1、ICS 65. 020. 30 B 44 GB 中华人民共和国国家标准dEE 4llnHU 4lnunu nunuL nHUn/一ny一?-7AH户hv41t户。户hv户hu4l，nJ内/n/nuvnudnudnHdnHUanME A斗A斗nt叮lAEE,ABEt-JV 干中4E，nRUAAAA吁户hu户hunkuphunJn/nJnJ nudn叫JvnHdnwdAH.an-AAAAIda-aESEAt-,AEE TTTT JffJ/fJ/JIf BBBB GGGG 实验动物微生物学检测方法(2)Laboratory animal一-Microbiological examination -m
2、ethods 2001 - 08 -29发布2002 - 05 -01实施中华人民共和国国家质量监督检验检菇总局发布GB/ T 14926.16-2001 前本标准是对GB/T14926.16一1994(实验动物乙型洛血性链球菌检测方法的修订。本标准增加了6.3.3生化试验几种具有代表性的动物致病性链球菌的生化特性;增加了6.3.4链激酶试验阳性飞删除了GB/T14926.16-1994中5.3.3CAMP试验、5.3.4氯化纳一七叶灵试验和5.3.5马尿酸铀水解试验。58 本标准由中华人民共和国科学技术部提出并归口。本标准起草单位:中国实验动物学会。本标准主要起草人:黄韧。本标准于1994年
3、1月首次发布。中华人民共和国国家标准实验动物乙型溶血性链球菌检测方法1 范围Laboratory animal- Method for examination of hemol yticstre ptococcus 本标准规定了实验动物乙型溶血性链球菌的检测方法。本标准适用于小鼠、大鼠、豚鼠、地鼠和兔乙型溶血性链球菌的检测。2 引用标准G/T 14926.16- 2001 代替GB/T14926.16一1994下列标准所包含的条文，通过在本标准中引用而构成为本标准的条文。本标准出版时，所示版本均为有效。所有标准都会被修订，使用本标准的各方应探讨使用下列标准最新版本的可能性。GB/ T 149
4、26. 42- 2001 实验动物细菌学检测标本采集GB/ T 149 26. 43- 2001 实验动物细菌学检测染色法、培养基和试剂3 原理乙型溶血性链球菌是卢溶血性的革兰阳性球菌，呈链状排列，具有链激酶试验阳性等生化特征。因此，可通过菌落生长、菌体和生化反应特征进行鉴定。4 主要设备和材料4. 1 普通恒温培养箱。4. 2 生物显微镜。4. 3 恒温水浴箱。5 培养基和试剂5. 1 血琼脂平皿。5. 2 糖发酵培养基。5. 3 杆菌肤纸片。5.4 0.25%氯化钙。5. 5 肉浸液培养基。5. 6 草酸饵。中华人民共和国国家质量监督检验检疫总局2001-08 -29批准2002 - 05
5、 -01实施59 GB / T 14926. 16一一2001检测程序6 杆菌肤敏感试验链激酶试验操作步骤7. 1 采样采取呼吸道或病灶分泌物或服汁。7- 2 分离培养将己接种的血琼脂平皿置(36土l)C培养18，._.24人7. 3 鉴定7- 3. 1 菌落特征在血琼脂平皿上(36士l)C培养18，._.24h形成1.0mm左右，灰白色圆形，凸起，半透明或不透明，表面光滑，周围有2，._.4mm界限分明，无色透明溶血环(溶血)的小菌落。7. 3. 2 菌体特征革兰阳性，球形或椭圆形，直径O.6，._.l.Om，呈链状排列，短者4，._.8个，长者20个左右。固体培养基上生长者多呈短链或葡萄状
6、，而液体培养基中则可形成典型的链球状排列。60 7 GB / T 14926.16- 2001 7. 3. 3 链激酶试验阳性吸取草酸饵人血浆0.2mL，加0.8mL灭菌生理盐水，混匀，再加入24h (36土l)C培养的链球菌培养物0.5mL及0.25%氯化钙0.25mL(如氯化钙己潮解，可适当加大至o.3%0. 35%)，振荡摇匀，置于(36士l)C水浴中10min，血浆混合物自行凝固(凝固程度至试管倒置，内容物不流动)，然后观察凝块重新完全溶解的时间，完全溶解为阳性，如24h后不溶解即为阴性。草酸饵人血浆配制:草酸饵0.01 g放入灭菌小试管中，再加入5mL人血，混匀，经离心沉淀，吸取上清
7、液即为草酸饵人血浆。7. 3.4 杆菌肤敏感试验阳性待检菌株纯培养物涂布于血琼脂平皿上，用灭菌慑子取每片含有0.04单位的杆菌肤纸片，放于琼脂表面，于(36土l)C培养24h，如有抑菌带出现即为阳性，同时用已知阳性菌株作为对照。8 报告结果凡符合上述各项检测结果者作出阳性报告，不符合者作出阴性报告。61 FCON-导.N叮!叮叮.Nm叮CON-5.N叮俨问筒。OONi止.N叮!.N叮FCON-.N白叮!二N叮俨同阁。同阁。同阁。华人民共和国家标准实验动物微生物学检测方法(2)GB/T 14926.1-14926.6-2001 GB/T 14926.8-14926.17 2001 国中GB/T 14926.41-2叫01GB/T 14926.44-14926.49 2001 中国标准出版社出版北京复兴门外三里洞北街16号邮政编码:100045电话:68523946中国标准出版社秦皇岛印刷厂印刷新华书店北京发行所发行各地新华书店经售68517548 普* 印张6字数180千字2002年2月第一次印刷开本880X12301/16 2002年2月第一版印数1-2000峰7巳定价45.00网址书号:155066 1-18097 也略595-547 版权专有侵权必究举报电话;(010)68533533科目GB/T 14926. 1-2001 H
