1、ICS 65020B 04中华 人民共和 国国家标准农业部953号公告一1032007转基因植物及其产品环境安全检测抗虫玉米第3部分：外源基因漂移Evaluation of environmental impact of genetically modified plants andits derived productsInsect-resistant maizePart 3：Gene flow20071218发布 2008-0301实施中华人民共和国农业部发布前 言本标准由中华人民共和国农业部科技教育司提出。本标准由全国农业转基因生物安全管理标准化技术委员会归口。本标准起草单位：中国农业科
2、学院植物保护研究所、农业部科技发展中心。本标准主要起草人：王振营、刘信、彭于发、何康来、白树雄、厉建萌。本标准为首次发布。农业部953号公告一1032007转基因植物及其产品环境安全检测抗虫玉米第3部分：外源基因漂移1范围本标准规定了转基因抗虫玉米外源基因漂移的检测方法。本标准适用于转基因抗虫玉米与栽培玉米的异交率以及基因漂移距离和频率的检测。2规范性引用文件下列文件中的条款通过本标准的引用而成为本标准的条款。凡是注日期的引用文件，其随后所有的修改单(不包括勘误的内容)或修订版均不适用于本标准。然而，鼓励根据本标准达成协议的各方研究是否可使用这些文件的最新版本。凡是不注日期的引用文件，其最新版
3、本适用于本标准。GB 44041粮食作物种子禾谷类NYT 7201 2003转基因玉米环境安全检测技术规范第1部分：生存竞争能力检测农业部953号公告101 2007转基因植物及其产品环境安全检测抗虫玉米第1部分：抗虫性3术语和定义下列术语和定义适用于本部分。31异交率outcrossing rate转基因抗虫玉米与非转基因玉米品种自然杂交的比率。32基因漂移gene flow转基因抗虫玉米中的外源基因通过花粉扩散向其他栽培玉米品种自然转移的行为。4要求4 1试验材料转基因抗虫玉米品种(系)，对应的非转基因玉米品种(系)或与转基因抗虫玉米生育期相当的当地普通栽培品种。上述材料的质量应达到GB
4、44041中不低于二级玉米种子的要求。42隔离措施按农业部953号公告一1012007中“42隔离措施”执行。4 3其他要求按NYT 7201 2003中“4要求”执行。5试验方法5 1试验设计试验地面积不小于10 000 rn2(100mXl00m)，在其中央划出一个25 m2(5mX 5m)小区种植转基】农业部953号公告一10 32007因抗虫玉米，周围种植非转基因玉米。5 2播种转基因抗虫玉米原则上应分2次播种，隔一行种一行，使之散粉期与非转基因玉米抽丝期相遇，按常规播种量播种。53去雄在抽雄期，及时拔掉非转基因玉米露出顶叶尚未散粉的雄穗，去雄要及时、干净、彻底，不要留残枝，在抽雄期每
5、天清晨拔除一次，不能间断。拔除的雄穗要带出距试验地200 m以外，以防散粉。当转基因抗虫玉米是显性胚乳性状，如黄色籽粒或非糯，而非转基因玉米是白色籽粒或甜、糯玉米时，或为转基因抗虫玉米同时具有耐除草剂基因时，相应的非转基因玉米可不必去雄。5 4调查方法在玉米成熟后收获时，沿试验地对角线的4个方向，分别用A、B、C、D标记，沿对角线方向距转基因抗虫玉米种植区15m、30m和60m，每点随机收获10株玉米(第1果穗)。并按照A1，A2，A3，A10的顺序作上标记，晒干后储存待进一步检测。记录收获的每个玉米果穗的籽粒总数。5 5检测方法(5 5 1、5 5 2或5 5 3任选其一)551直接观测当非
6、转基因玉米去雄后，根据非转基因玉米在不同方向、距转基因抗虫玉米不同距离收获的玉米籽粒数量，确定花粉传播距离和不同距离的异交率。5 5 2胚乳检测用胚乳显隐性性状进行鉴别。根据不同方向、距转基因抗虫玉米不同距离收获的玉米籽粒中表现转基因抗虫玉米胚乳性状的数量，确定转基因抗虫玉米花粉传播距离和不同距离的异交率。只有当转基因抗虫玉米是显性胚乳性状，如黄色籽粒或非糯，适用该方法。553生物测定当转基因抗虫玉米同时具备耐除草剂性能时，将不同距离收获的10个果穗的玉米籽粒在温室或田间条件下分区全部播种。在玉米出苗后，调查出苗数。待玉米长至3片4片叶时，按规定浓度喷施转基因抗虫耐除草剂玉米所耐除草剂，7 d后对存活植株再喷一次除草剂，喷第二次除草剂，14 d后调查不同处理正常存活的玉米株数，测定不同方向、不同距离收获的玉米籽粒中耐除草剂的数量，确定花粉传播距离和不同距离的异交率。56结果表述5 6 1异交率异交率按公式(1)计算；P一拿100(1)式中：P异交率，单位为百分率()；N每穗玉米中含外源基因的玉米籽粒数量，单位为粒；丁每穗籽粒总量，单位为粒；若非转基因玉米为人为去雄的，此时的T为相应非转基因玉米在距转基因抗虫玉米1 m处10个果穗的平均籽粒数量。计算结果保留2位小数。562基因漂移距离和频率根据检测结果，确定外源基因在不同方向和不同距离的异交率，进而确定漂移距离。
