当规格的容量瓶收集淋洗液待层析柱中提取液刚进入无水硫酸钠层后用与提取液相同的溶剂石油醚或正己烷反复淋洗层析柱直到容量瓶收集到定容体积为止供气相色谱测定色谱测定操作仪器的调整汽化室温度柱温度检测器温度载气流速根据仪器的情况选用记录仪纸速衰减根据样品中被测组分含量适当调节记录
10、器衰减校准定量方法外标法标准样品使用次数使用标准样品周期性的重复校准视仪器的稳定性决定周期长短若仪器稳定可测定个试样校准一次标准样品的制备准确称取一定量的色谱纯标准样品每种溶于异辛烷六六六先用少量苯溶解在容量瓶中定容在下贮存中间溶液用移液管量取八种储备液移至容量瓶中用异辛烷稀释至刻度八种储备液取的体积比为六六六六六六六六六六六六标准工作液的配制根据检测器的灵敏度及线性要求用石油醚稀释中间溶液配制成几种浓度的标准工作液在下贮存气相色谱中使用标准溶液的条件标准样品的进样体积与试样进样体积相同标准样品的响应值接近试样的响应值调节仪器重复性条件一个样品连续注射进样两次其峰高相对偏差不大于即认为仪器处理
11、于稳定状态标准样品与试样尽可能同时进样分析校准数据的表示试样中组分按式校准式中试样中组分的含量标准溶液中组分的含量试样中组分的峰高或峰面积标准溶液中组分的峰高或峰面积进样试验进样进样方式注射进样进样量一次进样量操作用清洁注射器在待测样品中抽吸几次排除所有气泡后抽取所需进样体积迅速注射入色谱仪中并立即拔出注射器色谱图的考察标准色谱图六六六滴滴涕气相色谱图六六六六六六六六六六六六柱填充剂目或目载气氮气柱温定性分析组分的出峰次序六六六六六六六六六六六六检验可能存在的干扰采用双柱定性用目色谱柱测定后再用目色谱柱在相同条件下进行确准检验色谱分析可确定各组分及有无干扰定量分析色谱峰的测量以峰的起点和终点的
12、联线作为峰底以峰高极大值对时间轴作垂线对应的时间即为保留时间此线从峰顶至峰底间的线段即为峰高计算式中样品中组分农药的含量样品中组分农药的峰高或峰面积标样中组分农药的绝对量或峰面积样品定容体积标样中组分农药的峰高样品的进样量样品的重量结果的表示定性结果根据标准色谱图各组分的保留时间来确定被测试样中出现的组分数目和组分名称定量结果含量的表示方法根据计算出的各组分的含量以表示精密度见表准确度见表表精密度重复性和再现性玉米样试样加入量浓度项目六六六六六六六六六六六六重复性再现性重复性重复性重复性再现性再现性再现性协作实验室数量注高浓度溶液中浓度溶液低浓度溶液表准确度玉米样加标回收率试样加入量浓度项目六
13、六六六六六六六六六六六回收率回收率回收率协作实验室数量表精密度重复性和再现性苹果样试样加入量浓度项目六六六六六六六六六六六六重复性再现性重复性重复性重复性再现性再现性再现性协作实验室数量注高浓度溶液中浓度溶液低浓度溶液表准确度苹果样加标回收率试样加入量浓度项目六六六六六六六六六六六六回收率回收率回收率协作实验室数量表精密度重复性和再现性藕样试样加入量浓度项目六六六六六六六六六六六六重复性再现性重复性重复性重复性再现性再现性再现性协作实验室数量注高浓度溶液中浓度溶液低浓度溶液表准确度藕样加标回收率试样加入量浓度项目六六六六六六六六六六六六回收率回收率回收率协作实验室数量表精密度重复性和再现性猪肉
14、样试样加入量浓度项目六六六六六六六六六六六六重复性再现性重复性重复性重复性再现性再现性再现性协作实验室数量注高浓度溶液中浓度溶液低浓度溶液表准确度猪肉样加标回收率试样加入量浓度项目六六六六六六六六六六六六回收率回收率回收率协作实验室数量表精密度重复性和再现性鱼样试样加入量浓度项目六六六六六六六六六六六六重复性再现性重复性重复性重复性再现性再现性再现性协作实验室数量注高浓度溶液中浓度溶液低浓度溶液表准确度鱼样加标回收率试样加入量浓度项目六六六六六六六六六六六六回收率回收率回收率协作实验室数量表精密度重复性和再现性鹌鹑样试样加入量浓度项目六六六六六六六六六六六六重复性再现性重复性重复性重复性再现性再现性再现性协作实验室数量注高浓度溶液中浓度溶液低浓度溶液表准确度鹌鹑样加标回收率试样加入量浓度项目六六六六六六六六六六六六回收率回收率回收率协作实验室数量检测限当气相色谱仪仪器的灵敏度最大时以噪音的倍作为仪器的检测限本方法要求仪器的最小检测量低于见表表检测限农药种类最小检测量六六六六六六六六六六六六附加说明本标准由国家环境保护局科技标准司和农业部环能司提出本标准由农业部环境保护科研监测所负责起草本标准主要起草人黄士忠冯秀琼姚建仁袁秀文万兆良陈国光王继军李治祥张俊亭
